Опухоль приживления в гранулы ксенотрансплантата мыши модель человека Мантия клеточная лимфома
Summary
Мантия клеточная лимфома (мкл) трудно лечить расстройство клетки B и одинаково трудно создать модель мыши ксенотрансплантата первичных MCL для изучения и разработки терапии. Здесь мы описываем успешное создание MCL ксенотрасплантатов в мышей, чтобы помочь понять ее базовой биологии.
Abstract
Лимфоциты являются ключевыми игроками в циркуляции иммунных клеток и они главным образом проживает и проживают в лимфоидных органов. В то время как нормальные клетки B только размножаются простимулировано Т-лимфоцитов, онкогенные клетки B выжить и расширять автономно в нишах не определен орган. Мантия клеточная лимфома (мкл) является одно такое расстройство клетки B, где медиана выживаемости больных составляет 4-5 лет. Это предусматривает необходимость эффективных механизмов, которые блокируются для того чтобы увеличить выживание самонаведения и приживления этих клеток и продолжительности жизни пациентов. Таким образом усилия по разработке ксенотрансплантата мыши модель для изучения эффективности терапии MCL, блокируя самонаведения механизм в естественных условиях имеет первостепенное значение. Развитие животных получателей для клеток человека ксенотрансплантации тест ранней стадии лекарств давно осуществляется, как соответствующих доклинических мыши модели имеют решающее значение для экрана новых терапевтических агентов. Это животное модель разработана чтобы избежать человека трансплантата и создать модель для заболеваний человека, и это может быть чрезвычайно полезным инструментом для изучения прогрессирования заболевания лимфомы различных типов и выполнить Доклинические испытания кандидат препаратов для гематологических злокачественных новообразований, как ПДК. Мы создали модель ксенотрансплантата мыши, которая будет служить отличным ресурсом для изучения и разработать новые терапевтические подходы для мкл.
Introduction
Лимфоцитов по своей природе играют важную роль в иммунной наблюдения, и лимфоцитов торговля является важнейшим шагом в монтаж антигена специфический иммунитет1,2. Этот процесс включает в себя миграцию наивные Т-лимфоцитов из тимуса в поток крови и оттуда вторичных лимфоидных органов, включая лимфатические узлы, патчи Пейера в или селезенки, где они встречаются родственных антигены. Лимфоциты продифференцировать в костном мозге и мигрируют как наивный клетки в фолликулах вторичных лимфоидных органов3. Некоторые из этих клеток B связывания антигена с их рецепторов и активируются Т-клеток. Пролиферации и дифференцировки клеток этих B толкает неактивированные, наивный B клеток в зоне мантии фолликула. Активированные клетки затем могут дифференцироваться в памяти B клеток, которые патрулируют тело, или перерастет иммуноглобулинов, секретирующих плазматических клеток, которые мигрируют в костного4.
MCL происходит, когда наивный B лимфоцитов в зоне мантии превратить в опухоль. Эти лимфомы клетки находятся в микроокружения лимфоидных органов и размножаться независимо от управления конкретными Т-лимфоцитов. Однако на определенном этапе плотности они вырваться из этой ниши и рециркуляции в кровоток в поисках ниши в других органах. Учитывая сложность молекул клеточной адгезии и распущенности chemokines и их рецепторов плохо понимается и таким образом препятствует терапии механизм этой сотовой оборота в естественных условиях . Новые методы необходимы для эффективно блокировать этот процесс миграции для предотвращения клетки лимфомы B от достижения новых микросреды.
MCL является одним из самых трудных для лечения B-клеток злокачественных опухолей. Развития неопластических фенотип MCL является результатом многоступенчатое Каскад, характеризуется приобретения уникальные биологические свойства. На момент постановки диагноза большинство пациентов (70%) уже присутствует с диссеминированной, с большинством случаев, экспонируется экстранодальных причастности селезенки, костного мозга или желудочно-кишечного тракта5,6. В больных рецидив, устойчивостью опухолей в течение нескольких лет является общим, даже несмотря на то, что обычные химиотерапии побуждает высокие ремиссии курсы в краткосрочной перспективе7,8. Здесь мы представляем новую модель болезнь, которая может помочь понять распространение MCL и ее базовой биологии: мы создали человека модель мыши ксенотрансплантата MCL, которая возникла из первичного опухолевых клеток больных. Мы надеемся, что эта модель будет способствовать развитию терапевтических стратегий борьбы против распространения MCL и возможно предоставить новые клинические перспективы для оптимального диагностики и лечения рецидивирующего больных.
