Trans-Tympanic ilaç dağıtım ototoksisite tedavisi için
Summary
Biz bir teknik trans-tympanic rota üzerinden uyuşturucu yerelleştirilmiş yönetim koklea içine için mevcut. Bu rota üzerinden ilaç dağıtım gibi sisplatin kemoterapi ilaçların anti-kanser etkinliği ile müdahale olmaz.
Abstract
Sistemik yönetim ototoksisite ilaçla tedavi etmek için koruyucu ajanlar bu koruyucu ajanlar ile birincil ilaçların etkinliğini kemoterapötik engelleyebilir imkanı ile sınırlıdır. Bu, özellikle antikanser eylemlerini işitme kaybına karşı yeterli koruma sağlamak Antioksidanlar tarafından zayıflatılmış uyuşturucu sisplatin için geçerlidir. Diğer mevcut ya da potansiyel otoprotective temsilcileri benzer bir sorun, sistemik yönetilen doğuracak. Koklea doğrudan çeşitli biyolojik madde veya koruyucu uygulamayı yerel olarak sınırlı sistemik yan etkileri ile bu ajanların yüksek düzeyleri için izin vermez. Bu raporda, çeşitli uyuşturucu veya biyolojik reaktifler teslimat için temel bilim araştırma koklea geliştirmek ve otoprotective ajanlar kliniklerde kullanımını yönlendiren basit bir yol sağlar koklea, trans-tympanic bir yöntemi göstermektedir. Bu rapor trans-tympanic ilaç dağıtım yöntemi ayrıntıları ve nasıl bu tekniği başarıyla deneysel hayvanlarda sisplatin ototoksisite tedavisinde kullanılmaya başlanmıştır kullanım örnekleri sağlar.
Introduction
Periferik işitme sisteminin zarif sisplatin ve aminoglikosite antibiyotik gibi ilaçlar duyarlıdır. Sisplatin solid tümör, yumurtalık, testis ve baş gibi çeşitli tedavisinde yaygın olarak kullanılan bir kemoterapötik ajan olduğunu ve boyun kanserleri. Bu ilaç kullanımı ile deneyimli ototoksisite doz-sınırlayıcı olduğunu ve oldukça yaygın, hastaların % 75-100 etkileyen1ele. Carboplatin ve oxaliplatin’i, gibi diğer ilaçlar sisplatin2,3,4,5alternatif olarak ortaya çıkmıştır, ama bazı kanserler için onların yararlılığı sınırlıdır.
Erken çalışmalar Reaktif oksijen türleri (ROS) kritik rolü sisplatin ve aminoglikozitler tarafından üretilen ototoksisite arabuluculuk göstermiştir. Sonraki çalışmalarda NADPH oksidaz NOX3 izoformu ROS birincil kaynak koklea içinde ve sisplatin6,7tarafından aktif gösterdi. ROS tavizler nesil hücreler lider, kapasiteli tampon antioksidan lipid peroksidasyon hücresel zarları8arttı. Ayrıca, sisplatin yüksek derecede toksik aldehid 4-hydroxynonenal (4-HNE), hücre ölüm9,10başlatıcı oluşturmak hidroksil radikalleri üretimi artar. Bu bulgulara dayanarak, birkaç antioksidanlar sisplatin ototoksisite tedavisi için inceledik. Bu N-asetil sistein (NAC), sodyum thiosulfate (STS), amifostine ve D-metionin içerir. Ancak, antioksidan tedavinin asıl ilgilendiği temel konu bu antioksidanlar sistemik11 sisplatin thiol gruplar halinde antioksidan molekülleri ile etkileşimi aracılığıyla yönetilen zaman sisplatin kemoterapi etkinliğini azaltabilir olduğunu.
Antioksidan tedavisi ile bu sorunların içinde görüş-in bu çalışmanın hedefi, antioksidanlar ve diğer uyuşturucular işitme kaybı azaltmak için koklea teslim etme trans-tympanic rota incelemek için oldu. Uyuşturucu ve kısa (SI) RNA, aşağıda açıklanan engel trans-tympanic güzergahı özellikle umut verici görünüyor.
