Bir Fare Modelinde İnfrarenal Abdominal Aort Bağlama Ekipmanları tarafından tekrarlanabilir Arter denüdasyon Yaralanma
Summary
arteriyel denüdasyon yaralanmasının ardından yeniden endotelizas- hücresel ve moleküler mekanizmaların anlaşılması trombozu ve arterlerin restenoz önlemede büyük önem taşımaktadır. Burada İnfrarenal abdominal aorta tekrarlanabilir arter denüdasyon yaralanması için bir protokol açıklar. prosedür fare modelleri kullanılarak endotel rejenerasyon düzenleyen altında yatan mekanizmaları araştırmak için geliştirilmiştir.
Abstract
Perkütan vasküler girişimler eşit sonradan tromboz ve restenoz yol arter denüdasyon yaralanmalara neden. Bu komplikasyonlar yara kenarlarından içinde yeniden endotelizas- içinde bozuklukları isnat edilebilir. Yine, yeniden endotelizas- hücresel ve moleküler mekanizmalar tanımlanmalıdır kalır. arteriyel soyulmasından sonra yeniden endothelialization incelemek için birçok hayvan modeli mevcut iken, birkaç nedeniyle cerrahi sınırlamalar fare yapılmaktadır. Bu transgenik fare hatları yararlanmak ve yeniden endotelizas- sürecine belirli genlerin katkısını araştırmak için fırsat zayıflatmaktadır. Burada, dış vasküler sıkma kullanarak infrarenal abdominal aorta arteriyel denüdasyon yaralanma yüksek tekrarlanabilir fare modeli oluşturmak için bir adım-adım protokol mevcut. fibrinojen ve β-katenin için yaralı aorta İmmünositokimyasal boyama yanlısı bir trombotik yüzeyi maruz kalma göstermeksırasıyla, Endotelli sınır d. Burada sunulan yöntem, transgenik fare modellerinde arteriyel denüdasyon yaralanma heybetli için benzersiz pratik bir araç yaratmak, hız, mükemmel genel sağkalım oranı ve görece teknik kolaylığı gibi avantajları vardır. Bu yöntemi kullanarak, araştırmacılar, normal ya da patolojik koşullar altında yeniden endotelizasyon mekanizmalarını aydınlatmak olabilir.
Introduction
Tromboz ve restenoz gibi endovasküler balon anjiyoplasti ve stent 1,2 olarak perkütan vasküler müdahaleler, uygulanan hastalarda ciddi erken ve geç komplikasyonlar vardır. Çeşitli stratejiler Bu komplikasyonları, özellikle ikili antiplatelet tedavi ve ilaç salınımlı stent ele istihdam edilmiştir. Ancak, küçük odak tromboz ve restenoz, endotel hücre kapsama (denüdasyon) yani kaybının altında yatan neden konulmuş. Denüdasyon yaralanması nedeniyle kan damarı duvarına mekanik travmaya girişimsel işlemler kaçınılmaz bir sonucudur. Bu mekanik travma kan 3 dolaşımdaki hasar ve bazal membran ve vasküler düz kas koruyucu endotel tabakası ve maruziyet kaldırılmasına neden olabilir. Bu alanlarda, endotel hücrelerin kaybı sadece trombosit yapışması ve daha sonra tromboz teşvik eden bir ön-trombotik ve pro-inflamatuar ortamını oluşturan, amaLSO göç ve neointimal kalınlaşması ve restenoz 4'te elde edilen, vasküler düz kas hücrelerinin proliferasyonunu uyarır. Bu komplikasyonlar ve bunların ilişkili tedaviler, insan sağlığını etkileyen önemli morbidite, en önemlisi tekrarlayan iskemik hastalık ve kanama olaylara yol açar.
