Неконтролируемое кровоизлияние, являющееся важной причиной смертности среди пациентов с травмой, можно смоделировать с использованием стандартного разрыва печени в мышиной модели. Эта модель приводит к постоянной кровопотере, выживаемости и позволяет тестировать гемостатические агенты. В этой статье представлен пошаговый процесс выполнения этой ценной модели.
Неконтролируемое кровотечение является важной причиной предотвратимых смертей среди пациентов с травмой. Мы разработали мышиную модель неконтролируемого кровоизлияния через разрыв печени, что приводит к постоянной потере крови, гемодинамическим изменениям и выживанию.
Мышам подвергается стандартизированная резекция лево-средней доли печени. Им разрешено кровоточить без механического вмешательства. Гемостатические агенты можно вводить в качестве предварительной терапии или спасательной терапии в зависимости от интереса исследователя. Во время кровотечения проводится гемодинамический мониторинг в режиме реального времени через левую бедренную артериальную линию. Затем мышей умерщвляли, измеряли кровопотерю, собирали кровь для дальнейшего анализа, а органы собирали для анализа повреждений. Описана экспериментальная схема, позволяющая проводить одновременные испытания нескольких животных.
Геморрагия печени как модель неконтролируемого кровоизлияния существуетВ литературе, главным образом, в моделях крыс и свиней. Некоторые из этих моделей используют гемодинамический мониторинг или количественную оценку потери крови, но не имеют последовательности. Настоящая модель включает количественную оценку кровопотери, гемодинамический мониторинг в режиме реального времени в мышиной модели, которая дает преимущество использования трансгенных линий и механизма высокой пропускной способности для дальнейшего исследования патофизиологических механизмов при неконтролируемом кровотечении.
Травма является основной причиной смерти и инвалидности среди молодежи во всем мире. 1 Неконтролируемое кровоизлияние остается основной причиной смертности среди тяжело травмированных пациентов с травмой. 2 Управление пациентом с кровоточащей травмой двойное: контроль хирургического кровотечения, реанимация и замена потерянной крови.
Животные модели геморрагического шока были краеугольным камнем в исследовании травмы и могут быть использованы при оценке патофизиологии и лечения травматического / геморрагического шока. 3 , 4 Удар на животных моделях может быть достигнут в широком смысле двумя методами: контролируемое кровоизлияние и неконтролируемое кровоизлияние. 5 , 6 Контролируемое кровоизлияние выполняется путем удаления фиксированного объема крови или путем удаления крови для достижения определенного кровяного давления (фиксированного давления). В то времяСе модели полезны при оценке механизмов и иммунных изменений при геморрагическом шоке, они не применимы к тестированию гемостатических агентов и не имитируют клинический сценарий кровотечения после травмы. В этой степени мы стремились разработать модель неконтролируемого кровоизлияния, которая позволила бы нам проверять гемостатические изменения и прокоагулянты в мышиной модели. Печень является привлекательным вариантом для неконтролируемого кровоизлияния частично из-за двойного кровоснабжения печени и является одним из наиболее часто повреждаемых внутрибрюшных органов при тупой и проникающей травме. Учитывая высокую клиническую значимость, печень используется как модель неконтролируемого кровоизлияния, чаще всего в моделях крыс и свиней, но в последнее время и у приматов. 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 </suP> Мышиные модели также включают повреждение печени, такое как модель дробления или тупая травма; Однако эти модели не приводят к геморрагическому шоку, вторичному к повреждению печени. 13 , 14
Крысиные и свиные модели неконтролируемого кровоизлияния в печени, хотя они и ценны при изучении методов реанимации и гемодинамического мониторинга, менее выгодны, чем модели для мыши по различным причинам, таким как стоимость, количество используемых животных и, что важно, отсутствие трансгенных линий, доступных для анализа Специфической клеточной и молекулярной сигнализации. Нынешняя модель мыши имеет важное сходство с существующими моделями кровотечений в печени, включая стандартизованное разрывание печени, количественную оценку кровопотери, гемодинамический мониторинг и способность выполнять анализ выживаемости. Многие существующие модели включают только некоторые из этих аспектов, тогда как наша модель была разработана для измерения многих физиологических вариацийОдновременно и у нескольких мышей. Кроме того, разработка мышиной модели открывает двери для исследований за пределами реанимации и в механизмы большей патофизиологии при неконтролируемом кровотечении с потенциалом рентабельной и высокопроизводительной модели с использованием передовых молекулярных методов.
