Re-artérialisé Transplantation de foie partielle de Rat in vivo axée sur le navire 70 % hépatectomie
Summary
Ici, un protocole impliquant une transplantation hépatique partielle rat re-artérialisé est présenté. Plus précisément, 70 % foie a été réséquée en vivo en utilisant une technique de mise à jour d’une hépatectomie axée sur le navire. L’artère hépatique a été reconstruite d’une manière d’extrémité à l’autre. La technique de Brassard a été modifiée pour raccourcir le temps de l’abouchement de la veine cave infrahepatic.
Abstract
Scinder une transplantation du foie et transplantation hépatique du foie donneur vivant ont été développés dans la clinique d’utiliser des organes foie de manière plus efficace. Pour mieux comprendre le mécanisme derrière ces interventions chirurgicales, un modèle de transplantation hépatique partielle (PLTx) chez le rat a été créé pour les études pertinentes chirurgicales. En raison de la complexité du modèle PLTx chez rat, il faut un protocole avec des descriptions détaillées. Un article publié précédemment un protocole dans lequel ex vivo hépatectomie a été utilisée pour atteindre 50 % rat PLTx. Contrairement à ce protocole, nous avons introduit un nouveau artérialisé PLTx avec une hépatectomie de 70 % en vivo . Une mise à jour hépatectomie axée sur le navire a été incorporée dans le rat PLTx d’affiner la procédure microchirurgicale. Les veines et artères hépatiques de la lobe latéral gauche et le lobe médian étaient individuellement disséqués et ligaturés avant l’enlèvement du parenchyme hépatique, ce qui diminue la probabilité de saignement dans le moignon de vestige du foie. En outre, une anastomose bout à l’autre navire entre l’artère hépatique commune et l’artère hépatique approprié élargie a été introduite pour re-arterialize de l’artère hépatique. En utilisant cette technique d’anastomose bout à l’autre navire, le diamètre de l’anastomose a été agrandi, ainsi diminuer la difficulté de suture de la main et maintenir un taux élevé de perméabilité anastomotique. En outre, l’anastomose de la manchette de la veine cave infrahepatic a été légèrement modifié. Une section du parenchyme hépatique circonférentielle autour de la veine d’un destinataire a été préservée au cours de l’anastomose de Brassard pour maintenir la forme tridimensionnelle de la lumière vasculaire. Cette section du parenchyme hépatique a été retirée après avoir terminé l’anastomose. Avec cette modification, l’étape impliquant le placement des sutures de séjour a été omise, ainsi encore raccourcir le temps d’anastomose de Brassard. En utilisant ce protocole de rat PLTx, un niveau faible d’enzymes hépatiques, une architecture lobulaire du foie intacte et un taux de survie élevé ont été réalisées après la microchirurgie.
Introduction
Actuellement, il y a un grand écart entre le nombre d’organes foie donnés et le nombre de patients en attente d’un foie donné. La pénurie d’organes foie est un problème mondial. Pour élargir le vivier de donateurs, les fractionner une transplantation hépatique (LTx) et donneur vivant LTx ont été développés pour servir un foie partielle un greffon1.
Afin d’étudier le mécanisme derrière une transplantation hépatique partielle (PLTx), modèles animaux pertinents ont été établis2,3,4,5. Chez le rat PLTx, les lobes du foie sont réséqués in vivo et ex vivo pour imiter les conditions du vivant du donateur LTx et diviser LTx, respectivement, chez les humains. Un article publié dans Journal of Visualized Experiments a présenté un protocole détaillé mettant en cause un rat 50 % PLTx utilisant un ex vivo hépatectomie5. Toutefois, un rat PLTx avec une hépatectomie en vivo n’a pas encore été signalé dans la littérature visualisée.
En plus de la différence entre hepatectomies in vivo et ex vivo , la technique d’effectuer une hépatectomie lui-même joue également un rôle important en déterminant les résultats de PLTx. actuellement, dans de nombreuses études chirurgicales utilisant le rat PTLx modèle, le foie lobes étaient réséqués après avoir placé une ligature simple au pédicule du lobe hépatique2,3,6,7,8,9. Toutefois, placer une ligature simple avant la résection n’est pas appropriée pour tous les lobes du foie, comme différents lobes du foie ont différentes formes et tailles. Une ligature simple à la base du lobe médian comporte un risque élevé de provoquer un rétrécissement de la veine cave, qui pourrait finalement affecter l’écoulement du greffon hépatique partielle10,11. Par conséquent, une mise à jour hépatectomie technique basée sur la connaissance de l’anatomie hépatique de rat est requise dans le domaine du rat PTLx.
