여기서는 자유롭게 움직이는 신생아 간질 강아지에게 뇌파 검사 (EEG)를 기록하고 그 절차, 특징 및 적용을 설명하기 위해 고안된 새로운 기술을 소개합니다. 이 방법으로 1 주일 이상 뇌파를 기록 할 수 있습니다.
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방법 논문
새로운 방법으로 자유롭게 움직이는 신생아 쥐의 뇌파 기록
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
뇌파는 뇌의 전기적 활동을 탐지하는 유용한 방법입니다. 또한, 간질이나 신경 퇴행성 장애와 같은 다양한 신경 학적 상태에 널리 사용되는 진단 도구입니다. 그러나 신생아에서 뇌파 기록을 얻는 것은 전문적인 취급과주의가 필요하기 때문에 기술적으로 어렵습니다. 여기, 신생아 쥐 (P8-P15)에서 EEG를 기록하는 새로운 방법을 제시합니다. 우리는 컴퓨터 핀 궤적을 사용하여 간단하고 신뢰할 수있는 전극을 설계했습니다. 정상 및 간질 두뇌에 고품질의 뇌파 신호를 기록하기 위해 쥐 강아지의 두개골에 쉽게 이식 할 수 있습니다. 새끼들은 간질 발작을 유도하기 위해 신경독 카이 닉 애씨드 (KA)를 복강 내 (ip) 주사 하였다. 이 수술에서 시행되는 외과 적 이식은 신생아의 다른 뇌파 검사보다 저렴합니다. 이 방법을 사용하면 1 주일 이상 동안 고품질의 안정적인 뇌파 신호를 기록 할 수 있습니다. 또한,이 과정은 성인 ra에도 적용될 수 있습니다간질이나 다른 신경계 질환을 연구하기 위해 ts와 마우스를 사용합니다.
서론
정상적인 뇌 기능을 얻기 위해서는 뉴런 간의 지속적인 통신이 필요하다는 것이 잘 알려져 있습니다. interneuronal 의사 소통은 주로 하나의 뉴런에서 정보가 두 번째 뉴런으로 전달되는 시냅스에서 발생합니다. 이 시냅스 전달은 전기적 또는 화학적 시냅스의 두 가지 유형의 전용 구조 배열에 의해 조정됩니다. 전기 생리학 (Electrophysiology)은 전반적인 신체 기능과 행동을 제어하는 간세포 통신 과정에서 발생하는 전위를 포착하는 분야입니다. EEG는 많은 전기 생리 학적 기법 중에서 가장 일반적으로 사용되는 방법입니다.
EEG는 내부 또는 외부 자극에 의해 생성 된 전기 신호의 변화를 감지하는 데 사용되는 기술입니다. 또한, 그것은 간질, 파킨슨 병 및 알츠하이머 병과 같은 다양한 신경 학적 증상의 임상 적 진단 및 결과 예측에 필수적인 검사입니다e뿐만 아니라 약리학 적 및 독성 학적 인자의 영향 3 . 일반적으로 간질 환자는 과다 흥분성과 뇌의 기능적 연결성을 손상시킵니다. 이들은 간질 간질 방전 (IEDs)으로 요약되며 예리하고 일시적인 스파이크의 형태로 EEG로 기록 될 수 있습니다. 날카로운 파도; 스파이크 - 웨이브 복합체; 또는 polyspikes
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프로토콜
동물 보호, 수술 절차 및 기록 절차는 남 중국 사범 대학 동물 관리 및 사용위원회의 지침에 따랐습니다.
1. 전극 준비 (그림 1A-C)
참고 : 컴퓨터 핀 위치는 통신 장치의 신호 인터페이스의 일부로 뾰족한 접촉입니다. 암 커넥터에 플러그되는 수 커넥터가 구성됩니다.
- 조임 장치를 사용하여 남성 핀과 여성 핀을 컴퓨터 핀 위치 ( 그림 1A )에서 조심스럽게 분리합니다. 수컷과 암컷 핀을 함께 연결하여 전극을 만들고 시아 노 아크릴 레이트를 사용하여 강한 접착 본드를 만듭니다 ( 그림 1C ).
