फिर से Arterialized चूहा आंशिक vivo पोत में एक के साथ जिगर ट्रांसप्लांटेशन-उंमुख 70% Hepatectomy
Summary
यहां, एक पुनः शामिल प्रोटोकॉल arterialized चूहे आंशिक जिगर ट्रांसप्लांटेशन प्रस्तुत किया है । विशेष रूप से, 70% जिगर पोत उंमुख hepatectomy की एक अद्यतन तकनीक का उपयोग करके vivo में reविदारक था । यकृत धमनी एक अंत करने के लिए साइड तरीके से खंगाला गया था । कफ तकनीक को infrahepatic वेना कावा के सम्मिलन समय को छोटा करने के लिए संशोधित किया गया.
Abstract
विभाजन जिगर प्रत्यारोपण और रहने वाले जिगर दाता जिगर प्रत्यारोपण क्लिनिक में विकसित करने के लिए एक अधिक कुशल तरीके से जिगर अंगों का उपयोग किया गया । बेहतर इन शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं के पीछे तंत्र को समझने के लिए, एक चूहे आंशिक जिगर प्रत्यारोपण (PLTx) मॉडल प्रासंगिक शल्य चिकित्सा अध्ययन के लिए स्थापित किया गया था । चूहे PLTx मॉडल की जटिलता के कारण, विस्तृत विवरण के साथ एक प्रोटोकॉल की आवश्यकता है । प्रकाशित एक लेख पहले एक प्रोटोकॉल जिसमें पूर्व vivo hepatectomy 50% चूहे PLTx प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया गया था की सूचना दी । इस प्रोटोकॉल के विपरीत, हम एक vivo में 70% hepatectomy के साथ एक फिर से arterialized PLTx की शुरुआत की । microsurgical प्रक्रिया को परिष्कृत करने के लिए एक अद्यतित पोत-उन्मुख hepatectomy को चूहे PLTx में शामिल किया गया । पोर्टल नसों और बाएं पार्श्व पालि और औसत पालि के यकृत धमनियों व्यक्तिगत रूप से विच्छेदित और जिगर पैरेन्काइमा को हटाने से पहले ligated थे, जिससे अवशेष जिगर स्टंप में रक्तस्राव की संभावना को कम । इसके अलावा, आम यकृत धमनी और बढ़े हुए उचित यकृत धमनी के बीच एक अंत करने वाली पक्ष पोत सम्मिलन को फिर से शुरू किया गया था यकृत धमनी arterialize । इस अंत करने के लिए साइड पोत सम्मिलन तकनीक का उपयोग करके, सम्मिलन के व्यास में वृद्धि हुई थी, जिससे हाथ सीवन की कठिनाई को कम करने और anastomotic प्रत्यक्षता की एक उच्च दर बनाए रखने. इसके अलावा, infrahepatic वेना कावा के कफ सम्मिलन थोड़ा संशोधित किया गया था । एक प्राप्तकर्ता के वेना कावा के आसपास circumferential जिगर पैरेन्काइमा के एक खंड कफ सम्मिलन के दौरान संरक्षित किया गया संवहनी लुमेन के तीन आयामी आकार बनाए रखने के लिए. लिवर पैरेन्काइमा की इस धारा को सम्मिलन पूरा करने के बाद हटा दिया गया । इस संशोधन के साथ, रहने टांके की नियुक्ति को शामिल कदम छोड़ा गया था, जिससे आगे कफ सम्मिलन समय छोटा । चूहे PLTx, एक कम जिगर एंजाइम स्तर, एक बरकरार जिगर lobular वास्तुकला और एक उच्च जीवित रहने की दर के इस प्रोटोकॉल का उपयोग करके microsurgery के बाद हासिल किया गया ।
Introduction
वर्तमान में, वहां दान जिगर अंगों की संख्या और एक दान जिगर के लिए इंतजार कर रोगियों की संख्या के बीच एक बड़ी विसंगति है । लिवर अंगों की कमी एक वैश्विक समस्या है । दाता पूल का विस्तार करने के लिए, विभाजन जिगर ट्रांसप्लांटेशन (LTx) और रहने वाले दाता LTx एक भ्रष्टाचार के रूप में एक आंशिक जिगर का उपयोग करने के लिए विकसित किया गया1।
आगे आंशिक जिगर प्रत्यारोपण (PLTx) के पीछे तंत्र की जांच करने के लिए, प्रासंगिक पशु मॉडल2,3,4,5स्थापित किया गया है । चूहे PLTx में, जिगर पालियों vivo में और पूर्व vivo मानव में जीवित दाता LTx और विभाजन LTx की शर्तों की नकल करने के लिए, reविदारक हैं । visualized प्रयोगों के जर्नल में प्रकाशित एक कागज एक विस्तृत 50% चूहे PLTx एक पूर्व vivo hepatectomy5का उपयोग कर शामिल प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया । हालांकि, वीवो hepatectomy में एक के साथ एक चूहे PLTx ने इस दृश्य साहित्य में अभी तक रिपोर्ट नहीं की है ।
vivo और ex vivo hepatectomies में अंतर के अलावा, एक hepatectomy के प्रदर्शन की तकनीक भी PLTx के परिणाम का निर्धारण करने में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है । वर्तमान में, कई शल्य चिकित्सा अध्ययन में चूहे का उपयोग PTLx मॉडल, जिगर पालियों जिगर पालि2,3,6,7,8,9के pedicle में एक साधारण बंधाव रखने के बाद reविदारक थे । हालांकि, लकीर से पहले एक सरल बंधाव रखने के सभी जिगर पालियों के लिए उपयुक्त नहीं है, के रूप में अलग जिगर पालियों अलग आकृति और आकार है । औसत पालि के आधार पर एक साधारण बंधाव वेना कावा, जो अंततः आंशिक जिगर भ्रष्टाचार10,11के बहिर्वाह प्रभावित हो सकता है की एक कसना पैदा करने का एक उच्च जोखिम वहन करती है । इसलिए, चूहा यकृत शरीर रचना के ज्ञान पर आधारित एक अद्यतन hepatectomy तकनीक चूहे PTLx के क्षेत्र में आवश्यक है ।
इस अध्ययन में वर्णित प्रोटोकॉल में, एक अद्यतन पोत उंमुख 70% hepatectomy चूहे PLTx की प्रक्रिया में शामिल किया गया था । पोर्टल नसों और बाएं पार्श्व पालि (LLL) और माध्य पालि (एमएल) की यकृत धमनियों और विच्छेदित किया गया जिगर पैरेन्काइमा को हटाने से पहले व्यक्तिगत रूप से विभाजित । फिर, LLL और एमएल के यकृत नसों भेदी टांके द्वारा ligated थे । एक साधारण बंधाव रखने के बजाय व्यक्तिगत ligations और एकाधिक भेदी टांके का उपयोग करके, एमएल के अवशेष स्टंप वेना कावा के ऊपर फैल करने में सक्षम था । अत: एक सर्जिकल बंधाव के कारण infrahepatic वेना कावा का कसना टाल दिया गया. इसके अतिरिक्त, LLL और एमएल के रक्त की आपूर्ति के रोड़ा जिगर को हटाने से पहले व्यक्तिगत ligations द्वारा पैरेन्काइमा अवशेष जिगर स्टंप में खून बह रहा की दर में कमी आई है, इस तरह के प्रयोगों पर खून की कमी के प्रभाव को कम करने के लिए11.
