כאן, אנו מתארים שיטה פשוטה הזנב וריד דם הדגימה בחולדות שאינם מרדימים באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום. שיטה זו מפחיתה את הסיכון בחשיפה ישירה דם ומפשטת לקיחת דגימות מרובים venipuncture יחיד.
ניתן לאסוף דם של עכברים במספר מיקומי הדגימה. למשל, וריד הזנב הוא מיקום מעולה עבור לקיחת דמים. אולם, וריד הזנב הוא דק כך שקשה לפעמים לנקב. בנוסף, וריד הזנב יש זרימת דם נמוך ודורש זמן הדגימה ארוך כדי לקבל מספיק דם. ח הנוכחי מתאר את שיטת דגימה דם פשוטה, שיטת איסוף דם ואקום, אשר משמש בדרך כלל כדי להשיג דגימות דם מחולים, משמש כאן חולדות שאינם מרדימים. קצה המחט פרפר 22 גרם הוכנס לתוך אחד העורקים הזנב לרוחב כ- 2-3 ס מ בקצה הזנב בזווית של 20°, ואת הדם נאסף בצינור אוסף אבק על-ידי הוספת הסוף גומי של המחט פרפר החיילים המשוחררים cuum דם אוסף שפופרת. תוצאות הניסוי הנוכחי הראה כי שיעור ההצלחה היה 95% בקבוצה ניסיוני ל- 90% בקבוצה למתחילים. שיעור ההצלחה לנקב פעמים היו דומים בין שתי הקבוצות. משך דגימת היה נמוך באופן משמעותי בקבוצת הניסוי בהשוואה לקבוצת למתחילים. לסיכום, דם ואקום אוסף שיטה זו עבור לקיחת דמים רציפים של וריד הזנב שאינם מרדימים עכברי – היא ריאלי, קל-אל-ללמוד, אשר יכול לשמש אלטרנטיבה אמינה השני בשימוש כמקובל טכניקות דגימה דם חולדות.
לקיחת דמים של חולדות נדרש עבור מגוון רחב של מחקרים ניסיוניים. טכניקות לאיסוף דם מהחולדה כוללות ניקוב של הלב, מקלעת רטרו-מסלולית, ומוחלף, וריד saphenous, כלי הדם הזנב, העורק הראשי, העורק הראשי, הנבוב. רוב הטכניקות (למעט וריד saphenous ואת הזנב כלי דם פנצ’רים) לדרוש הרדמה1,2. ורידים של זנב החולדה הן ניקב באופן שגרתי עבור לקיחת דמים, הזרקת הדם. לאחר טיפול הזנב עם מים חמים, כלי הדם הם מורחבים טוב ומתאים מניפולציה, אפילו כאשר הם מרדימים3.
למרות ההתפתחות של טכניקות חדשות ומשופרות להשיג דגימות דם חיות מעבדה קטנה2, זה לא תמיד קל להשיג מספיק דם בעת דגימה של חיות קטנות. וריד הזנב חולדות הוא מיקום מעולה עבור דגימה דם4. אולם, וריד הזנב הוא דק, ובכך זה לפעמים קשה לנקב, היה לוקח זמן רב להגיע מספיק דם עקב זרימת דם נמוך שלו. איסוף הדם באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום היא שיטה אופיינית יומי הקלינית. זו מערכת סגורה. דם איסוף מפחיתה את הסיכון בחשיפה ישירה דם והוא עשה את זה קל יותר לקחת מספר דגימות venipuncture יחידה5. ח הנוכחי מתאר את שיטת דגימה דם וריד הזנב פשוטה בחולדות שאינם מרדימים באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום. שיטה זו קל לשלוט והוא יכול לשמש כדי לקבל כמויות גדולות של דם שוב ושוב אצל חולדות.
ח הנוכחי מתאר את שיטת איסוף דם קל-כדי-ללמוד אצל חולדות. התוצאות שלנו הראה כי שיטה זו אפשרית לאיסוף שוב ושוב כמויות גדולות של דם של עכברים. יתר על כן, שיטה זו יכולה להיות בקלות מומחה עם עקומת למידה לטווח קצר. הליך זה יכול להתבצע בחולדות שאינם מרדימים וגורם רק לחץ מינימלי החיות.