Protocol
Representative Results
Discussion
Клинические испытания для препаратов, которые находятся в продвинутой стадии развития, но не может использоваться для обнаружения наркотиков. Давно предпринимались усилия по разработке животных получателей для клеток человека ксенотрансплантации для того чтобы проверить ранней ста…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана Ligue Genevoise le против рака, доктор Fondation Dubois Ferriere Дину-Lipatti, Oncosuisse КПС-OCS, OCS-02260-08-2008 и 2914-02-2012 и Швейцарский национальный грант фонда науки 31003A_156760 и 310030-153456.
Materials
| Ficoll-paque media | GE Healthcare | 17-1440-02 | for separation of mononuclear cells |
| RPMI Medium 1640 | Gibco-Life technologies | 61870-010 | for dilution of blood sample |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | Sigma-Aldrich | D8537 | washing of cells |
| Bovine Serum Albumin (BSA) | Sigma-Aldrich | A8412 | for preparation of PBS with 1% BSA used in washing cells during isolation |
| CD19-APC700 | Beckman Coulter | B49212 | human pan-B cell marker |
| CD20-APC | Beckman Coulter | A21693 | human pan-B cell marker |
| CD20-ECD | Beckman Coulter | IM3607 | human pan-B cell marker |
| CD5-PC 5.5 | Beckman Coulter | PN A70203 | human T cell marker |
| CD23-PE | Pharmingen | 555711 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| CD45 KO | Beckman Coulter | B36294 | Pan-leucocyte marker |
| CD200-PE | Pharmingen | 552475 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| NOD scid gamma (NSG) mice | Charles River Laboratories | 5557 | used to develop MCL xenografts in this study |
| Easy sep Human B cell enrichment kit | Stem cell technologies | 19054 | used to enrich B cells to obtain pure cells for injecting into mice |
| FACS | Beckman Coulter | Navios | used to characterize MCL sample and to study the organs for MCL engraftment |
| 1X ammonium chloride potassium buffer | red blood lysis buffer (NH4Cl 8,024 mg/l; KHCO3 1,001 mg/l; EDTA.Na2·2H2O 3.722 mg/l ) |
References
- Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B. Human chemokines: an update. Annu Rev Immunol. 15, 675-705 (1997).
- Baggiolini, M. Chemokines and leukocyte traffic. Nature. 392, 565-568 (1998).
- Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J. . Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. , (2001).
- De Silva, N. S., Klein, U. Dynamics of B cells in germinal centres. Nat Rev Immunol. 15 (3), 137-148 (2015).
- Cohen, P. L., Kurtin, P. J., Donovan, K. A., Hanson, C. A. Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma. Br. J. Haematol. 101, 302-310 (1998).
- Meusers, P., Hense, J., Brittinger, G. Mantle cell lymphoma: diagnostic criteria, clinical aspects and therapeutic problems. Leukemia (Baltimore). 11 (Suppl 2), S60-S64 (1997).
- Herrmann, A., et al. Improvement of overall survival in advanced stage mantle cell lymphoma. J Clin Oncol. 27 (4), 511-518 (2008).
- Martin, P., et al. Intensive treatment strategies may not provide superior outcomes in mantle cell lymphoma: overall survival exceeding 7 years with standard therapies. Ann Oncol. 19 (7), 1327-1330 (2008).
- Iyengar, S., et al. Characteristics of human primary mantle cell lymphoma engraftment in NSG mice. Br J Haematol. 173 (1), 165-169 (2016).
- Klco, J. M., et al. Functional heterogeneity of genetically defined subclones in acute myeloid leukemia. Cancer cell. 25 (3), 379-392 (2014).
- Kerbel, R. S. Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved. Cancer Biol Ther. 2 (4 Suppl 1), S134-S139 (2003).
- Johnson, J. I., et al. Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials. Br. J. Cancer. 84, 1424-1431 (2001).
- Scholz, C. C., Berger, D. P., Winterhalter, B. R., Henss, H., Fiebig, H. H. Correlation of drug response in patients and in the clonogenic assay with solid human tumour xenografts. Eur. J. Cancer. 26, 901-905 (1990).
- Doñate, C., Vijaya Kumar, A., Imhof, B. A., Matthes, T. Frontline Science: Anti-JAM-C therapy eliminates tumor engraftment in a xenograft model of mantle cell lymphoma. J Leukoc Biol. 100 (5), 843-853 (2016).
