Summary

अनियंत्रित हेमराहैजिक शॉक रीयल टाइम हेमोडायनामिक मॉनिटरिंग के साथ चूहे में जिगर मुक्ति के माध्यम से वर्गीकृत

Published: May 21, 2017
doi:

Summary

अनियंत्रित रक्तस्राव, आघात के मरीजों के बीच मृत्यु का एक महत्वपूर्ण कारण, एक मूरीन मॉडल में एक मानक यकृत मुंह का उपयोग करके मॉडल किया जा सकता है। यह मॉडल परिणामस्वरूप रक्त की हानि, अस्तित्व में है, और हेमोस्टैटिक एजेंटों का परीक्षण करने की अनुमति देता है। यह लेख इस मूल्यवान मॉडल को करने के लिए चरण-दर-चरण प्रक्रिया प्रदान करता है।

Abstract

अनियंत्रित रक्तस्राव ट्रोमा मरीजों के बीच रोके जाने वाली मौतों का एक महत्वपूर्ण कारण है। हमने लीवर लीकेशन के जरिए अनियंत्रित रक्तस्राव के एक मूरीन मॉडल का विकास किया है जिसके परिणामस्वरूप लगातार रक्त हानि, हेमोडायनामिक परिवर्तन और अस्तित्व में परिणाम होता है।

चूहे जिगर के बाएं-मध्य लोब के एक मानकीकृत ढीले से गुज़रते हैं। उन्हें यांत्रिक हस्तक्षेप के बिना खून बहने की अनुमति है। हेमोस्टेटिक एजेंटों को पूर्व उपचार या बचाव चिकित्सा के रूप में प्रशासित किया जा सकता है, जो जांचकर्ता के हित के आधार पर होता है रक्तस्रावी के समय के दौरान, बायीं ओरियल धमनी रेखा के माध्यम से वास्तविक समय में हेमोडायनायमिक निगरानी की जाती है। चूहे को बलिदान किया जाता है, रक्त की मात्रा मात्रा होती है, आगे के विश्लेषण के लिए रक्त एकत्र किया जाता है, और चोटों के विश्लेषण के लिए अंगों का काटा जाता है। प्रायोगिक डिजाइन को कई जानवरों के साथ-साथ परीक्षण के लिए अनुमति देने के लिए वर्णित किया गया है।

अनियंत्रित रक्तस्राव के एक मॉडल के रूप में यकृत रक्तस्राव मौजूद है IN साहित्य, मुख्यतः चूहे और पोर्क मॉडल में। इनमें से कुछ मॉडल हेमोडायनामिक मॉनिटरिंग का इस्तेमाल करते हैं या रक्त के नुकसान का अनुमान करते हैं, लेकिन स्थिरता की कमी है। वर्तमान मॉडल में रक्त के नुकसान की मात्रा का ठहराव शामिल है, एक म्यूरीन मॉडल में रीयल-टाइम हेमोडायनामिक मॉनिटरिंग जो कि अनियंत्रित रक्तस्राव में पैथोफिज़ियोलोगिक तंत्र की आगे जांच करने के लिए ट्रांसजेनिक लाइनों और एक उच्च-थ्रिप्ट यंत्र का उपयोग करने का लाभ प्रदान करता है।

Introduction

विश्व भर में युवा लोगों के बीच ट्रामा मौत और विकलांगता का प्रमुख कारण है 1 अनियंत्रित रक्तस्राव गंभीर रूप से घायल तमाम रोगियों के बीच मृत्यु का एक प्रमुख कारण बनी हुई है। 2 हेमरार्जिंग ट्रॉमा रोगी का प्रबंधन दो गुना है: शल्यचिकित्सा के रक्तस्राव का नियंत्रण, और पुनर्जीवन और खोया रक्त के प्रतिस्थापन।

