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방법 논문

미세 드라이 회전 및 재생성된 실크 Fibroin 섬유의 특성

10K 조회수

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DOI:

10.3791/56271

⸱

2017년 9월 4일

 ,  ,  , 

이 논문에서

요약

미세 회전 및 재생성된 실크 fibroin monofilament의 미세 특성화에 대 한 프로토콜 제공 됩니다.

초록

프로토콜 누의 회전 과정을 흉내 낸에 대 한 메서드를 보여 줍니다. 기본 회전 과정에서 계약 회전 덕트 실크 단백질을 콤팩트 하 고 전단 및 신장 힘에 의해 정렬 될 수 있습니다. 여기, biomimetic 미세 채널 누의 회전 덕트의 특정 기하학을 모방 하도록 설계 되었습니다. 재생성 된 실크 fibroin (RSF) 회전 높은 농도, 첨가 온도 압력에서 드라이 스핀 섬유 아닌 통해 돌출 했다. 사후 처리 과정에서로 냈 지 섬유 했다 그려지고 에탄올 용액에 저장 됩니다. 싱크 로트 론 방사선 광각 x 선 회절 (SR-WAXD) 기술은 RSF 섬유 축 x-레이의 microbeam에 샘플 홀더를 고정 하는 단일 RSF 섬유의 미세를 조사 하기 위해 사용 되었다. 화도, crystallite 크기 및 결정 방향 섬유의 WAXD 데이터에서 계산 했다. 2 차원 WAXD 패턴의 적도 근처 회절 호 사후 처리 RSF 섬유 높은 방향 정도 나타냅니다.

서론

거미 및 누 주위 온도 압력에서 수성 단백질 해결책에서 뛰어난 실크 섬유를 생산할 수 있다. 전단 및 extensional 흐름 실크 동맥1액정 텍스처의 형성을 유도할 수 있다. 최근 몇 년 동안, 고 강도 인공 섬유를 생산 하기 위해서는 거미의 회전 과정을 흉내 낸에 큰 관심이 되었습니다. 그러나, 거미 실크 단백질의 대량 수 없습니다 효율적이 고 경제적으로 의해 생산 농업 식인 풍습으로 인해 거미. 상당한 양의 누 실크는 농업에 의해 쉽게 얻어질 수 있다. 그렇지 않으면, 누와 거미 유사한 회전 과정과 아미노산 성분이 있다. 따라서 누 실크 fibroin 선택 대신 인공 동물 실크 스핀 많은 연구자에 의해.

거미 및 누에에서 섬유에 그들의 회전 덕트를 통해 단백질 해결책을 압출 성형. 가장 가능성이 회전 덕트를 따라 생성 높은 스트레스 힘 더 확장 구조2실크 fibroin 분자 스트레칭. 인공 실크 섬유 기존의 젖은 회전 및 회전 건조 프로세스3,4, 고려 하지 않는 사용 하 여 회전 된 유체 힘 회전 덕트에서 생성 된 계정.

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프로토콜

주의: 사용 하기 전에 모든 관련 물질 안전 데이터 시트를 참조 하십시오. 성형을 준비에 사용 되는 화학 물질의 일부는 심하게 독성이 있습니다. 개인 보호 장비 (안전 안경, 장갑, 실험실 코트, 전장 바지 및 폐쇄 발가락 신발)를 사용 하십시오.

1. 미세 회전의 RSF 용액

  • 준비의 RSF 마약 회전 수성 4 , 15 ,
      16
      1. Degumming 누의
        1. Degum 누에나방 고치 나 2 CO 3 수성 솔루션 (물에 0.5 wt %)에 두 번 30 분 각, 100 ° C에서 누에고치 및 다음 제거 하는 이온된 수와 실크를 씻는 sericin.
      2. Dissolving 반죽 누 누에고치의
        1. 건조 한 공기에 반죽 누에고치 실크; 다음 9.0 M LiBr 수 용액 1:10 (w/v) 40 ° C에서 2 h의 비율에 반죽 누에고치 실크 분해. 예를 들어 1 그램 실크 (
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    결과