Модель разрыва мышиной печени, описанная здесь, обеспечивает надежную, согласованную модель неконтролируемого кровоизлияния. Эта модель проста в исполнении, но есть важные шаги, которые требуют тщательного рассмотрения. Наиболее технически сложной частью модели является канюляция б…
The authors have nothing to disclose.
Работа этой рукописи была поддержана финансированием доктору Нилу экспериментальной проектной программы Института сосудистой медицины в области гемостаза и сосудистой биологии (P3HVB) и стипендий для научных исследований AST. Эта работа поддерживается Национальными институтами здравоохранения США грантов 1 R35 GM119526-01 и UM1HL120877-01.
SS/45 dumonts | Fine Science Tools | 11203-25 |
surgical scissors | Fine Science Tools | 14068-12 |
hemostats | Fine Science Tools | 13009-12 |
microscissors | Fine Science Tools | 15000-08 |
0.8mm curved forceps | Fine Science Tools | 11009-13 |
suture reel 6-0 | Fine Science Tools | 18020-60 |
suture 4-0 silk w/ needle | Owens Minor | K188H |
gauze 4×4 | can be purchased through any global vendor | |
cotton-tip applicator | can be purchased through any global vendor | |
30G needle | can be purchased through any global vendor | |
23G needle | can be purchased through any global vendor | |
10cc syringe | can be purchased through any global vendor | |
50cc conical tube | can be purchased through any global vendor | |
1cc syringe w/ 25G needle | Fisher Scientific | 14-826-88 |
Polyethylene 10 tubing 100`(PE-10) | Fisher Scientific | 14-170-12P |
Polyethylene 50 tubing 100`(PE-50) | Fisher Scientific | 14-170-12B |
3-way stopcock | Fisher Scientific | NC9779127 |
surgical blue pad | Fisher Scientific | 50-7105 |
Sterile Field dressings | Fisher Scientific | NC9517505 |
tape rolls 1" | Corporate Express | MMM26001 |
straight side wide mouth jars | VWR | 159000-058 |
stainless steel tray 8" x 11" | VWR | 62687-049 |
male-male leur lock 3-way | VWR | 20068-909 |
sterilization pouch 3"x8" | VWR | 24008 |
sterilization pouch 5"x10" | VWR | 24010 |
absorption triangles | Fine Science Tools | 18105-03 |
7mm wound clip applier | Fisher Scientific | E0522687 |
1000 7mm wound clips | Fisher Scientific | E0522687 |
betadine (4oz) | can be purchased through any global vendor | |
sterile gloves | can be purchased through any global vendor | |
eppendorfs | can be purchased through any global vendor | |
1/2cc Lo-Dose insulin syringe | Fisher Scientific | 12-826-79 |
small weigh boat | can be purchased through any global vendor | |
lactated ringers | can be purchased through any global vendor | |
hepranized saline solution (.1µ hep + 9.9µNaCl) | can be purchased through any global vendor | |
phosphate buffered saline | can be purchased through any global vendor | |
pentobarbital | can be purchased through any global vendor | |
Wild M650 microscope w/ boom stand | Leica | |
Digi-Med BPA-400 analyzer & systems integrator | Micro-Med | SYS-400 |
TXD-310 (Digi-Med Transducer) | Micro-Med | TXD-300 |
Computer | Dell | |
microbead instrument sterilizer | VWR | 11156-002 |
Oster A5 clippers w. size 40 blade | VWR | 10749-020 |
circulating heating pad 18×26 | Harvard | py872-5272 |
rectal thermometer | Kent Scientific | RET-3 |