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포유류 세포에서 CRISPR / Cas9 매개 유전자 knockouts의 선택 의존 및 독립적 생성

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Selection-dependent and Independent Generation of CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockouts in Mammalian Cells

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포유류 세포에서 CRISPR / Cas9 매개 유전자 knockouts의 선택 의존 및 독립적 생성

DOI:

10.3791/55903-v

•

11:35 min

•

June 16, 2017

•

Erin L. Sternburg, Kristen C. Dias, Fedor V. Karginov

¹Cell Biology and Neuroscience,University of California, Riverside

Chapters

00:05Title
00:57Transfection of CRISPER Component into Cultured Cells and Drug Selection
02:31Isolation of Clonal Populations
03:53Screening Candidates by Dot Blot
06:30Screening Candidates by Colony PCR
08:59Results: Knockout Cell Lines Generated by Two CRISPER/Cas9 Methods
10:40Conclusion

Summary

자동 번역

체세포를 유 전적으로 조작하는 능력의 최근 진보는 기본 및 응용 연구에 큰 가능성을 안겨줍니다. 여기, 우리는 선택 마커의 사용 여부에 관계없이 포유류 세포주에서 CRISP / Cas9 생성 녹아웃 생산 및 스크리닝을위한 두 가지 접근법을 제시한다.

Tags

CRISPR/Cas9 Gene Knockout Nonhomologous End Joining Homology-directed Repair T-REx-293 Cells Transfection Drug Selection Clonal Isolation

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