Yeniden endotelizas- yara kenarlarından soyulmuş yaralanma trombozu ve restenoz 5 önlemede büyük önem taşımaktadır. Stent kapsama 6,7 struts ile Otopsi sonuçları ve hayvan modelleri etkin tromboz azaltılmış oranları göstermiştir. İlaç salınımlı stentler, düz kas proliferasyonu ve neointimal hiperplazi inhibe ederek restenoz oranlarını azaltmak arteriyel yeniden endotelizas- önemli bozuklukları ve geç tromboz 3 artan oranlarda neden için tasarlanmış. Ne yazık ki, yeniden endotelizas- mekanizmaları anlamak büyük ölçüde ap eksikliği ile sınırlı yavaş bir süreç olmuşturpropriate hayvan modelleri 8.
Arteryel harabiyeti takip endotel hücreleri, vasküler düz kas hücrelerinin rolleri anlamak için çeşitli hayvan modelleri 7,9,10 oluşturulmuştur. Sıçan karotis arter balon yaralanma modeli en iyi karakterize ve brüt hücresel ve moleküler düzeyde 11'de denüdasyon yaralanma etkilerini incelemek için istihdam edilmiştir. Bununla birlikte, mükemmel sağkalım oranları ile arteriyel denüdasyon yaralanma yüksek tekrarlanabilir fare modeli eksik ve çok daha iyi çoklu ortamlarda vasküler rejenerasyon aydınlatmak için kullanılabilir çoklu transgenik hatları yararlanmak için gereklidir.
Bu yazıda, tekrarlanabilir ve gerçekleştirmek için basit arter yaranın sıyrılmasından bir fare modeli sunar. yaklaşım, birkaç transgenik hatlarının minimal morbidite ve mortalite göstermiştir. Çünkü genetik olarak tadil edilmiş hücre soylarının, geniş sayıda, bu model için kullanılabilecektirdenüdasyon yaralanma sonrası yeniden endothelialization altında yatan moleküler mekanizmaları aydınlatmak.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nedeniyle böyle bir balon anjiyoplasti ve stent damar olarak girişimsel, arteryel denüdasyon yaralanması, erken ve geç vasküler tromboz ve restenoz neden ve tekrarlayan iskemik olaylar 3,12 katkıda bulunur. İlginçtir, cerrahi damar sıkma da perkütan olsun veya 13 açık, herhangi bir damar prosedürü uygulanan hastaların sorunun kapsamını genişleterek, arteriyel soyulma nedeni olarak suçlanmıştır. bozulmuş yeniden endotelizasyonunun tromboz ve restenoz oldukça tanınan nedeni …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma MLIA Sağlık (HL130290) Ulusal Enstitüleri Eli ve Rejeneratif Tıp Edythe Geniş Merkezi'nden hibe ile desteklenen ve ASS ve AIM, Philip J. Whitcome Bursu AIM için UCLA Eğitim Programı'nda Kök Hücre Araştırmaları ve oldu.
Materials
| Zeiss Discovery.V12 Stereomicroscope | Zeiss | 495037-9904-000 | |
| Rodent Heated Surgical Platform | Protech International | RES4000 | Heated platform for body temperature maintenance with nosecone for anesthestic maintenance and on which surgical procedure is performed |
| Isoflurane | Henry Schein | 50033 | 4% Induction; 2.5% Maintenance |
| Isoflurane Vaporizer | Summit Medical Equipment | 470062 | |
| Stryker T/Pump Warm Water Recirculator | Kent Scientific | TP-700 | |
| Artifical Tears Lubricant Opthalmic Ointment | Akorn Animal Health | 17478-162-35 | |
| Carprieve (Carprofen) | Norbrook Laboratories | NDC 55529-131-01 | |
| Oster™ A5 Professional Animal Clipper | M.Schneider & Sons Inc. | 78005010 | Use with animal clipper size 40 |
| Adjustable Wire Retractor | Fine Science Tools | 17004-05 | |
| Schwartz Micro Serrefines – Sharp Bend | Fine Science Tools | 18052-03 | |
| Surgical Instruments | Fine Science Tools | sharp dissecting forceps, blunt forceps, fine scissors, spring scissors, hemostat | |
| 0.5% Marcaine | Hospira | 0409-1610-50 | |
| 5-0 Suture, Vicryl | Fisher Scientific | NC0189890 | tapered needle |
| Vetbond | Fisher Scientific | NC0304169 | |
| Falcon® 35 mm Not TC-Treated Easy-Grip Style Bacteriological Petri Dish | Corning | 351008 | |
| Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit | Dow Corning | 3097358-1004 | |
| Dissecting pins | Fisher Scientific | NC9681411 | |
References
- Farooq, V., Gogas, B. D., Serruys, P. W. Restenosis: delineating the numerous causes of drug-eluting stent restenosis. Circ Cardiovasc Interv. 4, 195-205 (2011).