Protocol
Representative Results
Discussion
Aksi takdirde önemli sistemik yan sistemik yönetilen etkiler üretmek olabilir koklea yerelleştirilmiş teslim edilmesi, uyuşturucu ve diğer aracıları için trans-tympanic yönetim yolu sağlar. Bu yöntemi ilaç idaresi, sistemik yönlendirme yolu elde daha anlamlı olarak daha yüksek dozda uyuşturucu eylem siteye hızlı erişim sağlar. Burada sunulan ve yayınlanan sonuçları daha önce gösterdi [R] – N – fenil izopropil adenozin, trans-tympanic o Yönetimi (R-PIA) koklea sisplatin kaynak…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu makalede açıklanan çalışma ncı RO1 CA166907, NIDCD RO1-DC 002396 ve RO3 DC011621 tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Ketathesia (100 mg/ml) 10 ml | Henry Schein | 56344 | Controlled substance |
| AnaSed Injection/Xylazine (20 mg/ml) 20 ml | Henry Schein | 33197 | |
| 2.5 mm disposable ear specula | Welch Allyn | 52432 | |
| Surgical Scope | Zeiss | ||
| 29 G X 1/2 insulin syringe | Fisher Scientific | 14-841-32 | Can be purchased through other vendors |
| cis-Diammineplatinum(II) dichloride | Sigma Aldrich | P4394 | TOXIC – wear proper PPE |
| Harvard 50-7103 Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | Series 863 | |
| Excel International 21 G X 3/4 butterfly needle | Fisher | 14-840-34 | Can be purchased through other vendors |
| BSP Single Speed Syringe Pump | Brain Tree Sci, Inc | BSP-99 | |
| Pulse Sound Measurement System | Bruel & Kjaer | Pulse 13 software | |
| High-Frequency Module | Bruel & Kjaer | 3560C | |
| 1/8″ Pressure-field Microphone —-Type 4138 | Bruel & Kjaer | bp2030 | |
| High Frequency Transducer | Intelligent Hearing System | M014600 | |
| Opti-Amp Power Transmitter | Intelligent Hearing System | M013010P | |
| SmartEP ABR System | Intelligent Hearing System | M011110 | |
| Disposable Subdermal EEG Electrodes | CareFusion | 019-409700 | |
| 16% Formaldehyde, Methanol-free | Fisher Scientific | 28908 | TOXIC – wear proper PPE |
| 7 mL Borosilicate Glass Scintillation Vial | Fisher Scientific | 03-337-26 | Can be purchased through other vendors |
| EDTA | Fisher Scientific | BP118-500 | Can be purchased through other vendors |
| Sucrose | Fisher Scientific | S5-500 | Can be purchased through other vendors |
| Tissue Plus OCT Compound | Fisher Scientific | 4585 | |
| CryoMolds (15 mm x 15 mm x 5mm) | Fisher Scientific | 22-363-553 | Can be purchased through other vendors |
| Microscope Slides (25mm x 75mm) | MidSci | 1354W | Can be purchased through other vendors |
| Coverslips (22 x 22 x 1) | Fisher Scientific | 12-542-B | Can be purchased through other vendors |
| Poly-L-Lysine Solution (0.01%) | EMD Millipore | A-005-C | Can be purchased through other vendors |
| HM525 NX Cryostat | Thermo Fischer Scientific | 956640 | |
| MX35 Premier Disposable Low-Profile Microtome Blades | Thermo Fischer Scientific | 3052835 | |
| Wheaton™ Glass 20-Slide Staining Dish with Removable Rack | Fisher Scientific | 08-812 | |
| Super Pap Pen Liquid Blocker | Ted Pella, Inc. | 22309 | |
| Normal Donkey Serum | Jackson Immuno Research | 017-000-121 | Can be purchased through other vendors |
| TritonX-100 | Acros | 21568 | Can be purchased through other vendors |
| BSA | Sigma Aldrich | A7906 | Can be purchased through other vendors |
| Phospho-Stat1 (Ser727) antibody | Cell Signaling | 9177 | |
| VR1 Antibody (C-15) | Santa Cruz | sc-12503 | |
| DyLight 488 Donkey anti Rabbit | Jackson Immuno Research | 711-485-152 | Discontinued |
| DyLight 488 Donkey anti Goat | Jackson Immuno Research | 705-485-003 | Discontinued |
| Rhodamine (TRTIC) Donkey anti Rabbit | Jackson Immuno Research | 711-025-152 | Discontinued |
| ProLong® Diamond Antifade Mountant w/ DAPI | Thermo Fisher | P36971 | |
| (−)-N6-(2-Phenylisopropyl)adenosine | Sigma Aldrich | P4532 | |
| 8-Cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine | Sigma Aldrich | C101 | |
| siRNA pSTAT1 | Qiagen | Custome Made | Kaur et al. 201120 |
| siRNA NOX3 | Qiagen | Custome Made | Kaur et al. 201120 |
| Scrambled Negative Control siRNA | Qiagen | 1022076 | Kaur et al. 201120 |
References
- McKeage, M. J. Comparative adverse effect profiles of platinum drugs. Drug Saf. 13 (4), 228-244 (1995).
