Modelo de la rata de la Asociación de partición hepática y ligadura de la vena porta para procedimiento efectuado hepatectomía (ALPPS)
Summary
Inducir la hipertrofia hepática rápida utilizando partición de hígado asociar y ligadura de la vena porta para una hepatectomía Staged (ALPPS) se ha propuesto para la resección de tumores del hígado resecables borderline. Este modelo puede aclarar los mecanismos implicados en la hipertrofia rápida y permite realizar pruebas de drogas que promueven o bloquean la aceleración de la regeneración.
Abstract
Datos clínicos recientes apoyan un enfoque quirúrgico agresivo para tumores primarios y metastásicos del hígado. Para algunas indicaciones, como las metástasis hepáticas colorrectales, la cantidad de tejido hepático queda después de resección hepática se ha convertido en el principal factor limitante de la extirpación de grandes o múltiples tumores en el hígado. Una cantidad mínima de tejido funcional es necesaria para evitar la complicación severa de la post-hepatectomía insuficiencia hepática, que tiene alta morbilidad y mortalidad. Inducir crecimiento hepático del remanente anticipado antes de la resección ha establecido más en Cirugía hepática, ya sea en forma de embolización de vena porta por radiólogos intervencionistas o en la forma de la ligadura de la vena porta varias semanas antes de la resección. Recientemente, fue demostrado que la regeneración hepática es más amplia y rápida, cuando la transección del parénquima se agrega a la ligadura de la vena porta en una primera etapa y luego, después de sólo una semana de esperar, la resección en una segunda etapa (asociar la partición de hígado y la ligadura de la vena porta para hepatectomy Staged = ALPPS). ALPPS ha convertido rápidamente en popular en todo el mundo, pero ha sido criticado por su mortalidad perioperatoria alta. El mecanismo de crecimiento acelerado y extensa inducido por este procedimiento no se ha entendido bien. Se han desarrollado modelos animales para explorar los mecanismos fisiológicos y moleculares de la regeneración hepática acelerada en ALPPS. Este protocolo presenta un modelo de rata que permite exploración mecanicista de regeneración acelerada.
Introduction
El tamaño del remanente hepático limita la resecabilidad de los tumores hepáticos. 1 en general, cuando menos de 25% hígado tejido queda atrás, el paciente está en mayor riesgo de muerte por insuficiencia hepática aguda debido a la falta de función metabólica para todo el organismo (“demasiado pequeño para el síndrome de tamaño”). 2 este post-hepatectomía insuficiencia hepática es la complicación más devastadora después de resección hepática. Por lo tanto, los médicos han tratado de inducir la regeneración hepática antes de la resección del hígado manipulando el flujo de la vena porta. 3 se encontró que, una vez que se ocluye la vena porta, la parte restante con vena porta flujo empieza a crecer a un ritmo lento y así puede aumentar hasta un 60% de tamaño. 4 5 de la ligadura quirúrgica o intervencionista de la vena porta obstrucción tanto clínicamente establecidos. 4 el aumento de volumen y la función del hígado es confiable, pero la tasa de crecimiento del hígado después de la obstrucción portal es sólo aproximadamente una quinta parte en comparación con el crecimiento del hígado remanente después de hepatectomy parcial. 6
El tiempo necesario para que el hígado crecer es semanas o meses aunque el hígado se puede regenerar a un ritmo mucho más rápido después de la resección. Así, el hígado es el único órgano que crece hacia la función normal después del retiro de una parte de ella. 7 un novedoso procedimiento de inducir la regeneración hepática a un ritmo similar como después de hepactectomy parcial fue desarrollada por un grupo de cirujanos que descubrió que agregando una sección transversal entre la oclusión e induce a la parte no-ocluida del hígado hígado hipertrofia en la misma tasa de crecimiento como después de la resección hepática, pero antes de la resección. 9 el procedimiento inicia hipertrofia rápida del 80% dentro de un remanente de la semana en el futuro hígado, que permite la resección de tumores extensos, principalmente no resecables, hígados dentro de una semana. El procedimiento se llama “asociado partición del hígado y vena porta ligadura de hepatectomía Staged = ALPPS” y llegó a ser rápidamente popular en todo el mundo. 10 informes múltiples apoyaron un aumento de la resecabilidad de los tumores hepáticos resecables fronterizo alcanzada por la nueva técnica,11 mientras que el complejo procedimiento quirúrgico también fue criticado por su tasa de complicación alta. 12 , 13
El desarrollo de un roedor y también modelos animales grandes de hipertrofia lenta y rápida se ha intentado desde la publicación de ALPPS en 2012 para permitir una mejor caracterización histológica y la comprensión de los mecanismos y para probar los efectos de drogas en la tasas de crecimiento diferentes de tejido del hígado en animales. El primer modelo animal desarrollado fue un modelo de rata. En este modelo, hipertrofia rápida después de la transección del parénquima entre el derecho y la parte izquierda del lóbulo mediano acelerada regeneración del lóbulo mediano derecho. 14 un modelo diferente fue introducido más adelante en el ratón. En este modelo fue resecado el lóbulo lateral izquierdo y ataron a las ramas de la vena porta a cada lóbulo del hígado excepto el lóbulo medio izquierdo. 15 mientras tanto, los modelos animales grandes de ALPPS en cerdos se han descrito así. 16
Para el estudio de mecanismos fisiológicos como cambios de flujo y presión en la vena porta, la perfusión y oxigenación del tejido del hígado, el modelo de la rata es superior al modelo de ALPPS en ratones. Otra ventaja de la rata en el modelo murino es que en el modelo de la rata no es necesidad de una resección del lóbulo lateral izquierdo,15 que podrían contaminar los efectos de la resección del hígado con los de ALPPS. En cambio el modelo de la rata no reduce el hígado masa celular. Un modelo de cerdo utiliza el lóbulo posterior derecho que el lóbulo creciente, pero el hígado de cerdo es muy lobulado. Por lo tanto, es difícil crear un plano de corte transversal en el puente de tejido ya delgado entre la parte posterior derecha y el lóbulo anterior derecho. En cambio, el lóbulo mediano en ratas constan de dos partes que se suministran por separado por una vena porta cada y un plano de transección del parénquima puede crearse fácilmente entre los dos mediante técnicas microquirúrgicas. La disponibilidad de tomografía (CT) de la computadora pequeña de animal o imán resonancia (MRI) permite la cuantificación muy exacta del crecimiento volumétrico entre solamente la ligadura de la vena porta y la ligadura de la vena porta y la transección del añadido, que es importante para la validación de cualquier modelo de hipertrofia hepática rápida.
