Vi udført ensidige carotis arterieokklusion postnatal dag 7-10 CD-1 mus unger til at oprette en neonatal hypoksiske iskæmisk (HI) model og undersøgt virkningerne af HI hjerneskade. Vi studerede neurobehavioral funktioner i disse mus, sammenlignet med ikke-opererede normale mus.
Vi udført ensidige carotis arterieokklusion på CD-1 mus til at oprette en neonatal hypoksiske iskæmisk (HI) model og undersøgt virkningerne af neonatal HI hjerneskade ved at studere neurobehavioral funktioner i disse mus, sammenlignet med ikke-opererede (dvs. normal) mus. I løbet af undersøgelsen, blev ris-Vannucci metode brugt til at fremkalde neonatal HI hjerneskade i postnatal dag 7-10 (P7-10) mus. HI operation blev udført på hvalpene af ensidige carotis arterie ligatur og eksponering for hypoxi (8% O2 og 92% N2 til 90 min). En uge efter operationen, de skadede hjerner blev vurderet med det blotte øje gennem semi-transparent kraniet og blev kategoriseret i undergrupper baseret på fravær (“ingen kortikal skade” gruppe) eller tilstedeværelse (“kortikal skade” gruppe) af kortikal skade, som en læsion i højre hjernehalvdel. Uge 6, følgende neurobehavioral test blev udført for at vurdere de kognitive og motoriske funktioner: passiv undgåelse opgave (PAT), stigen walking test og greb styrkeprøve. Disse adfærdsmæssige test er nyttigt at fastslå virkningerne af neonatal HI hjerneskade og bruges i andre musemodeller for neurodegenerative sygdomme. I denne undersøgelse, neonatal HI hjerne skade mus viste motor underskud, der svarede til højre hjernehalvdel skader. Adfærdsmæssige testresultaterne er relevante for de underskud, der er observeret i menneskelige neonatal HI patienter, såsom cerebral parese eller neonatal apopleksi patienter. I denne undersøgelse, var en musemodel af neonatal HI hjerneskade etablerede og viste forskellige grader af motor underskud og kognitiv svækkelse i forhold til ikke-opererede mus. Dette arbejde giver grundlæggende oplysninger om HI musemodel. Mr billeder demonstrere de forskellige fænotyper, adskilt afhængig af sværhedsgraden af hjerneskade af motoriske og kognitive tests.
Neonatal HI hjerneskade opstår i barndommen (ca to patienter pr. 1.000 børn)1,2,3,4,5. Undersøgelser vedrørende neonatal HI hjerneskade er vigtige, og hjælp en etablerede neonatal HI hjerne skade musen model kan lette i vivo prækliniske forskning på HI hjerneskade.
Traditionelle HI modeller anvendes på voksne rotter6. For den nyfødte model, er ris-Vannucci metode almindeligt anvendt på P7 rotter7,8. Men da rotter og mus er lidt anderledes9,10, selv om de begge gnavere, vi udførte en modificeret ris-Vannucci metode på CD-1 hvalpe på P7-10, baseret på tidligere undersøgelser, der viste, at P7-10 er perioden byder umodne oligodendrocytes, svarende til menneskets sigt P011,12. Neonatal HI mus modellen er etableret gennem begge ligation af den ensidige halspulsåren og musene eksponering for hypoxi med 8% ilt i P7-10 unger.
Musene underkastet proceduren viste forskellige grader af hjernelæsioner i området posterolateral i højre hjernehalvdel. For at identificere den kognitive og motoriske underskud, neurobehavioral vurderinger baseret på PAT, blev stigen walking test og greb styrke test udført. Forskellene mellem ikke-opererede (dvs. normalt) og HI mus blev analyseret. Dette arbejde præsenterer grundlæggende oplysninger om HI musemodel. Mr billeder demonstrere de forskellige fænotyper, adskilt afhængig af sværhedsgraden af hjerneskader ved hjælp af motoriske og kognitive tests.
I denne undersøgelse, vi induceret HI hjerneskade i en neonatal P7-10 CD-1 mus og identificeret hjernen læsion med relevante kognitive og motoriske underskud. Under denne procedure var okklusion af den ensidige lige halspulsåren kritisk. I dette trin kunne arterie beskadiget og revet. De fleste unger, som har oplevet en arterie tåre døde. Omvendt, hvis forskere forbundet en anden blod vene i stedet for den ensidige lige halspulsåren, hjernen i pup var kun mildt beskadiget, og ingen betydelig fænotype kunne observe…
The authors have nothing to disclose.
Denne undersøgelse blev støttet af tilskud fra National Research Foundation (NRF-2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), Ministeriet for videnskab og teknologi, Republikken Korea, koreansk sundhed teknologi R & D-projektet (HI16C1012), Ministeriet for Sundhed & Velfærd, Republikken Korea og “Dongwha” fakultetet forskning Assistance Program fra Yonsei University College of Medicine (6-2016-0126).
Hypoxic chamber | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
PAT apparatus | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
The ladder rung walking | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
SDI Grip Strength System | San Diego Instruments Inc. | ||
Grip-Strength Meter | Ugo Basile | 47200 | |
Harvard Apparatus Fluovac anesthetizing system | Harvard Apparatus | ||
Anesthetizing box | acryl box | ||
I-Fran Liquid (Isofluorane) | Hana Pharm. Co., Ltd. | General Anesthetics ( isoflurane 100ml) | |
CD-1 mice | Orient Co., Ltd. | ||
Blue Nylon Mono Non-Absorbbable suture 5-0 50cm | Ailee Co., Ltd. | NB 521 | |
IBM SPSS Statistics | IBM | Ver. 23 |