Dans le protocole décrit dans cette étude, une hépatectomie mise à jour de 70 % axées sur le navire fut incorporée dans la procédure du rat PLTx. Les veines et les artères hépatiques du lobe latéral gauche (LLL) et lobe médian (ML) ont été disséquées et répartis individuellement avant l’enlèvement du parenchyme hépatique. Ensuite, les veines hépatiques de la LLL et ML ont été ligaturés en perçant les sutures. En utilisant des trompes individuelles et multiples sutures piercing plutôt que de placer une ligature simple, le moignon de vestige de la ML était capable de se répandre sur la veine cave. Par conséquent, la constriction de la veine cave infrahepatic causée par une ligature chirurgicale a été évitée. En outre, l’occlusion de l’approvisionnement en sang de la LLL et ML par des trompes individuels avant l’enlèvement du parenchyme hépatique diminue le taux de saignement dans le moignon de vestige du foie, réduisant ainsi l’influence de la perte de sang sur les expériences de11.
Pour microchirurgiens, c’est un défi important pour reconstruire l’artère hépatique approprié (PHA) d’une greffe du foie à cause de l’extrêmement petit diamètre de ce navire. Bien que la question de savoir si les re-arterialization en LTx est vraiment nécessaire est en cours de débat12,13,14, nombreuses techniques microchirurgicales pour la reconstruction de l’artère hépatique ont été proposées14 . Ici, nous présentons une nouvelle technique pour re-arterialization de la greffe du foie, qui rejoint l’artère hépatique commune (CHA) la PHA élargie d’une manière d’extrémité à l’autre. En utilisant cette technique d’extrémité à l’autre, deux artères hépatiques sont connectés avec une anastomose d’un diamètre plus grand. Plus le diamètre de l’anastomose est, la suture de main plus facile consiste à effectuer, et devient plus de l’amélioration de la perméabilité de l’anastomose.
Protocol
Representative Results
Discussion
Rat PLTx est une procédure microchirurgicale sophistiquée avec un programme de formation qui est riche en coût et longue durée20. La complexité du rat PLTx protocole a empêché les chercheurs d’utiliser ce modèle animal. Par rapport à la pleine grandeur rat LTx, rat PLTx présente le microsurgeon non seulement avec le défi d’une procédure de transplantation, mais aussi avec le défi de la résection hépatique dans un petit animal. Un protocole de microchirurgie visualisé décrivant…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche a été financée par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (Grant no 81501382) et Zhejiang Provincial Fondation de sciences naturelles de Chine (Grant No. LQ13H100003 et LQ16H100002).
Materials
| Surgical microscope | Möller-Wedel, Germany | 654359 | |
| Light source | OSRAM (China) Lighting Co., Ltd | 64627 | |
| Isoflurane Vaporizer | MIDMARK Corporation | VIP3000 | |
| Isoflurane | Baxter Healthcare Corporation | 40032609 | For Inhalation anesthesia |
| Normal Saline | Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. | 716092103 | |
| Povidone Iodine Solution | HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL | H33021567 | For disinfection |
| Hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J31020 | |
| Surgical scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | JC2116 | |
| Needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J32030 | |
| Dressing Forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J42020 | |
| Mosquito hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40340 | For liver resection; For retracting the stay sutures. |
| Micro-scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA1040 | |
| Micro needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA2060 | |
| Curved micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3061 | |
| straight micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3060 | |
| Micro hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3020 | |
| Bulldog clamp | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | XEC350 | |
| Vessel clamps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40160 | |
| Micro Serrefine-curved | Fine Science Tools, Inc | 18055-05 | |
| Dacryosyrinx | Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. | 5# curve | Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen |
| Sterilized gauze swabs | Fuqing Health & Integral Medical | 20230R | |
| 5mL syringe | Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd | 811932416 | |
| 18G needles | Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd | 01-014 | For fixing the upper abdomen wall |
| Intima II 22G intraveous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 383207y | For making biliary stent; For infusing perfusate |
| 7-0 polypropylene sutures | Ningbo Medical Needle Co., Ltd | 151026 | For SHVC anastomsis |
| 6-0 silk suture | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 2650182 | For ligation |
| Culture dish (100mm) | Corning Incorporated | 430165 | used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. |
| Culture dish (30 mm) | Corning Incorporated | 3296 | As a vessel for organ preservation |
| Angiocath 12G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382277 | For making a IHVC cuff |
| Angiocath 14G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382269 | For making a PV cuff |
| Buprenorphine (hydrochloride) | Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd | H12020275 | For analgesic |
| Cefuroxime sodium for injection | Esseti FarmaceuticiS.r.l | H20160013 | As an antibiotics |
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