이 문서 내용을 사용 하 여 탄소 섬유 전극 효소 바이오 센서 기술에 자연적인 보상 행동 동안 도파민과 높은 시간 해상도와 조미료의 릴리스를 측정 하는 고정 잠재력 amperometric 녹음의 사용은 여자는 햄스터
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방법 논문
이 문서 내용을 사용 하 여 탄소 섬유 전극 효소 바이오 센서 기술에 자연적인 보상 행동 동안 도파민과 높은 시간 해상도와 조미료의 릴리스를 측정 하는 고정 잠재력 amperometric 녹음의 사용은 여자는 햄스터
신경 전달 물질 방출 빠른 시간 규모를 측정 하는 능력 수 있습니다 특정 동작 또는 조작;에 연결 될 neurotransmission의 패턴을 기본 메커니즘 및 회로 elucidating에 강력한 도구입니다. 측정 하는 뇌의 거의 모든 분석을 수십 년 동안 microdialysis의 기술을 사용 하는 동안이 기법은 시간적 해상도 제한 됩니다. 또는 빠른 검색 주기적 voltammetry가 이다 일시적으로 정확 하 고 매우 민감한; 그러나,이 기술적으로 어려운 방법 관심의 분석의 electroactivity에 의존, 때문에 nonelectroactive 물질 (예를들면, 신경 전달 물질 글루타민 산 염)를 검출 하는 가능성은 제거 됩니다. 이 종이 고정 잠재적인 amperometry 및 임시 정밀 electroactive와 nonelectroactive 신경 전달 물질을 측정 하는 효소 바이오 센 싱 결합 하는 턴키 시스템의 사용을 자세히 설명 합니다. 이러한 두 가지 강력한 기술을의 페어링를 비교적 쉽게 토 닉과 phasic neurotransmission의 측정에 대 한 허용 하 고 허용 하는 동시에 여러 신경 전달 물질의 기록. 이 원고의 목표는 도파민과 조미료 neurotransmission에서 비보에 표시의 궁극적인 목표와 여성 햄스터에 자연스럽 게 보상 행동 (즉, 성적 행동)을 사용 하 여 측정 하는 과정을 설명 하는 이 분석 결과 다른 행동과 실험 패러다임 검사의 기술적 타당성
깨어 동작 동물에서 신경 전달 물질 방출 측정 하는 능력을 허용 한다 neurotransmission는 강력한 도구를 조사 메커니즘 및 모두 기본 회로의 공간 및 시간 패턴을 가진 특정 동작을 연결 하는 연구자를 자연 그리고 실시간으로 작동 동작입니다. 역사적으로, microdialysis 뇌1의 세포 외 환경에서 모두 전기 반응과 nonreactive 물질 측정 하 고용 하고있다. 이 기술은 반 투과성 빈 섬유 막2의 팁과 작은 샤프트 구성 microdialysis 프로브를 통해 extracellular 액체에 유사한 이온 성분의 수성 해결책의 지속적인 흐름을 사용 합니다. 프로브 삽입 후 신경 전달 물질 또는 관심의 다른 analytes 수 있습니다 교차 반 투과성 막 이후 분석에 대 한 간격-고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 수집 되 고 전에 수동 확산에 의해 한 일반적으로, 별도로 활용 하는 분석 화학 기술 식별, 그리고 이질적인 혼합물3구성 요소를 계량.
Microdialysis 관심의 거의 모든 분석을 측정 하는 데 사용할 수 있는 중요 한 기술 이지만, 시간적인 해상도 수십 분
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여기에서 설명한 모든 절차 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 미네소타의 대학에 의해 승인 되며 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 가이드에 따라 13 .