El protocolo que presentamos describe la técnica quirúrgica y procedimientos utilizados para la validación volumétrica y caracterización fisiológica del modelo de hipertrofia lenta y rápida después de la ligadura de la vena porta y la ligadura de la vena porta con corte transversal, respectivamente, en ratas.
Protocol
Representative Results
Discussion
Este protocolo presenta un modelo animal de ALPPS con su rápida hipertrofia inducida por PVL + T, que aproximadamente duplica el aumento del volumen dentro de 3 días en comparación con el PVL solo. 17 el media correcta del lóbulo hepático se usa como un lóbulo de modelo para el crecimiento del hígado porque el lóbulo hepático medio es una masa de parénquima contigua suministrada por dos separados las venas porta a su izquierda y a su derecha, como se muestra en la fi…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Los autores no tienen ninguna agradecimientos.
Materials
| Isoflurane, 250ml bottles | Attane, Piramal, Mumbai, India | LDNI 22098 | Standard vet. equipment |
| Tec-3 Isofluorane Vaporizer | Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL | not available anymore | Standard vet. equipment |
| Buprenorphine (Temgesic) | Indivior, Baar, Switzerland | 7680419310353 | GTIN-number |
| Vitamine A ointment | Bausch&Lomp, Zug, Switzerland | 7680223980247 | GTIN-number |
| Atropine sulfate 0.5mg/ml | Sintetica SA, Mendrisio, Switzerland | 7680565330045 | GTIN-number |
| Microsurgery microscope | Olympus, Tokio, Japan | SZX10 | Standard vet. equipment |
| Betadine | Mundipharma, Basel, Switzerland | 7680342821377 | GTIN-number |
| Sponges | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | NK83.1 | Mini-sponges |
| Abdominal Wall retractors | N/A | N/A | Self-made from paper clips and Q-Tips |
| 3-0 silk | Ethicon, Sommerville, NJ | K872H | Standard surgical |
| Scissors | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 503371 | Standard microsurgical |
| Adson forceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 501244-G | Standard microsurgical |
| Fine tips microforceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 501976 | Tips need to be polished regularly |
| Curved fine tips microforceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 504513 | Essential to go around the portal vein branches |
| 6-0 LOOK black braided silk | Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA | SP114 | Spool, precut prior to the procedure |
| 2-0 silk sutures | Ethicon, Sommerville, NJ | K833 | Standard surgical |
| 5-0 maxon sutures | Covidien, Dublin, Ireland | 6608-21 | Standard surgical |
| Bipolar microforceps | Sutter, Freiburg, Germany | 780148SGS | Essential for parenchymal transection |
| Q-tips small | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | EH11.1 | Standard surgical |
| Q-tips big | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | XL54.1 | Standard surgical |
| G30 needle | Terumo, Tokyo, Japan | NN-3013R | Standard anesthesia equipment |
| 2mm volume flow probe | Transonic Systems, Ithaca, NY | MA-2PS | Smallest available probe for HAT-311 flow meter |
| Transonic flow meter | Transonic Systems, Ithaca, NY | HAT-311 Transsonic flow QC meter | One of the first generation flow flow meters for surgery |
| ExiTron nano 12,000 | Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany | 130-095-698 | Nanomoloecular contrast medium that opacifies liver and spleen |
| G26 intravenous catheter | Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ | 391349 | Standard anesthesia equipment |
| Quantum FX MicroCT | Perkin Elmer, Waltham, MA | N/A | Standard small animal CT scanner at the institute of physiology, University of Zürich |
| OsiriX 8.0 | Pixmeo Sarl, Geneva, Switzerland | N/A | Public domain software : www.pixmeo.com |
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