라이브 영상은 탁 내성 유방암의 미세 소관 동적 불안정성을 연구하는

Richard Wang; Harris Wang; Zhixiang Wang

doi:10.3791/55027

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방법 논문

라이브 영상은 탁 내성 유방암의 미세 소관 동적 불안정성을 연구하는

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DOI:

10.3791/55027

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2017년 2월 20일

Richard Wang¹ , Harris Wang¹ , Zhixiang Wang¹

¹Department of Medical Genetics, Signal Transduction Research Group, Faculty of Medicine and Dentistry, University of Alberta

이 논문에서

요약

이 논문에서는 도세탁셀 저항성 유방암 세포(MCF-7_TXT)에서 미세소관 동적 불안정성을 측정하기 위한 생체 내 방법을 설명하는 프로토콜을 보고합니다. 이 방법에서는 디콘볼루션 현미경 이미징 시스템을 사용하여 표적 세포에서 GFP-튜불린의 발현을 검출합니다.

초록

docetaxel과 같은 탁산은 암 치료에 일반적으로 의존하는 미세소관 표적 제제(MTA) 그룹에 속합니다. 그러나, 암세포에 있는 taxane 저항은 약의 장기 사용법의 효과를 급격히 감소시킵니다. 축적된 증거에 따르면 탁산 내성의 기전에는 약물 유출 단백질의 과발현으로 인한 다제내성 발생과 같은 일반적인 메커니즘과 미세소관 역학을 포함하는 것과 같은 탁산 특이적 메커니즘이 모두 포함됩니다.

taxanes는 세포 미세소관을 표적으로 하기 때문에 미세소관 동적 불안정성을 측정하는 것은 taxane 저항성의 메커니즘을 결정하는 데 중요한 단계이며 이 저항성을 극복하는 방법에 대한 통찰력을 제공합니다. 실험에서는 미세소관의 동적 불안정성을 측정하기 위해 생체 내 방법을 사용했습니다. GFP 태그가 지정된 α-튜불린을 발현하여 MCF-7 세포의 미세소관에 통합하여 민감한 카메라를 사용하여 타임 랩스로 미세소관 역학을 기록할 수 있었습니다. 그 결과, 비저항성 모세포인 MCF-7_CC 세포와 대조적으로, 도세탁셀 내성 MCF-7_TXT 세포의 미세소관 역학은 도세탁셀 처리에 둔감하며, 이는 도세탁셀에 의한 유사분열 정지 및 세포사멸에 대한 내성을 유발하는 것으로 나타났습니다. 이 논문에서는 미세소관 동적 불안정성을 측정하는 in vivo 방법을 간략하게 설명합니다.

서론

유방암 사망률의 주요 원인은 전이 ^{^{^(1, 2)을}} 통해서이다. 첫번째 줄은 전이성 유방암 ^{^2,} ^{^3,} ^{^4,} ^{^5,} ^6의 치료식이 요법 등 도세탁셀과 같은 탁산 파클리탁셀은 현재 사용되고있다. 그들은 미세 소관 역학을 방해 미세 소관 타겟팅 에이전트 (MTA)의 그룹의 일부입니다. 그러나, 치료 요법 탁산을 사용하는 가장 큰 과제 중 하나는 재발 ⁷ 리드 암세포 탁산 저항의 개발이다. 약물 내성은 전이성 유방암 환자 중 ⁷ 모든 사망의 90 % 이상을 차지한다.

미세 소관은 α-와 β-tubulin에 이종의 중합에 의해 형성된다클래스 = "외부 참조"> ^8, ^9. 미소 관 역학의 정확한 조절은 세포....