다시는 vivo에서 선박 지향 70% 쥐 부분 간 이식 Arterialized Hepatectomy
Summary
여기, 다시 arterialized 쥐 부분 간 이식 관련 프로토콜 제공 됩니다. 특히, 70% 간 선박 지향 hepatectomy의 업데이트 기술을 사용 하 여 절제 vivo에서 했다. 간 동맥은 엔드-투-사이드 방식으로 개축 되었다. 팔목 기술 infrahepatic 베 나 정 맥 문 합 시간을 수정 했습니다.
Abstract
분할된 간 이식 및 살아있는 간 기증자 간 이식 간 장기에서 더 효율적인 방법으로 활용 하는 병원에서 개발 되었다. 더 잘 이해 하려면 이러한 수술 절차 뒤에 메커니즘, 쥐 부분 간 이식 (PLTx) 모델 관련 수술 연구를 위해 설립 되었다. 쥐 PLTx 모델의 복잡성 때문에 자세한 설명과 함께 프로토콜이 필요 합니다. 게시 된 문서 이전 프로토콜 hepatectomy 비보 전 50% 쥐 PLTx를 달성 하기 위해 사용 되었다 보고. 이 프로토콜을 달리 vivo에서 70 %hepatectomy 다시 arterialized PLTx를 도입 했습니다. 업데이트 된 선박 지향 hepatectomy 쥐 microsurgical 절차를 수정 하기 위해 PLTx에 통합 되었다. 포털 정 맥과 간 동맥 왼쪽된 측면 엽과 중간 엽의 개별적으로 해 부 되었고 나머지 간 그 루터 기에서 출혈의 확률 감소는 간 실질의 제거 하기 전에 출혈. 또한, 일반적인 간 동맥 확대 적절 한 간 동맥 사이 엔드-투-사이드 혈관 문 합 간 동맥을 다시 arterialize을 소개 했다. 이 엔드-투-사이드 혈관 문 합 기법을 사용 하 여 그로 인하여 손 봉합의 어려움을 감소 하 고 anastomotic patency의 높은 속도 유지 하는 문 합의 직경 확대 했다. 또한, infrahepatic 베 나 정 맥의 갑 문 합을 약간 수정 했습니다. 받는 사람의 베 나 정 맥 주위 원주 간 실질의 섹션 갑 문 합 혈관 루멘의 3 차원 모양을 유지 하는 동안 보존 되었다. 간 실질의이 섹션은 문 합을 완료 한 후 제거 되었습니다. 이 수정, 숙박 봉합의 배치와 관련 된 단계 갑 문 합 시간을 단축 함으로써 추가 생략 되었다. 쥐 PLTx의이 프로토콜을 사용 하 여 낮은 간 효소 수준, 그대로 간 lobular 건축과 높은 생존 율은 미세 후 달성 했다.
Introduction
현재, 기증된 간 기다리는 환자의 수와 간 기증된 장기의 수 사이 큰 차이가 있다. 간 장기의 부족은 세계적인 문제 이다. 기증자의 수영장을 확장, 분할 간 이식 (LTx), 살아있는 기증자 LTx 부분 간 이식1로 사용 하 여 개발 되었다.
추가 부분 간 이식 (PLTx) 뒤에 메커니즘을 조사, 관련 동물 모델 설립된2,3,,45되었습니다. 쥐 PLTx에서 간 엽 있으며 절제 vivo에서 ex vivo LTx 살아있는 기증자의 상태를 모방 하 여 인간의 LTx, 각각, 분할. 시각 실험의 저널에 에서 발표 된 논문 50% 쥐 PLTx는 ex vivo hepatectomy5를 사용 하 여 관련 된 상세한 프로토콜을 제시. 그러나, vivo에서 hepatectomy와 쥐 PLTx 하지 아직 알려졌다 시각화 된 문학에서.
Vivo에서 및 비보 전 hepatectomies 차이 자체 hepatectomy 수행의 기술 또한 많은 외과 연구 쥐 PTLx를 사용 하 여 현재, PLTx. 결과 결정에 중요 한 역할 담당 모델, 간 엽 간 엽2,3,6,7,,89의 작은 꽃 자루에는 간단한 결 찰 후 절제 했다. 그러나, 다른 모양 및 크기는 간단한 결 찰 절제술 다른 간 엽으로 모든 간 엽에 적합 하지 않습니다 하기 전에 배치. 중간 엽의 기지에서 간단한 결 찰 결국 부분 간 이식10,11의 유출에 영향을 미칠 수 있습니다 베 나 정 맥의 수축이 발생의 높은 위험을 운반 합니다. 따라서, 쥐 간 해부학의 지식을 바탕으로 하는 업데이트 hepatectomy 기법 쥐 PTLx의 분야에서 필요 합니다.