- 증류수가 들어있는 비이커에 전극을 넣고 10 분 동안 초음파 세척기에 놓습니다. 45 ° C에서 30 분 동안 건조 오븐으로 옮깁니다. 30 분 동안 자외선을 사용하여 전극을 소독하십시오.
2. 수술 절차 (그림 1D - F)
- 멸균 수술 도구 및 stereotaxic기구를 준비합니다. 공기와 함께 isoflurane 마취 (2.5 %)를 사용하여 신생아 쥐 강아지를 마취. 강아지가 깊이 anesthetized 때 1.....
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결과
위와 같은 외과 수술이 적절하게 시행되면, 한 쥐의 신생아 강아지 뇌파 기록이 성공적으로 수행됩니다. KA 주입 10 분 후 규칙적인 행동 신호 패턴이 불규칙한 움직임과 긁힘, 떨림, 균형 감퇴의 형태로 나타났습니다. 그림 2는 대표적인 생 EEG 추적과 발작 발작, 발작 - 강장 및 발작 - 발톱 확장 된 추적을 보여줍니다. 재발 성 발작과 발작 뇌파 방전 패턴은 KA 주입 후 15-60 분 (30 ± 5.2 분, 평균 ± SEM)으로 시작되었다 ( 그림 2A 와 2B ). 그림 2D 와 2E 는 가장 일반적인 유형의 강박 성 간질 발작을 나타냅니다. 발기 부전 기간은 15.2 ± 0.9 초였다 ( 그림 2D ). 대표적인 결과는 강장 방전이 소뇌 파열 (clonic burst)이 뒤 따른다는 것을 보여 주.......
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토론
여기서는 자유롭게 움직이는 신생아 생쥐의 EEG를 유선 방법으로 획득하기위한 수술 및 기록 절차를보고합니다 ( 그림 3 ). P7-P12 쥐 강아지는 만삭 인간 신생아 10 , 11 에 해당하는 발육기 연령에 있다고 제안되었습니다. 이 연령 그룹의 쥐 새끼들과 작업 할 때 고품질의 뇌파 기록 데이터를 얻는 것은 기술적으로 어렵습니다. 또한 특별한 취급과 세심한 관리가 필요합니다. 8 .
신생아 쥐 에서 생체 내 뇌파 기록을 조사한 이전의 연구는 P12 이상의 동물에서 유성 녹음 용액을 사용하여 수행되었지만 이러한 접근법은 비용이 많이 든다. 간단한 전극을 사용함으로써 우리는 고밀도 뇌파를 제공하면서도 실험 비용을 $ 1로 줄이는 전극을 만들 수있었습니다 ( 그림 1
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공개 사항
저자는 아무런 이해 상충을 선언하지 않습니다.
감사의 글
이 연구는 중국 자연 과학 재단 (31171355)과 광동 자연 과학 재단 (S2011010003403, 2014A030313440)의 지원을 받았다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 컴퓨터 핀 | |||
| 집게 | DELI Group Co., Ltd. | ||
| 공급자:502 super glue | DELI Group Co., Ltd. | 7144 | |
| 건조 오븐 | Boxun | GZX-9140MBE | |
| 이소 플루오란 | RWD 생명 과학 | 902-0000-522 | |
| 입체 택시 장치 | RWD 생명 과학 | 900-0068-507 | |
| 마취 장치 | RWD 생명 과학 | 902-0000-510 | |
| 항상열 난방 장치 | 하버드 장치 | K 024509 | |
| 앰프 모델 3000 | AM 시스템 | 61558 | |
| Micro1401 아날로그 디지털 컨버터 | Cambridge Electronic Design Ltd. | 4383 | 데이터 수집 장치 |
| Spike2 | Cambridge Electronic Design Ltd. |
참고문헌
- Pereda, A. E. Electrical synapses and their functional interactions with chemical synapses. Nat Rev Neurosci. 15 (4), 250-263 (2014).
- Chorev, E., Epsztein, J., Houweling, A. R., Lee, A. K., Brecht, M. Electrophysiological recordings from behaving animals--....
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재인쇄 및 허가
