Roman objekt anerkendelse Test for undersøgelse af indlæring og hukommelse i mus

Summary

Objektet anerkendelse test (ORT) er en enkel og effektiv assay for evaluering af læring og hukommelse i mus. Metoden, der er beskrevet nedenfor.

Abstract

Objektet anerkendelse test (ORT) er et almindeligt anvendte adfærdsmæssige assay for undersøgelse af forskellige aspekter af indlæring og hukommelse i mus. ORT er forholdsvis enkel og kan udføres mere end 3 dage: tilvænning dag, træningsdag og test dag. Under træning, er musen tilladt at udforske 2 identiske objekter. Test dag, er et af objekterne, uddannelse erstattet med et nyt objekt. Fordi mus har en medfødt præference for nyhed, hvis musen genkender det velkendte objekt, vil det tilbringer det meste af sin tid på det nye objekt. På grund af denne medfødte præference er der ikke behov for positiv eller negativ forstærkning eller lang uddannelse tidsplaner. Derudover kan ORT også ændres til talrige applikationer. Fastholdelse interval kan afkortes for at undersøge korttidshukommelsen eller forlænget for at sonde langtidshukommelse. Farmakologisk intervention kan bruges på forskellige tidspunkter før træning, efter træning, eller før husker for at undersøge forskellige faser af læring (dvs., erhvervelse, tidlig eller sen konsolidering eller tilbagekaldelse). Generelt, ORT er en relativt lav-stress, effektiv test for hukommelse i mus, og er passende til påvisning af neuropsykologiske ændringer efter farmakologiske, biologiske eller genetiske manipulationer.

Introduction

Objektet anerkendelse test (ORT), også kendt som roman objekt anerkendelse test (NOR), er et relativt hurtigt og effektivt middel til at teste forskellige faser for indlæring og hukommelse i mus. Det blev oprindeligt beskrevet af Ennaceur og Delacour i 1988 og bruges primært i rotter¹; men siden da, den er blevet med held tilpasset til brug i mus^2,3,4,5,6,7. Testen bygger på så få som tre sessioner: en tilvænning session, en træningssession, og en test session. Uddannelse blot indebærer visuel udforskning af to identiske objekter, mens test-session involverer erstatter en af de tidligere udforsket objekter med et nyt objekt. Fordi gnavere har en medfødt præference for nyhed, vil en gnaver, der husker det velkendte objekt tilbringe mere tid på at udforske nye objekt^7,8,9.

Den største fordel ved ORT over andre gnavere hukommelsestest er, at det er afhængig af gnavere naturlige hang til at udforske nyhed⁸. Derfor, er der ingen grund for talrige kurser eller eventuelle positive eller negative forstærkning at motivere adfærd. Det betyder, at ORT er langt mindre stressende, i forhold til andre tests^{10,11,12,13,14,15}, og kræver betydeligt mindre tid til at køre end andre hyppigt anvendte hukommelse tests, såsom Morris vand labyrint eller Barnes labyrint, som både kan tage op til en uge eller længere. Derfor ligner betingelserne for ORT mere nøje dem, der anvendes i at studere menneskelig kognition, stigende økologisk gyldigheden af testen over mange andre gnavere hukommelsestest. Tilsvarende, fordi ORT er en simpel visuel hjemkalde opgave, har det været med succes tilpasset til brug i talrige arter, herunder mennesker og ikke-menneskelige primater, for at vurdere forskellige Inter arter aspekter af deklarativ hukommelse ^{2,16 ,17}. Endelig, ORT nemt kan redigeres for at undersøge forskellige faser for indlæring og hukommelse (dvs., erhvervelse, konsolidering eller tilbagekaldelse), til at vurdere forskellige typer af hukommelse (fx, rumlig hukommelse), eller at vurdere forskellige opbevaring mellemrum (dvs., vs langsigtede korttidshukommelse).

Alsidigheden i ORT giver en platform for utallige forskning applikationer. Undersøgelser kan gøre brug af farmakologiske agenter til at forstyrre eller forbedre hukommelse. Varierende tidspunktet for drug administration før eller efter træning eller før prøvningen kan vink på den underliggende neurale mekanismer, der fører til forstyrret eller forbedret hukommelse^{6,18,19, 20}. i en lignende måde, optogenetic teknologi kan bruges på disse samme forskellige tidspunkter til at se på den neurale aktivering/hæmning, der bidrager til de forskellige faser af indlæring og hukommelse. ORT er også relevant for vurderingen af forskelle i transgene dyr, læsion undersøgelser, eller neurodegenerative modeller eller ældning undersøgelser^{21,22,23,24, 25 , 26 , 27 , 28}. tid mellem undervisning og test, kendt som opbevaring interval, kan ændres for at vurdere disse ændringer på kort og lang sigt hukommelse²⁶. I sidste ende, ORT kan bruges som et redskab til at studere farmakologiske, genetiske, neurologiske forandringer til indlæring og hukommelse, eller disse værktøjer kan bruges til at studere grundlaget for indlæring og hukommelse i ORT.

Protocol

alle procedurer udføres her blev forelagt og godkendt af Animal Care og bruge udvalget og blev gennemført efter NIH retningslinjer. 1. objekt udvælgelse og eksperimentel opsætning markere objekter, der er forskellige nok til at være let diskrimineret af mus, men har en tilsvarende grad af kompleksitet (tekstur, form, farve mønstre og lysstyrke, etc.) for at minimere eventuelle induceret objekt præference, der kan bias resultater (Se Ennaceur 2010 for en omf…

Representative Results

En generel eksperimentel opsætning for ORT er vist i figur 2. Tilvænning dag (T0) mus er placeret i den tomme arena i 5 min. 24 timer senere, mus er placeret tilbage i salen med 2 identiske objekter og tilladt frit udforske for op til 10 min (T1). På test dagen (T2), er mus igen placeret i arenaen, men med en velkendt- og én roman objektet og lov til at udforske for op til 10 min. Fastholdelse interval, kan tiden mellem T1 og T2, ændres, afhængigt af de…

Discussion

ORT er en effektiv og fleksibel metode til at studere indlæring og hukommelse i mus. Når du opretter et eksperiment, er det vigtigt at overveje en række variabler, der kan påvirke resultatet. Som omtalt i de repræsentative resultater, vil stamme på musen påvirke både udforskning tid og fastholdelse interval. Et fald i udforskning tid kan vrides eller maske resulterer i en absolut forskelsbehandling analyse^{2,3,5,</su…}

Materials

Open Field Box	Panlab/Harvard Apparatus	LE800SC	Available in grey, white, or black
ANY-maze	Stoelting Co.	60000	Behavior tracking system
EthoVisionXT 12	Noldus		Behavior tracking system; requires 3 point tracking
Video Camera	Any		Video camera should be mounted directly overhead of the apparatus
70% Ethanol	Fisher Scientific	BP2818-4	Prior to starting testing and in between trials, each object should be carefully cleaned. The floor and walls of the apparatus should also be cleaned.