이 종이와 교육 비디오의 목표는 노출 이후 거시 및 조직 학적 분석에 적합한 손상 상태에 돼지 뇌와 뇌하수체 부검을 제거하는 방법을 설명하는 것입니다.
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이 논문에서
요약
초록
돼지는 인간이 아닌 영장류에 대한 경제적, 윤리적으로 가능한 대안으로 대형 동물 번역의 신경 과학 연구에 점점 더 인기를 끌고있다. 돼지의 큰 뇌의 크기는 기존의 임상 뇌 이미 저와 인간의 병원에서 직접 사용 및 신경 외과 절차 및 장비의 테스트를 사용할 수 있습니다. 또한, 육안 및 조직 학적 분석은, 그러나, 돼지 중추 신경계 (CNS) 및 후속 뇌 제거 사후 노광을 필요로한다. 이것은 CNS는 두께, 뼈 두개골과 척추에 의해 캡슐화 된 돼지로 쉬운 일이 아니다. 이 종이와 교육 비디오의 목표는 노출과 사후 돼지 뇌와 이후의 거시 조직 학적 분석에 적합한 손상 상태에서 뇌하수체를 제거하는 방법을 설명하는 것입니다.
서론
돼지 번역 상 신경 과학 연구는 지난 20 년 동안 점점 더 인기를 끌고있다. 돼지 뇌의 크기가 커서 기존의 임상 뇌 이미 저들과 직접 사용하여 인간 임상 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8에서 신경 외과 절차 및 장비 테스트의 사용을 가능하게한다. 지난 20 년 동안, 돼지, 특히 minipigs (예를 들어, 괴팅겐 미니 피그) 등 줄기 세포 이식과 같은 neuromodulatory 치료 방법을 검사하는 데 사용되었다; 바이러스 벡터 형질; 파킨슨 질환, 비만, 우울증, 알츠하이머 병 2, 6 향하는 깊은 뇌 자극,= "외부 참조"> 9, ....
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프로토콜
동물 마취 및 euthanesia은 (NIH 간행물 번호 86-23, 1985 개정) 동물 연구 윤리에 대한 덴마크위원회의 승인을 "실험 동물 관리의 원칙"에 따라 수행되었다.
1. 악기
- 악기 비디오에서 제시 및 재료의 표에 열거를 수집합니다.
2. 목 베기
주 : 마취 미다 졸람 5 ㎖ (5 ㎎ / ㎖) 및 5 mL의 케타민 (25 ㎎ / ㎖)의 근육 내 주사에 의해 유도 하였다. 동물을 깊게 마취 때 50-10 분 후에, 귀 정맥 삽관시키고, 나트륨 펜토 바르 비탈의 과량 치사 (체중 100 밀리그램 / kg)을 (200 ㎎ / ㎖)을 정맥 받았다. Ettrup 등에 의해 도시 된 바와 같이, 동물은 안락사 완전히 것을 보장하기 위해, 인터 통증 플렉스 시험 하였다. (2011) 20. 에 설명 된대로 전체 euthanization 확보했다Ettrup 등에 의해 입증 된 바와 같이하고, 등장 식염수 5 L와 transcardial 관류 하였다 위에 윤리 문. (2011) ....
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결과
마르지 티슈 재료를 방지하기 위해,이 고정 제 또는 거시적 분석이 수행 된 직후에 등장 성 식염수로 채워진 병의 뇌 및 뇌하수체 제거를 저장하도록 권고한다. 조직 재료는, 등장 성 식염수에 보관 반면 년 동안 정착에 저장 될 수있다, 심지어 냉장고에, 시간과 함께 조직의 붕괴로 이어질 것입니다.
본래 돼지 뇌 직접 동결 28 너무 큰 반면 제거는 뇌하수체 직접 드라이 아이스 냉각 액체 -2- 메틸 부탄에 침지하여 고정 될 수있다. 대신, 이전 토토 동결 및 40 μm의 두께 섹션 5, 18에 저온 유지가-구분 될 수있다 9~15mm 두께의 병렬 관상 조직 석판에 28.......
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토론
대부분의 실험 연구는 신경 같은 CNS에 대한 액세스가 얇은 skull- 및 경막의 두께에 의해 용이하게 마우스 및 래트와 같은 작은 동물 종에서 수행된다. 그러나, 돼지 1, 4, 8, 양 (32) 및 비 - 인간 영장류와 같은 큰 실험 동물에서 이러한 구조의 상당한 두께 두개골 뼈 제거를위한 강력한 도구 (재료의 테이블) 적절한 엔트리 포인트 (도면의 사용을 필요 2). 중추 신경계에 액세스 할 수 있습니다 전에 경막 잎 (그림 3과 4) 제한에 대한 지식이 필요하며 뇌를 안전하게 제거.
이 손상 기본 뇌를 보호하므로 두개골 뼈 제거하는 동안 그.......
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공개 사항
저자가 공개하는 게 없다.
감사의 글
저자는 감사로 부인 트린 W 미켈슨의 숙련 된 지원, 피팅 부인 리자 M. 및 Påskehøjgaard에서 직원을 인정합니다. 덴마크 의학 연구위원회 (Medical Research Council)의 룬드 벡 재단, 그리고 노보 노 디스크 재단은 재정적으로 연구를 지원했다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 무거운 메스 핸들 #4 | FST (Fine Science Tools) | 10008-13 | 피부 절개 및 연조직 제거에 좋음 |
| 비멸균 메스 블레이드 #23 | FST | 10023-00 | |
| 메스 핸들 #7 | FST | 10007-12 | 경막 절개 및 정밀 작업에 최적 |
| 비멸균 메스 블레이드 #11 | FST | 10011-00 | |
| 수술용 집게 | FST | 11024-18 | 수술용 집게의 끝은 단단한 그립을 보장합니다 |
| Kerrison Bone Punch | Aesculap Neurosurgery | FF713R | 은 견고해야 하며, 물린 크기는 3-5mm |
| 입니다. Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | MD615 | 튼튼해야 하며, 물린 크기는 15 x 5mm |
| 입니다. Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | FO551R | 은 튼튼해야 하며, 물린 크기는 25 x 15mm입니다. |
| 뼈 끌 | Lawton | 67-0335 | 끌 머리의 크기는 20 mm를 초과해서는 안됩니다 |
| . 망치 (망치) | Millarco | 5624108 | Weigth 300 g, 길이 30 cm, 머리 히트 영역 크기 2 x 2 cm |
| Micro-Scissor | FST | 14002-14 | |
| 해부 | Aesculap 신경외과 | OL165R | |
| Gö ttingen minipigs | Ellegaard Gö ttingen Minipigs A/S, 덴마크 | ||
| Euthanimal | 펜토바르비탈 | ||
| 케타민 | 화이자 | ||
| 미다졸람 | 하멜른 제약 |
참고문헌
- Lind, M. N., Moustgaard, A., Jelsing, J., Vajta, G., Cumming, P., Hansen, A. K. The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31, 728-751 (2007).
- Bjarkam, C. R., et al. Neuromodulation in a minipig model of Parkinson disease. British ....
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재인쇄 및 허가