1. 동물과 Cannulation 수술
나이의 대략 55 일에 일반적인 동물 공급 업체에서액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
전기 화학 및 코딩 방법론 위에서 설명한 동작을 사용 하 여,이 연구소는 vivo에서 성적인 행동의 기록 중 토 닉과 도파민에 조미료 phasic 변동 특성 하기 시작 했다. 이 방법론의 일시적으로 정확한 방식으로 인해 우리 보다 정확 하 게 성적인 행동; 동안 neurotransmission을 특성 수 있습니다. 뿐만 아니라 개별 copulatory 동작 (예를 들어, 수단, 사정)의 여성의 접수 기간 동안 짝짓기 관찰 하 고 해당 과도 변동 하는 동안 해당 토 닉 변경 릴리스 패턴에 특정 변화를 돌리다 장착 남성.
특히, 우리는 도파민과 별도 동물의 NAc에 조미료의 릴리스 패턴 측정에 초점이 방법론을 사용 합니다. NAc22 처리 보상에 관련 된 중요 한 지역 이며, 성적 행동
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비록 비교적 간단 하 고,이 기술을 채용 하는 경우 몇 가지 문제가 발생할 수 있습니다. 첫째, 조사의 stereotaxic 배치 정확 해야: microdialysis 샘플 조사를 둘러싼 extracellular 환경에의 더 넓은 반경, 달리이 기술은 허용 직접 접촉으로 오는 신경 전달 물질의 측정 와 조사. 둘째, 섬유의 작은 폭으로 인해 탄소 섬유 녹음의 경우 파손 발생할 수 있습니다, 그리고 신중한 주의 프로브를 삽입 해야 합니다. Glutamatergic 바이오 센서의 경우 효소 저하는 프로브 3 주 보장된 기간 내 사용 하지 않은 경우 발생할 수 있습니다. 다행히도, 이러한 모든 문제는 주소 지정, 그리고 적절 한 주 및 세부 사항에 주의 함께 삭제 될 수 있다.
잠재적으로 문제가 있는 경고 고정 잠재력 탄소 섬유 녹음의 특이성에 발생합니다. 녹음은 모두 신경 전달 물질을 릴리스 하는 영역에서 만들어진 경우 도파민에 대 한 적용된 가능성 노르, 같은 다른 monoamin.......
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저자는 공개 없다.
저자는 다니엘 한미 Matlab 코드를 실행 하는 그의 도움에 대 한 학부 및 학부 알렉스 Boettcher 행동 실험 실행에 그의 원조에 대 한 감사 하 고 싶습니다. 이 프로젝트는 NSF IOS 1256799 R.L.M.에 의해 및 보너스 번호 T32DA007234에서 국립 보건원의 약물 남용에 국가 학회에 의해 지원 됩니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Nembutal | 오크 제약 Inc. | 76478-501-50 | 펜토바르비탈 나트륨 주사제, USP. 이 실험실은 체중 8.5mg/100g을 사용하여 페로틴 내 주사를 사용합니다. |
| Loxicom 진통제 | 노브룩 연구소 | 6451603670 | NSAID는 수술 후 통증 조절에 사용되는 항염증 및 진통제입니다. 일반: meloxicam. |
| 엔로플록스 항생제 | 노브룩 연구소 | 5552915411 | 수술 후 감염 예방을 위한 플루오로퀴놀론 항생제. 제네릭: 엔로플록사신. |
| 뷰타나시아-D | Merck Animal Health | 00061047305 | 펜토바르비탈 나트륨, 페니토인 나트륨 안락사제. |
| 뼈 나사 | Pinnacle Technologies, Inc. | 8111-16 | 1/8" 뼈 나사 (Pkg. 16)는 두개골 캡을 두개골에 고정하는 데 사용됩니다. |
| 치과용 아크릴 (Bosworth Duz-All) | Bosworth | 166261C | 자체 경화 치과 용 아크릴은 캐뉼라를 고정하고 두개골에 헤드 마운트를 부착하기 위해 두개골 캡을 구성하는 데 사용됩니다. |
