세포 축적을 증가 하 고 종양을 대상으로 개선에 대 한 바이러스 성 파생 된 펩 티 드 항 체 어원이 같은 말의 초기 평가 수정

Simon Beaudoin; Michel Paquette; Laurent Fafard-Couture; Mylene A. Tremblay; Roger Lecomte; Brigitte Guérin; Jeffrey V. Leyton

doi:10.3791/55440

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방법 논문

세포 축적을 증가 하 고 종양을 대상으로 개선에 대 한 바이러스 성 파생 된 펩 티 드 항 체 어원이 같은 말의 초기 평가 수정

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DOI:

10.3791/55440

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2018년 3월 8일

Simon Beaudoin¹ , Michel Paquette¹ , Laurent Fafard-Couture¹ , Mylene A. Tremblay¹ , Roger Lecomte¹^,²^,³ , Brigitte Guérin¹^,²^,³ , Jeffrey V. Leyton¹^,²^,³

¹Department of Nuclear Medicine and Radiobiology, Université de Sherbrooke, ²Sherbrooke Molecular Imaging Center (CIMS), Université de Sherbrooke, ³Sherbrooke Institute of Pharmacology

이 논문에서

요약

바이러스 성 파생 된 펩 티 드 항 체 어원이 같은 말 (ACs)에 결합 된 증가 된 종양 세포 축적과 분자 페이로드를 제공의 가능성으로 인해 기세를 얻고입니다. 펩 티 드 활용, AC 및 페이로드 세포내 축적, 및 종양을 대상으로 평가 하는 일반적인 방법을 활용 하 고,이 프로토콜 연구원 주요 초기 개발 단계에서 도움이 됩니다.

초록

항 체-어원이 같은 말 (ACs) 바이러스 파생 된 펩 티 드로 분자 페이로드 암 치료에 사용 되 고 현재 ACs에 증가 세포 축적 때문 이미징에 대 한 종양 세포 배달 에이전트의 잠재적으로 강력한 클래스는. 초기 AC에 체 외에서 동안 개발, 형광 기술 및 방사는 세포내 지역화, 축적, 효율과 대상 세포 특이성을 결정 하기 위한 충분 한. 현재, AC 세포내 축적 및 지역화에 대 한 셀을 준비 하기 위한 표준화 된 방법에 아무런 합의입니다. ACs를 바이러스 파생 된 펩 티 드로의 초기 테스트 하는 것이 여러 후보를 생성 하는 경우에 특히 중요 합니다. 세포내 축적 결정 형광 세포 표면에 ACs에서 배경 신호에 의해 영향을 받을 수와 축적의 해석을 복잡 하 게. 방사, 일반적으로 치료 세포는 분류 한 및 다른 세포 격실에 방사능 측정. 그러나, 세포 세포의 용 해 셀을 변화 하 고 종종 핵과 세포질 구획 적절 하 게 격리 됩니다. 이 페이로드 배달 속성에 잘못 된 데이터를 생성할 수 있습니다. 방사선된 바이러스 파생 된 펩 티 드 수정 ACs 종양 마우스 뒤에 방사성 핵 종 영상 베어링에서 정 맥 주입의 비보에 단계에서 종양 타겟팅 및 페이로드 배달 속성을 결정 하기 위한 강력한 방법 이다 개발입니다. 그러나, 이것은 비교적 최근의 발전 하 고 몇 그룹 펩 티 드 수정 ACs를 바이러스 파생이 방식으로 평가 했습니다. 우리는 더 정확 하 게 평가 하는 펩 티 드 수정 AC 축적 바이러스 파생 confocal 현미경 검사 법 및 방사를 사용 하는 경우에 치료 셀의 처리를 설명 합니다. 특히, trypsinizing 세포 세포 표면 제거 하는 방법 ACs 바인딩됩니다. 우리는 또한 세포 분별 법을 개선 하기 위한 방법을 제공 합니다. 마지막으로,이 프로토콜이 있습니다 vivo에서 양전자 방출 단층 촬영 (PET)를 사용 하 여 초기 종양 종양 방위 쥐에서 속성을 대상으로 평가. 우리가 사용 하는 방사성 ⁶⁴Cu (t_1/2 = 12.7 h)이 프로토콜에서 예제 페이로드로.

서론

항 체 어원이 같은 말 (ACs)는 효과적인 약물 암 치료 향상을 위한과 종양의 transformative 클래스에 성숙 하는 바이오. 단일 클론 항 체 (mAb) radioisotopes, 작은 분자 및 생물 독 소 같은 분자 페이로드를 활용의 구성, ACs 절묘 한 대상 항 원 친화성 및 특이성 암 세포에 이러한 페이로드를 전달할 수 있습니다. 따라서 ACs을 크게 줄이고 특이 독성 종양 사이트에서 페이로드 활동 증가 가능성이 있다. 치료로, 세포 독성 작은 분자 (일반적으로 언급 항 체 약 변화)를 수송 하는 ACs 기존의 치료 ¹^, 실패 한 유방암 및 Hodgkin의 림프 종 환자 치료에 대 한 승인 되었습니다. ². 또한, ACs 수송 radioisotopes (일반적으로 radioimmunoconjugates 라고 함)는 또한 개발. 이미징에 대 한 방사성 동위 원소를 수송 하는 AC 전립선 암 전이 ³식별을 위해 승인 된다. 많은 더 치료 acs 승인 ⁴에 대 한, 암 치료 ⁵개선에 ACs의 미래에 대 한 낙관론은 높다.