ניתן לאסוף דם של עכברים במקומות שונים. תקחי את הזנב הוא מיקום מעולה עבור דגימה דם4. עם זאת, זה לא תמיד קל להשיג מספיק נפח הדם של וריד הזנב זרימת דם דליל ונמוך העכברושים מערכת איסוף הדם ואקום משמש בדרך כלל לאיסוף דגימות דם מחולים יומי הקלינית. זו מערכת איסוף הדם ואקום שימש בבית חולים ובעלי מחקר במשך זמן רב8,9,10. מערכת זו מורכבת צינור אוסף דם ואקום עם מחט קיר, פרפר של הצינור הפנימי מצופה סיליקון. הוא היה מבוסס על העיקרון לחץ שלילי ואקום ומאפשר את הציור רציף של דם ללא הסיכון של איסוף הדם, אשר גם מפחית את הסיכוי לזיהום וזיהום המוליזה11. אמצעי האחסון של דגימת דם הקטטר נמצא בערך 0.3 מ. לאחר נסיגתה המחט מן הווריד של הזנב, יזרום הדם החסומים הקטטר לתוך שפופרת הואקום איסוף בשל הוואקום. שיטה זו ישימה גם עבור איסוף דם של עכברים במשקל של פחות מ- 100 גרם עם השימוש של מחט דקירה קטנה יותר.
שיטה זו של אוסף דם יש מספר יתרונות. הליך זה רק גורמת פגיעה מינימלית חולדות, איסוף דם יכול להתבצע ללא השימוש בהרדמה, ובכך ניתן למנוע את השפעת תגובת המתח ואת חומרי הרדמה על דגימת הדם. התצפיות הראו כי חולדות היו שקטים, המחזיק הרחקה פלסטיק במהלך ההליך, היו מקרי מוות לא במהלך ניסויים אלה. שנית, חזר על איסוף דם כל אחד או יומיים אפשרית, אשר מאפשר בתדירות דגימה של דם עם אמצעי אחסון נאותים למטרות מחקר שונים. לבסוף, שיטה זו קל ללמוד, היה בקלות לשלוט על ידי מתחילים אחרי תקופה קצרה (2h) למידה, כפי שמציין את שיעורי הצלחה דומים והשעות לנקב בין הקבוצות ניסיוני ואני מתחיל בדו ח זה. בדוח הקודם, הוכיח לי. et al. שיטה דומה של דגימת דם וריד הזנב לרוחב העכברוש4. השיטה שלנו היא פשוט יותר מזה שדווח על ידי Lee. et al. 4 כי אנחנו ישירות להכניס את המחט לנקב את הווריד הזנב ואת הקצה השני של הצינור מחובר ישירות אל שפופרת הואקום לאיסוף הדם, ללא השימוש מזרק נוסף ושאיפה ידנית של הדם וללא הצורך של ‘ חלב אינג ‘ הווריד כדי להקל על זרימת הדם. איסוף דם עם מערכת סגורה זו מקטינה את הסיכוי לזיהום דם. שימוש של בעל הרחקה פלסטיק גם מפחית את הלחץ חולדה ואסטמה ומקילה על הקיבעון של הזנב.
שני השלבים הבאים הם קריטיים עבור היישום המוצלח של שיטה זו. 1) להרחיב את הזנב ולהימנע התנועה של הזנב; 2) בעדינות לנקב את הווריד בזווית של ° 20 כדי למנוע חדירה דרך הווריד של ולשמור את המחט לנקב בווריד.
לסיכום, שיטת איסוף דם ואקום המאומץ בחולדות הוא בטוח, ריאלי וקל להתאמן. שיטה זו מאפשרת בתדירות דגימה של דם עם אמצעי אחסון הדם המתקבל חולדות שאינם מרדימים.
The authors have nothing to disclose.
המחברים יש אין תודות לעשות.
a double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 22G | (0.7×25mm) |
vacuum tubes | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 2 ml | |
rat restraining holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 250g rat hoder model | |
normal salt diet for rats | Rats received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study | ||
SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. |