    고 강도 RSF 섬유 미세 회전 메서드를 사용 하 여 성공적으로 생산 되었다. 응력-변형 곡선 및 뻗어 RSF 섬유 C44R40의 SEM 이미지는 그림 2에 표시 됩니다. 적어도 10 섬유는 인장 시험에서 측정 되었다. 응력-변형 곡선 섬유의 주요 스트레스와 긴장의 평균 값에 따라 선택 되었다. 섬유의 WAXD 데이터는 그림 3에 나와 있습니다. 화도 및 결정 방향 WAXD 데이터에 따라 계산 했다. 샘플 지정 사용 하 여 C와 R 회전 마약 및 상대 습도에 RSF의 농도 각각 제시. 예를 들어 섬유 40 ± 5% RH 4의 무승부로 비에 그린 후 C44R40으로 지정 되었다 44 wt %RSF 회전 마약에서 냈 지. 다른 섬유는 같은 설명에 따라 C44R50, C47R40, 및 C47R50로 변경 했다.

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    토론

    RSF 솔루션의 투 석 동안 pH 값이 다음 농도 과정에 대 한 중요 합니다. 이온된 수의 pH 값이 6 보다 작은, RSF 솔루션 집중 과정에서 젤 쉬울 것 이다. 겔 화를 피하기 위해, CaCl2 RSF 솔루션에 추가 됩니다. CaCl2 의 농도 1 mmol RSF의 무게 당.

    우리의 이전 작품의 미세 드라이-8RSF 수성 해결책 가능성을 보여주었다. 미세 채널의 형상을 단순화 된 단일 단계 지 수 함수를 했다. 거미 및 누, 회전 진한 액체 섬유 형성1,20전에 2 단계 지 수 회귀 회전 덕트를 통해 아래로 추첨을 했다. 여기, 미세 채널 형상 누 회전 덕트1의 두 번째 순서 지 수 감퇴 기능을 흉내 낸에 의해 설계 되었습니다. Microfluidi.......

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    공개 사항

    저자는 공개 없다.

    감사의 글

    이 작품은 주최 국립 자연 과학 재단의 중국 (21674018), 국가 핵심 연구 및 중국의 개발 프로그램 (2016YFA0201702 /2016YFA0201700), 그리고 "Shuguang 프로그램" 상하이 교육 개발 지원 재단과 상하이 시 교육 위원회 (15SG30), 상해시 영 교수 프로그램 (A201302), 중앙 대학 및 111 프로젝트 (No.111-2-04)에 대 한 근본적인 연구 자금을 구별.

    ....

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    재료

    이 논문에 사용된 재료 목록
    이름회사카탈로그 번호댓글
    B. mori저장성 퉁샹의 고치 농부
    탄산나트륨, 무수, 99.8%Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., 중국분석적으로 순수한
    리튬 브로마이드, 99.1%Shanghai China Lithium Industrial Co., Ltd., 중국분석적으로 순수한
    염화칼슘, 무수, 96.0%Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., 중국분석적으로 순수한
    에탄올, 무수, 99.7%Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd., 중국10009218분석적으로 순수한
    SU-8 감광액MicroChem Corp., 미국
    개발 용액MicroChem Corp., 미국
    Sylgard 184Dow Corning, 미국
    이소프로판올Shanghai Lingfeng 화학 시약 Co., Ltd., 중국분석적으로 순수한
    농축 황산Pinghu 화학 시약 공장, 중국분석적으로 순수한
    30 vol% 과산화수소Shanghai Jinlu 화학 시약 Co., Ltd., 중국분석적으로 순수한
    아세톤Shanghai Zhengxing 화학 시약 공장, 중국분석적으로 순수함
    산소 플라즈마 처리DT-01, Suzhou Omega Machinery Electronic Technology Co., Ltd., 중국
    주사기 펌프  KD Scientific, 미국KDS 200P
    가습기SEN 전기
    드릴러Hangzhou Bo Yang Machinery Co., Ltd., 중국벤치 드릴링 머신 Z406c
    재료 테스트 시스템Instron, 미국모델: 5565
    PeakFitSystat Software, Inc., 미국버전 4.12
    중국

    참고문헌

    1. Asakura, T., et al. Some observations on the structure and function of the spinning apparatus in the silkworm Bombyx mori. Biomacromolecules. 8 (1), 175-181 (2007).
    2. Vollrath, F., Knight, D. P. Liquid crystalline spinning of spider silk. Nature. ....

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