이 연구에서 설명 하는 프로토콜에 업데이트 선박 지향 70 %hepatectomy 쥐 PLTx의 절차에 통합 되었다. 포털 정 맥과 왼쪽된 측면 엽 (LLL) 및 중간 엽 (ML)의 간 동맥 해 부 되었고 간 실질의 제거 하기 전에 개별적으로 분할. 그런 다음, LLL와 ML의 간장 혈관 봉합을 피어 싱으로 출혈 했다. 개별 ligations 여러 날카로운 봉합을 사용 하 여 보다 간단한 결 찰을 배치, 여는 ML의 나머지 그 루터 기 베 나 정 맥에 걸쳐 수 있었습니다. 따라서, infrahepatic 베 나 카바 수술 결 찰으로 인 한 수축 피할 수 있었다. 또한, 개별 ligations 간 실질의 감소는 간 남은 그 루터 기 실험11혈액 손실의 영향을 최소화에 출혈의 속도 전에 의해 LLL와 ML의 혈액 공급의 폐색.
Microsurgeons에 대 한이의 매우 작은 직경 때문에 간 이식의 적절 한 간 동맥 (PHA)를 재구성 하 중요 한 도전 이다. 간 동맥을 재구성을 위해 수많은 microsurgical 기술 제안된14 되었습니다 비록 LTx 재 arterialization 인지 진정으로 필요한의 질문은 아직 논쟁12,,1314, . 여기, 우리는 엔드-투-사이드 방식 확대 PHA를 anastomoses 일반적인 간 동맥 (차) 간 이식의 다시 arterialization에 대 한 새로운 기술을 소개 합니다. 이 엔드-투-사이드 기법을 사용 하 여 두 간 동맥 더 큰 직경의 문 합으로 연결 됩니다. 큰는 문 합의 직경은, 쉽게 손을 봉합 수행 이며 큰는 문 합의는 patency에 개선 된다.
Protocol
Representative Results
Discussion
쥐 PLTx 훈련 프로그램을 비용에서 높고 긴 기간20에서 정교한 microsurgical 절차 이다. 쥐 PLTx 프로토콜의 복잡성 연구를이 동물 모델을 사용 하지 못했습니다. 전체 크기 쥐 LTx와 비교 하면, 이식 절차의 도전 뿐만 아니라 작은 동물에서 간 절제술의 도전으로 쥐 PLTx는 microsurgeon를 제공 합니다. 따라서, 세부 사항에 전체 절차를 설명 하는 시각된 microsurgical 프로토콜이 복잡 한 모델을…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 국립 자연 과학 재단의 중국 (보조금 번호 81501382)와 절 강 지방 자연 과학 재단의 중국 (부여 번호에 의해 지원 되었다 LQ13H100003 그리고 LQ16H100002)입니다.
Materials
| Surgical microscope | Möller-Wedel, Germany | 654359 | |
| Light source | OSRAM (China) Lighting Co., Ltd | 64627 | |
| Isoflurane Vaporizer | MIDMARK Corporation | VIP3000 | |
| Isoflurane | Baxter Healthcare Corporation | 40032609 | For Inhalation anesthesia |
| Normal Saline | Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. | 716092103 | |
| Povidone Iodine Solution | HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL | H33021567 | For disinfection |
| Hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J31020 | |
| Surgical scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | JC2116 | |
| Needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J32030 | |
| Dressing Forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J42020 | |
| Mosquito hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40340 | For liver resection; For retracting the stay sutures. |
| Micro-scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA1040 | |
| Micro needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA2060 | |
| Curved micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3061 | |
| straight micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3060 | |
| Micro hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3020 | |
| Bulldog clamp | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | XEC350 | |
| Vessel clamps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40160 | |
| Micro Serrefine-curved | Fine Science Tools, Inc | 18055-05 | |
| Dacryosyrinx | Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. | 5# curve | Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen |
| Sterilized gauze swabs | Fuqing Health & Integral Medical | 20230R | |
| 5mL syringe | Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd | 811932416 | |
| 18G needles | Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd | 01-014 | For fixing the upper abdomen wall |
| Intima II 22G intraveous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 383207y | For making biliary stent; For infusing perfusate |
| 7-0 polypropylene sutures | Ningbo Medical Needle Co., Ltd | 151026 | For SHVC anastomsis |
| 6-0 silk suture | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 2650182 | For ligation |
| Culture dish (100mm) | Corning Incorporated | 430165 | used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. |
| Culture dish (30 mm) | Corning Incorporated | 3296 | As a vessel for organ preservation |
| Angiocath 12G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382277 | For making a IHVC cuff |
| Angiocath 14G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382269 | For making a PV cuff |
| Buprenorphine (hydrochloride) | Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd | H12020275 | For analgesic |
| Cefuroxime sodium for injection | Esseti FarmaceuticiS.r.l | H20160013 | As an antibiotics |
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