हनी बीस के लिए वीडियो ट्रैकिंग प्रोटोकॉल टू स्क्रीन डिस्ट्रेंट कैमिस्ट्रीज़
Summary
शहद मधुमक्खी कालोनियों की हानि ने फसल परागण सेवाओं के लिए एक चुनौती प्रस्तुत की है। वर्तमान परागणक संरक्षण प्रथाएं एक वैकल्पिक दृष्टिकोण की पुष्टि करती हैं जो मधु मधुमक्खियों के संपर्क को हानिकारक कीटनाशकों के लिए विकर्षक रसायनज्ञों का उपयोग करने के लिए कम कर देती हैं। यहां, हम मधुमक्खियों के लिए स्क्रीन पर रोक लगाने के लिए विजुअल ट्रैकिंग प्रोटोकॉल के विस्तृत तरीके प्रदान करते हैं।
Abstract
यूरोपीय शहद मधु, एपिस मेलिफेरा एल , एक आर्थिक और कृषि की महत्वपूर्ण परागणक है जो अरबों डॉलर सालाना उत्पन्न करता है। 1 9 47 के बाद से हनी मधुमक्खी कॉलोनी संख्या संयुक्त राज्य अमेरिका और कई यूरोपीय देशों में घट रही है। इस गिरावट में कई कारक भूमिका निभाते हैं, जिनमें कीटनाशकों के लिए शहद के मधुमक्खियों के अनजाने में जोखिम भी शामिल है। इन परागणिकों के लिए कीटनाशक के जोखिम को कम करने के लिए नए तरीकों और विनियमों के विकास का समर्थन किया जाता है। एक दृष्टिकोण विकर्षक रसायनज्ञों का उपयोग होता है जो कि हाल ही में कीटनाशक उपचारित फसल से मधु मक्खियों को रोकते हैं। यहां, हम एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं जो कि मधु मक्खियों की चुनौतियों का सामना करने वाले विकर्षक रसायनज्ञों के सामने आते हैं। शहद मधुमक्खी मेंढक को इकट्ठा किया जाता है और एक इनक्यूबेटर में रातोंरात भूखा होता है परीक्षण के 15 घंटे पहले। व्यक्तिगत शहद मधुमक्खियों को पेट्री डिश में रखा जाता है जो कि या तो एक चीनी-एगरोज़ क्यूब (नियंत्रण उपचार) या चीनी-एगरोस-कम्पाउंड घन (विकर्षक उपचार) में रखा जाता हैपकवान के बीच में पेट्री डिश वीडियो ट्रैकिंग सॉफ़्टवेयर का इस्तेमाल करते हुए शहद मधुमक्खी गतिरोध गतिविधियों को रिकॉर्ड करने के लिए एक प्रकाश बॉक्स में कैमरे के नीचे स्थित क्षेत्र के रूप में कार्य करता है। प्रत्येक 10 मिनट की अवधि के लिए 8 नियंत्रण और 8 विकर्षक उपचारों का विश्लेषण किया गया था, प्रत्येक मधुमक्खी मधुमक्खी के साथ दोहराया गया था। यहां, हम यह दिखाते हैं कि शहद मधुमक्खियों का मिश्रण एक मिश्रित उपचार के साथ चीनी-एगरोज़ क्यूब्स से विचलित होता है जबकि शहद के मधुमक्खियां एक अतिरिक्त परिसर के बिना चीनी-एगारोज़ क्यूब्स से आकर्षित होता है।
Introduction
यूरोपीय शहद मधुमक्खी, एपिस मेलिफेराएल , एक आर्थिक और कृषि की महत्वपूर्ण किट है जो परागण सेवाएं प्रदान करती है जो 200 बिलियन अमरीकी डॉलर से अधिक का विश्व स्तर पर 1 मूल्यवान है। संयुक्त राज्य अमेरिका और यूरोप में मधु मक्खी कॉलोनी संख्या में गिरावट आई है। संयुक्त राज्य अमेरिका ने सीए खो दिया है 1 947-2008 से प्रबंधित शहद मधुमक्खी कालोनियों का 60% जबकि यूरोप ने सीए खो दिया है 27% से 1 961-2007 2 , 3 कई कारक हैं जो कॉलोनी घाटे की बढ़ी हुई संख्या के लिए ज़िम्मेदार हो सकते हैं, जिनमें परजीवी infestations, रोगजनक संक्रमण, मधुमक्खी पालन प्रथाओं, और कीटनाशक उपयोग 2-4 शामिल हैं, लेकिन सीमित नहीं है।