microsurgeons के लिए, यह एक महत्वपूर्ण चुनौती है क्योंकि इस पोत के अत्यंत छोटे व्यास के एक जिगर भ्रष्टाचार के उचित यकृत धमनी (के ्ह्) पुनर्निर्माण । हालांकि का सवाल है कि फिर से LTx में arterialization वास्तव में आवश्यक है अभी भी बहस के तहत12,13,14, यकृत धमनी के पुनर्निर्माण के लिए कई microsurgical तकनीक का प्रस्ताव किया गया है14 . यहां, हम पुनः के लिए एक उपंयास तकनीक लागू जिगर भ्रष्टाचार, जो एक अंत करने के लिए साइड तरीके में बढ़े हुए ्ह् करने के लिए आम यकृत धमनी (चा) anastomoses के arterialization । इस अंत करने वाली साइड तकनीक का उपयोग करके, दो यकृत धमनियों एक बड़ा व्यास के एक सम्मिलन के साथ जुड़े हुए हैं । सम्मिलन का व्यास बड़ा है, आसान हाथ suturing प्रदर्शन करने के लिए है और अधिक से अधिक सम्मिलन के प्रत्यक्षता में सुधार हो जाता है ।
Protocol
Representative Results
Discussion
चूहा PLTx एक प्रशिक्षण कार्यक्रम है कि लागत में उच्च है और लंबी अवधि में20के साथ एक परिष्कृत microsurgical प्रक्रिया है । चूहे PLTx प्रोटोकॉल की जटिलता शोधकर्ताओं ने इस पशु मॉडल का उपयोग करने से रोका है । पूर?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध का समर्थन राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन ऑफ चाइना (ग्रांट नो. ८१५०१३८२) और झेजियांग प्रांतीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन ऑफ चाइना (ग्रांट नो. LQ13H100003 और LQ16H100002) ।
Materials
| Surgical microscope | Möller-Wedel, Germany | 654359 | |
| Light source | OSRAM (China) Lighting Co., Ltd | 64627 | |
| Isoflurane Vaporizer | MIDMARK Corporation | VIP3000 | |
| Isoflurane | Baxter Healthcare Corporation | 40032609 | For Inhalation anesthesia |
| Normal Saline | Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. | 716092103 | |
| Povidone Iodine Solution | HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL | H33021567 | For disinfection |
| Hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J31020 | |
| Surgical scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | JC2116 | |
| Needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J32030 | |
| Dressing Forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J42020 | |
| Mosquito hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40340 | For liver resection; For retracting the stay sutures. |
| Micro-scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA1040 | |
| Micro needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA2060 | |
| Curved micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3061 | |
| straight micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3060 | |
| Micro hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3020 | |
| Bulldog clamp | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | XEC350 | |
| Vessel clamps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40160 | |
| Micro Serrefine-curved | Fine Science Tools, Inc | 18055-05 | |
| Dacryosyrinx | Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. | 5# curve | Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen |
| Sterilized gauze swabs | Fuqing Health & Integral Medical | 20230R | |
| 5mL syringe | Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd | 811932416 | |
| 18G needles | Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd | 01-014 | For fixing the upper abdomen wall |
| Intima II 22G intraveous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 383207y | For making biliary stent; For infusing perfusate |
| 7-0 polypropylene sutures | Ningbo Medical Needle Co., Ltd | 151026 | For SHVC anastomsis |
| 6-0 silk suture | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 2650182 | For ligation |
| Culture dish (100mm) | Corning Incorporated | 430165 | used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. |
| Culture dish (30 mm) | Corning Incorporated | 3296 | As a vessel for organ preservation |
| Angiocath 12G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382277 | For making a IHVC cuff |
| Angiocath 14G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382269 | For making a PV cuff |
| Buprenorphine (hydrochloride) | Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd | H12020275 | For analgesic |
| Cefuroxime sodium for injection | Esseti FarmaceuticiS.r.l | H20160013 | As an antibiotics |
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