Summary

सेरेब्रल hemodynamics और के प्रकाश बिखराव गुण के एक साथ मूल्यांकन<em> में विवो</em> चूहा मस्तिष्क multispectral फैलाना reflectance इमेजिंग का उपयोग करना

Published: May 07, 2017
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Summary

मस्तिष्क hemodynamics और इन विवो चूहे के मस्तिष्क के ऊतकों के प्रकाश बिखरने गुण का एक साथ मूल्यांकन एक पारंपरिक multispectral फैलाना और परावर्तन इमेजिंग प्रणाली का उपयोग कर प्रदर्शित किया गया है।

Abstract

The simultaneous evaluation of cerebral hemodynamics and the light scattering properties of in vivo rat brain tissue is demonstrated using a conventional multispectral diffuse reflectance imaging system. This system is constructed from a broadband white light source, a motorized filter wheel with a set of narrowband interference filters, a light guide, a collecting lens, a video zoom lens, and a monochromatic charged-coupled device (CCD) camera. An ellipsoidal cranial window is made in the skull bone of a rat under isoflurane anesthesia to capture in vivo multispectral diffuse reflectance images of the cortical surface. Regulation of the fraction of inspired oxygen using a gas mixture device enables the induction of different respiratory states such as normoxia, hyperoxia, and anoxia. A Monte Carlo simulation-based multiple regression analysis for the measured multispectral diffuse reflectance images at nine wavelengths (500, 520, 540, 560, 570, 580, 600, 730, and 760 nm) is then performed to visualize the two-dimensional maps of hemodynamics and the light scattering properties of the in vivo rat brain.

Introduction

Multispectral फैलाना और परावर्तन इमेजिंग cortical ऊतकों में आंतरिक ऑप्टिकल संकेतों (IOSs) की एक स्थानिक नक्शा प्राप्त करने के लिए सबसे आम तकनीक है। IOSs इन विवो ब्रेन में मनाया मुख्य रूप से तीन घटनाएं के लिए जिम्मेदार ठहराया जाता है: रूपात्मक परिवर्तन से प्रेरित प्रकाश बिखरने गुण में प्रकाश अवशोषण में बदलाव और cortical hemodynamics के कारण बिखरने गुण, कमी या माइटोकांड्रिया में cytochromes की oxidization के आधार पर अवशोषण में बदलाव, और बदलाव 1।

निकट अवरक्त (NIR) वर्णक्रम सीमा को दिखाई (तुलना) में लाइट प्रभावी रूप से अवशोषित और जैविक ऊतक द्वारा बिखरे हुए है। इन विवो ब्रेन की फैलाना और परावर्तन स्पेक्ट्रम अवशोषण और बिखरने स्पेक्ट्रा की विशेषता है। कम बिखरने गुणांक एक नीरस बिखरने स्पेक्ट्रम प्रदर्शनी में तुलना करने के लिए NIR तरंगदैर्ध्य रेंज परिणाम में मस्तिष्क के ऊतकों की sअब तरंगदैर्य पर छोटे परिमाण ing। कम बिखरने गुणांक स्पेक्ट्रम μ s '(λ) बिजली कानून समारोह 2, 3 के रूप में हो के रूप में μ एस अनुमान लगाया जा सकता' (λ) = एक × λ बी। बिखरने बिजली ऊतक 2, 3 में रहने वाले जैविक scatterers के आकार से संबंधित है। ऊतक और cortical जीवित ऊतक की व्यवहार्यता की कमी की रूपात्मक परिवर्तन जैविक scatterers 4, 5, 6, 7, 8, 9 के आकार को प्रभावित कर सकते हैं।

multispectral फैलाना और परावर्तन इमेजिंग के लिए एक ऑप्टिकल प्रणाली आसानी से एक तापदीप्त ली से निर्माण किया जा सकताGHT स्रोत, सरल ऑप्टिकल घटकों, और एक एक रंग का आरोप लगाया युग्मित डिवाइस (सीसीडी)। इसलिए, विभिन्न एल्गोरिदम और multispectral फैलाना और परावर्तन इमेजिंग के लिए ऑप्टिकल प्रणाली cortical hemodynamics और / या ऊतक आकृति विज्ञान 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 का मूल्यांकन किया गया है।

विधि इस आलेख में वर्णित दोनों hemodynamics और प्रकाश बिखरने एक पारंपरिक multispectral फैलाना और परावर्तन इमेजिंग प्रणाली का उपयोग कर विवो में चूहे के मस्तिष्क के ऊतकों के गुणों कल्पना करने के लिए प्रयोग किया जाता है। वैकल्पिक तकनीकों पर इस विधि के फायदे दोनों मस्तिष्क hemodynamics और cortical ऊतकों में spatiotemporal परिवर्तन मूल्यांकन करने की क्षमता हैंआकृति विज्ञान, साथ ही विभिन्न मस्तिष्क रोग पशु मॉडल के लिए अपने प्रयोज्यता। इसलिए, विधि अभिघातजन्य मस्तिष्क चोट, मिर्गी का दौरा, स्ट्रोक, और ischemia की जांच के लिए उचित होगा।

Protocol

पशु की देखभाल, तैयारी, और प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल एग्रीकल्चर एंड टेक्नोलॉजी के टोक्यो विश्वविद्यालय के पशु अनुसंधान समिति द्वारा अनुमोदित किया गया। इस पद्धति के लिए, चूहा भोजन और पानी उपलब्ध यथेच्छ</…

Representative Results

विवो चूहे के दिमाग में से प्राप्त फैलाना प्रतिबिंब की प्रतिनिधि वर्णक्रमीय छवियों को चित्रा 3 में दिखाया गया है । 500, 520, 540, 560, 570, और 580 एनएम पर छवियां स्पष्ट रूप से मस्तिष्क प्…

Discussion

इस प्रोटोकॉल में सबसे महत्वपूर्ण कदम कपाल खिड़की बनाने के लिए thinned खोपड़ी क्षेत्र को हटाने है; यह अनपेक्षित खून बह रहा से बचने के लिए ध्यान से किया जाना चाहिए। उच्च सटीकता के साथ उच्च गुणवत्ता वाले बहुप?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Part of this work was supported by a Grant-in-Aid for Scientific Research (C) from the Japanese Society for the Promotion of Science (25350520, 22500401, 15K06105) and the US-ARMY ITC-PAC Research and Development Project (FA5209-15-P-0175).

Materials

150-W halogen-lamp light source Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan LA-150SAE
Light guide Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan LGC1-5L1000
Collecting lens Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan SH-F16
Interference filters l@500nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #65088
Interference filters l@520nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #65093
Interference filters l@540nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #65096
Interference filters l@560nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #67766
Interference filters l@570nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #67767
Interference filters l@580nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #65646
Interference filters l@600nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #65102
Interference filters l@730nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #65115
Interference filters l@760nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan #67777
Motorized filter wheel  Andover Corporation, NH, USA FW-MOT-12.5
16-bit cooled CCD camera Bitran, Japan BS-40
Video zoom lens Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan VZMTM300i
Spectralon white standard with 99% diffuse reflectance Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA SRS-99-020

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Nishidate, I., Mustari, A., Kawauchi, S., Sato, S., Sato, M. Simultaneous Evaluation of Cerebral Hemodynamics and Light Scattering Properties of the In Vivo Rat Brain Using Multispectral Diffuse Reflectance Imaging. J. Vis. Exp. (123), e55399, doi:10.3791/55399 (2017).

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