| 하드웨어 바이오센서 설정 | 피나클 테크놀로지스, Inc. | 8400-K2 | 피나클은 쥐용 테더링 바이오센서 시스템의 신규 사용자를 위한 완벽한 하드웨어 키트를 제공합니다. 키트에는 정류자, 프리앰프, 데이터 컨디셔닝 및 수집 시스템이 포함되어 있습니다. |
| 기본 비디오 컴퓨터 패키지 | Pinnacle Technologies, Inc.. | 9000-K1 | 기본 컴퓨터 패키지에는 충분한 하드 디스크 저장 공간, 고화질 모니터, 키보드 및 마우스, 무정전 전원 공급 장치 및 필요한 모든 케이블이 있는 사전 구성된 컴퓨터가 포함되어 있습니다. |
| 비디오 EQ700 EverFocus 카메라 패키지 | Pinnacle Technologies, Inc. | 9000-K10 | 독립적인 IR 소스가 있는 EQ700 야간 투시경 가능 박스 카메라는 Pinnacle 비디오 컴퓨터 패키지의 일부로 획득했습니다. 돔 카메라(9000-K9) 및 HD 카메라(9000-K11) 옵션도 사용할 수 있습니다. |
| Sirenia 인수 소프트웨어 | Pinnacle Technologies, Inc. | 무료 - pinnaclet.com Sirenia에서 다운로드 가능 | Acquisition은 모든 Pinnacle 하드웨어 시스템의 데이터를 기록하기 위한 단일 플랫폼을 제공합니다. 이 소프트웨어는 모든 데이터 스트림의 동기화, 사용자 구성 가능한 설정, 데이터 통합 및 다중 내보내기 옵션을 제공합니다. 또한 이 소프트웨어에는 바이오센서 기록을 위한 기본 검토 및 분석 모듈이 포함되어 있습니다. 시레니아 데이터 수집 및 검토에 이상적인 무료 LL-in-One 소프트웨어를 제공합니다. |
| 묶인 쥐 시험관에서 교정 키트 | Pinnacle Technologies, Inc. | 7000-K2-T-베이스 | 바이오센서에 의해 측정된 현재 변화를 분석물 농도의 실제 변화와 관련시키려면 동물에 이식하기 전에 바이오센서를 보정해야 합니다. 이 프로세스는 또한 센서의 무결성과 선택성을 확인합니다. 보정 키트에는 20 mL 재킷 비커(#7058), 1/2" x 1/8" 자기 교반 바(#7059), 직각 클램프(#7056), 2핀 단일 조정 클램프(#7055), 4채널 보정 프리앰프(#7053) 및 보정 홀더(#7051)가 포함되어 있습니다. |
| 젓는 접시 | Corning | 6795-410D | Corning 디지털 교반기, 5" x 7", 120 VAC는 글루타메이트 바이오센서의 in vitro 보정 중에 재킷 비커에서 자기 교반기를 회전시키는 데 사용됩니다. |
| 폐쇄 루프 순환이 가능한 수조 | PolyScience | 8006A11B | PolyScience 8006A11B 6L 표준 디지털 가열 순환 수조, 120VAC 수조는 플라스틱 튜브와 함께 사용되어 자켓 비커를 생리학적 온도로 가열했습니다. |
| BASi rat cannulae | Pinnacle Technology, Inc. | 7002-CFS | 도파민 신경 전달을 기록하는 데 사용되는 탄소 섬유 전극. |
| Ag/AgCl 기준 전극 | Pinnacle Technology, Inc. | 7065 | 탄소 섬유 녹음에 필요합니다. |
| 글루타메이트 바이오센서 | 피나클 테크놀로지, Inc. | 7001 | 글루타메이터성 신경 전달을 기록하는 데 사용되는 효소 바이오센서 프로브. |
| BASi 가이드 cannulae | Pinnacle Technologies, Inc. | 7030 | 프로브를 안내하기 위해 관심 있는 뇌 영역에 이식된 가이드 캐뉼러. |
| 쥐를 위한 BASi 캐뉼라 플라스틱 헤드피스 | 피나클 테크놀로지스, Inc. | 7011년 | 헤드마운트는 프로브를 안정화하고 potentiostat에 부착합니다. |
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