शहद के मधुमक्खियों के दो मुख्य मार्गों के माध्यम से कीटनाशकों के संपर्क में हो सकते हैं। हाइपे के बाहर कीटनाशक का प्रदर्शन तब हो सकता है जब व्यक्तियों को फसल के संपर्क में आना पड़ता हैकीट से सुरक्षा के लिए रसायनों के साथ छिड़का गया है हाइव के भीतर कीटनाशक के संपर्क में हो सकता है, जब मधुमक्खियों में रसायनों का उपयोग इनहेव कीटों और रोगजनकों को नियंत्रित करने के लिए होता है, जैसे कि कण, बैक्टीरिया और माइक्रोसॉपरिडिया 4 । संयुक्त राज्य अमेरिका और कनाडा 5 , 6 में कीटनाशक के अवशेषों को मोम, पराग, और मधुमक्खी के नमूने में 24 एपिएरिअर्स से पहचाने गए हैं। मधुमक्खी से कीटनाशक के संपर्कों के प्रभाव में तीव्र विषाक्तता और साथ ही उप-घातक प्रभाव शामिल हैं जैसे पक्षाघात, भटकाव और व्यवहार और स्वास्थ्य परिवर्तन 1 , 7 । चूंकि आधुनिक कृषि को उच्च फसल की पैदावार बनाए रखने के लिए कीटनाशकों के उपयोग की आवश्यकता है, भविष्य में इन रसायनों पर भरोसा जारी रहेगा 2 । मधुमक्खियों को कीटनाशक के जोखिम से बेहतर बनाए रखने के लिए, नए प्रोटोकॉल और नियमों के विकास की आवश्यकता है 5 ।सुरक्षा के लिए एक संभावित दृष्टिकोण भोजन के लिए प्याज करते समय कीटनाशकों के लिए शहद के मधुमक्खियों के जोखिम को कम करने के लिए प्रतिकारकों का उपयोग होता है
कीट repellents (आईआर) आम तौर पर arthropod रोग वैक्टर 8 के खिलाफ व्यक्तिगत काटने सुरक्षा उपायों के रूप में इस्तेमाल किया गया है 60 साल से अधिक पहले विकसित और सबसे अधिक प्रभावी आईआर, डीईईटी 8 , 9 है । इसे कीट प्रत्यारोपित परीक्षण के लिए सोने के मानक माना जाता है और विश्व स्वास्थ्य संगठन और पर्यावरण संरक्षण एजेंसी द्वारा उपन्यास विकर्षक स्क्रीनिंग 10 के लिए सकारात्मक नियंत्रण के रूप में उपयोग किया जाता है। इसके अतिरिक्त, डीईईटी अपने कॉलोनी 11 के लिए खतरे से मधु मक्खियों को फैलाने के लिए मिल गया है व्यक्तिगत आईआर से जुड़ी वर्तमान विशेषताओं में शामिल हैं: (1) मानवता के व्यापक संवर्ग के खिलाफ स्थायी प्रभाव; (2) जब त्वचा या कपड़ों पर लागू होता है तो उपयोगकर्ता को परेशान नहीं करता; (3) गंधहीन यासुखद गंध; (4) कपड़े पर कोई प्रभाव नहीं; (5) त्वचा पर लागू होने और उपयोगकर्ता द्वारा पसीना, धोने और पोंछने का सामना करने के लिए कोई तेल दिखाई नहीं देता; (6) आमतौर पर इस्तेमाल किए गए प्लास्टिक पर कोई प्रभाव नहीं; और (7) व्यापक रूप से उपयोग के लिए रासायनिक स्थिर और सस्ती 12 मधु मक्खियों के लिए प्रयुक्त एक विकर्षक के लिए इन गुणों की कुछ आवश्यकता होती है जैसे स्थायी प्रभाव, अपरिवर्तक, बिना गंध या सुखद गंध, रासायनिक रूप से स्थिर और व्यापक उपयोग के लिए किफायती, और मधु मक्खियों के लिए गैर विषैले। हालांकि, गहराई में इन गुणों की खोज करने से पहले, उच्च-थ्रुपुट तरीके से repellency / deterrence के लिए स्क्रीनिंग यौगिकों का एक तरीका आवश्यक है। यहाँ, हम मधु मक्खियों के विरोध के लिए यौगिकों को स्क्रीन करने के लिए एक प्रयोगशाला परख के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं, repellency निर्धारित करने में एक महत्वपूर्ण कदम। मधु मक्खियों 13 पर कीटनाशकों के उप-प्रभावों का आकलन करने