रक्तस्रावी शॉक के पशु मॉडल आघात अनुसंधान में आधारशिला रहे हैं और पैथोफिसियोलॉजी और दर्दनाक / रक्तस्रावी शॉक के उपचार के मूल्यांकन में उपयोग किया जा सकता है। 3 , 4 पशु मॉडल में सदमे दो तरीकों से मोटे तौर पर प्राप्त किया जा सकता है: नियंत्रण-रक्तस्राव और अनियंत्रित-रक्तस्राव। 5 , 6 नियंत्रित-रक्तस्राव रक्त के एक निश्चित मात्रा को हटाने या एक निश्चित रक्तचाप (निश्चित दबाव) को प्राप्त करने के लिए रक्त निकालने द्वारा किया जाता है। जबकिसे मॉडल तंत्र में मूल्यांकन के लिए उपयोगी हैं और रक्तस्रावी आवेश में प्रतिरक्षा परिवर्तन, वे हेमोस्टैटिक एजेंटों के परीक्षण पर लागू नहीं होते हैं और इस तरह के आघात के बाद रक्तस्राव के नैदानिक ​​परिदृश्य की नकल नहीं करते हैं। इस डिग्री के लिए, हमने अनियंत्रित रक्तस्राव के एक मॉडल को विकसित करने की मांग की जो हमें मुर्इन मॉडल में हेमोस्टैटिक परिवर्तन और प्रो-कौयुलंट एजेंटों का परीक्षण करने की इजाजत दे। जिगर यकृत में दोहरी रक्त की आपूर्ति के कारण भाग में अनियंत्रित रक्तस्राव के लिए एक आकर्षक विकल्प है और यह दोनों कुंद और मर्मज्ञ आघात दोनों में सबसे अधिक घायल पेटी अंगों में से एक है। उच्च नैदानिक ​​प्रासंगिकता को देखते हुए, यकृत का उपयोग अनियंत्रित रक्तस्रावी के एक मॉडल के रूप में किया जाता है, जो आमतौर पर चूहे और पोर्किड मॉडल में होता है लेकिन हाल ही में प्राइमेट में भी। 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 </suपी> मरीन मॉडल ने जिगर की चोट भी शामिल कर ली है, जैसे क्रश मॉडल या कुंद आघात; हालांकि, इन मॉडलों को यकृत की चोट के कारण हेम्राहैजिक शॉक सेकेंडरी में परिणाम नहीं मिलता है। 13 , 14

अनियंत्रित यकृत रक्तस्राव के चूहे और सुअर मॉडल, जबकि रिसासटेशन प्रैक्टिस और हेमोडायनामिक मॉनिटरिंग की तलाश में मूल्यवान हैं, लागत के रूप में विभिन्न कारणों के लिए मुरीइन मॉडल की तुलना में कम लाभप्रद हैं, जिनका उपयोग जानवरों की संख्या, और महत्वपूर्ण रूप से रिचार्ज विश्लेषण के लिए उपलब्ध ट्रांसजेनिक लाइनों की कमी है विशिष्ट सेलुलर और आणविक संकेत का वर्तमान म्यूरीन मॉडल में मौजूदा लिवर रक्तस्रावी मॉडल के लिए महत्वपूर्ण समानताएं शामिल हैं जिनमें मानकीकृत जिगर स्राव, रक्त की मात्रा में कमी, हेमोडायनामिक निगरानी, ​​और अस्तित्व विश्लेषण करने की क्षमता शामिल है। कई मौजूदा मॉडल केवल इन पहलुओं में से कुछ को शामिल करते हैं जबकि हमारे मॉडल को कई शारीरिक विकृतियों को मापने के लिए विकसित किया गया थाएक साथ और कई चूहों में bles। साथ ही, एक मूरीन मॉडल का विकास अन्तर्ग्रथित रक्तस्राव में पुनर्जीवन से परे और जांच के द्वार को अनियंत्रित रक्तस्राव में अधिक मात्रा में, उन्नत आणविक तकनीकों का उपयोग करके एक लागत कुशल, उच्च-थ्रुपुट मॉडल की क्षमता के साथ खोल देता है।

Protocol

चूहों को पिट्सबर्ग विश्वविद्यालय (पिट्सबर्ग, पीए, यूएसए) और नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ (एनआईएच, बेथेस्डा, एमडी, यूएसए) के अनुसार जानवरों की देखभाल संबंधी दिशानिर्देशों के अनुसार विशिष्ट रोगजन-मुक्त प?…