- Tada, T., et al. Risk of stent thrombosis among bare-metal stents, first-generation drug-eluting stents, and second-generation drug-eluting stents: results from a registry of 18,334 patients. JACC Cardiovasc Interv. 6, 1267-1274 (2013).
- Otsuka, F., et al. The importance of the endothelium in atherothrombosis and coronary stenting. Nat Rev Cardiol. 9, 439-453 (2012).
- Kipshidze, N., et al. Role of the endothelium in modulating neointimal formation: vasculoprotective approaches to attenuate restenosis after percutaneous coronary interventions. J Am Coll Cardiol. 44, 733-739 (2004).
- Finn, A. V., et al. Pathological correlates of late drug-eluting stent thrombosis: strut coverage as a marker of endothelialization. Circulation. 115, 2435-2441 (2007).
- Joner, M., et al. Pathology of drug-eluting stents in humans: delayed healing and late thrombotic risk. J Am Coll Cardiol. 48, 193-202 (2006).
- Joner, M., et al. Endothelial cell recovery between comparator polymer-based drug-eluting stents. J Am Coll Cardiol. 52, 333-342 (2008).
- McDonald, A. I., Iruela-Arispe, M. L. Healing arterial ulcers: Endothelial lining regeneration upon vascular denudation injury. Vascul Pharmacol. 72, 9-15 (2015).
- Fingerle, J., Tina Au, Y. P., Clowes, A. W., Reidy, M. A. Intimal Lesion Formation in Rat Carotid Arteries after Endothelial Denudation in Absence of Medial Injury. Arteriosclerosis. 10, 1082-1087 (1990).
- Granada, J. F., et al. Vascular response to zotarolimus-coated balloons in injured superficial femoral arteries of the familial hypercholesterolemic Swine. Circ Cardiovasc Interv. 4, 447-455 (2011).
- Tulis, D. A. Rat carotid artery balloon injury model. Methods Mol Med. 139, 1-30 (2007).
- Bavry, A. A., Bhatt, D. L. Appropriate use of drug-eluting stents: balancing the reduction in restenosis with the concern of late thrombosis. Lancet (London, England). 371, 2134-2143 (2008).
- Gucu, A., et al. Effects of temporary vascular occluder poloxamer 407 Gel on the endothelium. J Cardiothorac Surg. 8, (2013).
- Holt, A. W., Tulis, D. A. Experimental Rat and Mouse Carotid Artery Surgery: Injury & Remodeling Studies. ISRN Minim Invasive Surg. 2013, (2013).
- Nam, D., et al. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297, 1535-1543 (2009).
- Lindner, V., Fingler, J., Reidy, M. A. Mouse Model of Arterial Injury. Circ Res. 73, 792-796 (1993).
- Kumar, A., Lindner, V. Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 17, 2238-2244 (1997).
- Hehrlein, C., Weinschenk, I., Metz, J. Long period of balloon inflation and the implantation of stents potentiate smooth muscle cell death. Possible role of chronic vascular injury in restenosis. Int J Cardiovasc Intervent. 2, 21-26 (1999).