के लिए एक दृश्य ट्रैकिंग पद्धति का वर्णन करने वाले पिछले अध्ययन से निम्नलिखित प्रोटोकॉल को संशोधित किया गया है। होवेदेखें, यह प्रोटोकॉल अलग-अलग है क्योंकि यह उम्मीदवार पुनर्विक्रताओं के प्रभाव को मापने के लिए डिज़ाइन किया गया है जो कीटनाशक द्वारा इलाज की गई फसलों से शहद मधुमक्खियों को रोक सकता है। मधु मक्खियों के लिए रासायनिक बाधाओं के प्रयोगशाला परीक्षण के लिए कोई सिफारिश नहीं प्रोटोकॉल हैं, और इस प्रकार, इस प्रोटोकॉल ने इस तरह के यौगिकों को स्क्रीन करने के लिए सरल दृष्टिकोण प्रदान किया है।
Protocol
Representative Results
Discussion
यह दृश्य ट्रैकिंग प्रोटोकॉल मधु मक्खियों के लिए अपेक्षाकृत तेज़ और आसान तरीके से रासायनिक बाधाओं को स्क्रीन करने के लिए सरल दृष्टिकोण प्रदान करता है। मधु मक्खियों के लिए रासायनिक बाधाओं के प्रयोगशा…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम विज़ुअल ट्रैकिंग सॉफ़्टवेयर और उपकरण के उपयोग के लिए डॉ। थॉमस कुहर को धन्यवाद देना चाहते हैं। हम अपनी तकनीकी सहायता के लिए जेम्स विल्सन और स्कॉट ओ'नल को धन्यवाद देते हैं
Materials
| 50 mL Erlenmeyer flask | Kimax | 26500-50 | used for making the sugar/agarose cubes |
| Sugar | Kroger | any similar product will sufffice | |
| Deionized water | acquired in house | ||
| Agarose | Apex | 20-102 | used for making the sugar/agarose cubes |
| Mold for agarose cubes (Weigh Boat) | any mold that will provide the researcher with a 1.5 X 1.5 X 0.3 cm sugar/agarose cube will suffice | ||
| EthoVision XT | Noldus | visual tracking software | |
| 633 nm LEDs | Cyron | HTP904E | These lights were placed into a constructed light box to illuminate the arenas from below. The box was a simple wooden structure with a frosted plastic/plexi glass cover that allowed the light to disperse upwards without any glare. |
| Laptop or PC | Dell | Inspiron One 2305 | necessary for video tracking software. Any pc device capable of runnin tbe visual tracking software will suffice |
| Bee Keeping protective clothing | Dadant & Sons Inc | V0126 | any protective hood and jacket will suffice |
| Hive tool | Dadant & Sons Inc | M00757 | used to open honey bee hive |
| Container for honey bees | any container suitable for housing and storing honey bees will suffice | ||
| Featherweight forceps narrow tip | Bioquip | 4748 | used to select individual honey bees |
| 9 cm (diameter) petri dish | Fisher Scientific | S01778 | arena used to contain individual honey bees during video tracking |
| Recording Device (Camera) | Basler | acA-1300-60gm | any device that can record the subject clearly and transfer the file to a computer will suffice |
| GraphPad Prism | Graphpad | any statistical software package will suffice |
References
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