Representative Results

लीवर लेंस मॉडल का परिणाम चूहे में प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और लगातार रक्त के नुकसान में होता है। चित्रा 1 ए लिक्टेड लीवर के लगातार वजन को दर्शाता है जो केवल 0.02 ग्राम के मानक विचल?…

Discussion

यहाँ वर्णित मुरुण जिगर लंगोथ मॉडल अनियंत्रित रक्तस्राव के एक विश्वसनीय, सुसंगत मॉडल प्रदान करता है। यह मॉडल निष्पादन के लिए सीधा है लेकिन महत्वपूर्ण कदम हैं जिनके लिए सावधानीपूर्वक विचार की आवश्यकत…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस पांडुलिपि का काम हेमोस्तैसिस और वास्कुलर बायोलॉजी (पी 3 एचवीबी) और एएएसटी रिसर्च फैलोशिप में वैस्कुलर मेडिसिन इंस्टीट्यूट पायलट प्रोजेक्ट प्रोग्राम द्वारा डॉ। नील को धन सहायता द्वारा समर्थित था। यह काम अमेरिकी राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान अनुदान 1 R35 GM119526-01 और UM1HL120877-01 द्वारा समर्थित है।

Materials

SS/45 dumonts Fine Science Tools 11203-25
surgical scissors Fine Science Tools 14068-12
hemostats Fine Science Tools 13009-12
microscissors Fine Science Tools 15000-08
0.8mm curved forceps Fine Science Tools 11009-13
suture reel 6-0 Fine Science Tools 18020-60
suture 4-0 silk w/ needle Owens Minor K188H
gauze 4×4 can be purchased through any global vendor
cotton-tip applicator can be purchased through any global vendor
30G needle can be purchased through any global vendor
23G needle can be purchased through any global vendor
10cc syringe can be purchased through any global vendor
50cc conical tube can be purchased through any global vendor
1cc syringe w/ 25G needle Fisher Scientific 14-826-88
Polyethylene 10 tubing 100`(PE-10) Fisher Scientific 14-170-12P
Polyethylene 50 tubing 100`(PE-50) Fisher Scientific 14-170-12B
3-way stopcock Fisher Scientific NC9779127
surgical blue pad Fisher Scientific 50-7105
Sterile Field dressings Fisher Scientific NC9517505
tape rolls 1" Corporate Express MMM26001
straight side wide mouth jars VWR 159000-058
stainless steel tray 8" x 11" VWR 62687-049
male-male leur lock 3-way VWR 20068-909
sterilization pouch 3"x8" VWR 24008
sterilization pouch 5"x10" VWR 24010
absorption triangles Fine Science Tools 18105-03
7mm wound clip applier Fisher Scientific E0522687
1000 7mm wound clips Fisher Scientific E0522687
betadine (4oz) can be purchased through any global vendor
sterile gloves can be purchased through any global vendor
eppendorfs  can be purchased through any global vendor
1/2cc Lo-Dose insulin syringe Fisher Scientific 12-826-79
small weigh boat can be purchased through any global vendor
lactated ringers can be purchased through any global vendor
hepranized saline solution (.1µ hep + 9.9µNaCl) can be purchased through any global vendor
phosphate buffered saline  can be purchased through any global vendor
pentobarbital  can be purchased through any global vendor
Wild M650 microscope w/ boom stand Leica
Digi-Med BPA-400 analyzer & systems integrator Micro-Med SYS-400
TXD-310 (Digi-Med Transducer)  Micro-Med TXD-300
Computer Dell
microbead instrument sterilizer VWR 11156-002
Oster A5 clippers w. size 40 blade VWR 10749-020
circulating heating pad 18×26 Harvard py872-5272
rectal thermometer Kent Scientific RET-3

References

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Cite This Article
Dyer, M., Haldeman, S., Gutierrez, A., Kohut, L., Sen Gupta, A., Neal, M. D. Uncontrolled Hemorrhagic Shock Modeled via Liver Laceration in Mice with Real Time Hemodynamic Monitoring. J. Vis. Exp. (123), e55554, doi:10.3791/55554 (2017).

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