En metod för att utvärdera Insekts Effekt mot Bed Bug,<em> Cimex lectularius</em>, Ägg och First instars
Summary
Insekts utvärderingar ofta riktade mot vuxna insekter, snarare än omogna stadier. Här presenterar vi ett protokoll för utvärdering av insekticider mot sängen bug ägg med en jämförelse med den första nymphal bed bug skede. Dessa protokoll kan justeras för andra insekter för att utvärdera insekts effekt i icke-vuxna levnadsstadier.
Abstract
Standardtoxicitets utvärderingar av insekticider mot skadeinsekter i första hand genomförs på vuxna insekter. Utvärderingarna är baserade på en dos-respons eller koncentration-respons-kurva, där dödligheten ökar allteftersom dosen eller koncentrationen av en insekticid ökas. Standard dödlig koncentration (LC 50) och letal dos (LD 50) tester som resulterar i 50% dödlighet av en testpopulation kan vara en utmaning för utvärdering av toxiciteten av insekticider mot icke-vuxna insektslivsstadier, såsom ägg och tidigt stadiet eller nymphal stadier . Men är denna information som är nödvändig för att förstå insekts effekt i alla bed bug levnadsstadier, vilket påverkar kontroll- och behandlingsarbetet. Detta protokoll använder en standard doppa bioanalys modifierats för säng bug ägg och en kontakt insektsbekämpning analys för behandling av nymphal första instars. Dessa analyser producera en koncentration-svarskurva för att ytterligare kvantifiera LC 50-värden för insekts utvärderingar.
Introduction
Vägglöss är en viktig urban skadedjur som kan orsaka blodförlust, hudirritationer, sömnlöshet, depression och ångest i sina mänskliga värdar 1, 2, 3, 4, 5, 6. Kostnaderna för att eliminera och kontrollera vägglöss är höga och ofta kräver flera besök till ett hem med en skadedjursbekämpning företag 7. Flera besök krävs vanligtvis på grund av den kryptiska beteende vägglöss och de svårigheter som är förknippade med att döda dem. I synnerhet, bed bug ägg är svår att kontrollera på grund av deras ringa storlek och skydd av embryot genom äggskalet.
För närvarande är en vanlig metod för många skadedjursbekämpning företag i hela USA för att behandla ett hem för vägglöss genom kemiska insektsmedel. Det är väl käntatt äggen är svåra att kontrollera, har så många företag genomfört en två veckors tid för upprepade behandlingar 8. Detta tillåter bed bug ägg tillräckligt med tid att kläckas, så att den första instar kommer att dyka upp och purportedly vara lättare att döda med insekticider. Det finns dock en brist på studier som utvärderar effekten av flytande insekticider mot sängen bug ägg och första instars.
Insektägg har dokumenterats att vara den svåraste livsfas att styra i stads skadeinsekter, annat än vägglöss, förutom många skadedjur inom jordbruket. De flesta av dessa svårigheter har tillskrivits äggskal, medan ett fåtal studier har rapporterat insektsresistens. Motstånd i ägget steget har dokumenterats i Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha dominica 12, <em> Cimex lectularius 13, och ett flertal lagrade produkt skalbaggar (dvs sågtandad plattbagge, Tribolium castaneum, cryptolestes ferrugineus och Rhyzopertha dominica). 14 resistensutveckling hos ägget stadiet och omogna stadier, samt komplikationer i samband med insekts penetrering genom äggskal, nödvändiggör behovet av insekts effekt bioanalyser mot dessa livsstadier.
Detta protokoll ger en steg-för-steg metod för att bestämma effekten av insekticider i ägget och första stadiet stadiet av gemensamma vägglöss, lectularius Cimex. Båda dessa protokoll är koncentration-respons-analyser för att medge kvantifiering av LC 50-värden. Koncentration-responsanalyser används ofta för toxikologiska studier, men detta protokoll har anpassats för att enkelt behandla grupper av säng bug ägg och första instars. Dessa analyser kan anpassasför olika insektsarter ägg och omogna stadier i livet.
Protocol
Representative Results
Discussion
A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Vi tackar Molly trofast för utspädning och bekämpningsmedel formulering hjälp. Vi vill också tacka Troy Anderson för probitanalys vägledning och Zachary Adelman för hjälp med experimentell design. Denna forskning har delvis stöd av en Entomological Foundation tilldelning och Virginia växtskydd stipendiefonder.
Materials
| Petri dishes | Fisher Scientific Inc. | 08-757-105 | Plastic |
| Filter paper | Whatman | 1001-042 | |
| Featherweight forceps | Fisher Scientific Inc. | 4750 | |
| Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin) | Bayer CropScience | ||
| Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin) | FMC Corp. | ||
| Centrifuge tube | 06-443-18 | 50 mL; flat-top threaded | |
| Fine mesh | 7250C | ||
| KimWipe | 06-666A | 11 cm X 21 cm | |
| Small paint brush | Any small paint brush | ||
| Hardboard panels | Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store | ||
| Metal weights | Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface |
References
- Sabou, M., et al. Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer’s disease results in iron deficiency anemia. Parasite. 20, (2013).
- Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius. Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).
- Leverkus, M., et al. Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin. J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).
- Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites. Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).
- Pritchard, M. J., Hwang, S. W. Severe anemia from bedbugs. Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).
- Goddard, J., de Shazo, R. Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L). Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).
- Harlan, H. J. Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius. Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).
- Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. K. . Bed Bug Handbook: The Complete Guide to Bed Bugs and Their Control. , (2007).
- Toloza, A. C., et al. Differential patterns of insecticide resistance in eggs and first instars of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) from Argentina and Bolivia. J. Med. Entomol. 45, 421-426 (2008).
- Cueto, G. M., Zerba, E. N., Picollo, M. I. Evidence of pyrethroid resistance in eggs of Pediculus humanus capitis (Phthiraptera: Pediculidae) from Argentina. J. Med. Entomol. 45, 693-697 (2008).
- Ho, S. H., Goh, P. M. Deltamethrin as a potential ovicidal pyrethroid against Plutella xylostella L. Toxicol. let. 22, 161-164 (1984).
- Bell, C. H., Hole, B. D., Evans, P. H. The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae). J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).
- Campbell, B. E., Miller, D. M. Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae). Insects. 6, 122-132 (2015).
- Price, L. A., Mills, K. A. The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control. J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).
- Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. . PoloPlus: Probit and Logit Analysis User’s Guide. , (2003).
- Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique. J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).
- Brogdon, W. G., McAllister, J. C. Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles. J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).
- Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes. PLoS One. 8 (3), (2013).
- Outram, I. Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation. J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).