- Boulikas, T., Vougiouka, M. Cisplatin and platinum drugs at the molecular level. Oncol Rep. 10 (6), 1663-1682 (2003).
- Fouladi, M., et al. Phase II study of oxaliplatin in children with recurrent or refractory medulloblastoma, supratentorial primitive neuroectodermal tumors, and atypical teratoid rhabdoid tumors: a pediatric brain tumor consortium study. Cancer. 107 (9), 2291-2297 (2006).
- Pasetto, L. M., D’Andrea, M. R., Rossi, E., Monfardini, S. Oxaliplatin-related neurotoxicity: how and why. Crit Rev Oncol Hematol. 59 (2), 159-168 (2006).
- Ardizzoni, A., et al. Cisplatin- versus carboplatin-based chemotherapy in first-line treatment of advanced non-small-cell lung cancer: an individual patient data meta-analysis. J Natl Cancer Inst. 99 (11), 847-857 (2007).
- Banfi, B., Malgrange, B., Knisz, J., Steger, K., Dubois-Dauphin, M., Krause, K. H. NOX3, a superoxide-generating NADPH oxidase of the inner ear. J Biol Chem. 279 (44), 46065-46072 (2004).
- Mukherjea, D., Whitworth, C. A., Nandish, S., Dunaway, G. A., Rybak, L. P., Ramkumar, V. Expression of the kidney injury molecule 1 in the rat cochlea and induction by cisplatin. 신경과학. 139 (2), 733-740 (2006).
- Rybak, L. P., Husain, K., Morris, C., Whitworth, C., Somani, S. Effect of protective agents against cisplatin ototoxicity. Am J Otol. 21 (4), 513-520 (2000).
- Lee, J. E., et al. Role of reactive radicals in degeneration of the auditory system of mice following cisplatin treatment. Acta Otolaryngol. 124 (10), 1131-1135 (2004).
- Lee, J. E., et al. Mechanisms of apoptosis induced by cisplatin in marginal cells in mouse stria vascularis. ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 66 (3), 111-118 (2004).
- Lawenda, B. D., Kelly, K. M., Ladas, E. J., Sagar, S. M., Vickers, A., Blumberg, J. B. Should supplemental antioxidant administration be avoided during chemotherapy and radiation therapy. J Natl Cancer Inst. 100 (11), 773-783 (2008).
- Akil, O., Oursler, A. E., Fan, K., Lustig, L. R. Mouse auditory brainstem response testing. Bio Protoc. 6 (6), 1768 (2016).
- Montgomery, S. C., Cox, B. C. Whole Mount Dissection and Immunofluorescence of the Adult Mouse Cochlea. J. Vis. Exp. (107), e53561 (2016).
- Whitlon, D. S., Szakaly, R., Greiner, M. A. Cryoembedding and sectioning of cochleas for immunocytochemistry and in situ hybridization. Brain Res Brain Res Protoc. 6 (3), 159-166 (2001).
- Londos, C., Cooper, D. M., Wolff, J. Subclasses of external adenosine receptors. Proc Natl Acad Sci. 77 (5), 2551-2554 (1980).
- Lohse, M. J., Klotz, K. N., Lindenborn-Fotinos, J., Reddington, M., Schwabe, U., Olsson, R. A. 8-Cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine (DPCPX)–a selective high affinity antagonist radioligand for A1 adenosine receptors. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 336 (2), 204-210 (1987).
- Rybak, L. P., Whitworth, C., Scott, V., Weberg, A. D., Bhardwaj, B. Rat as a potential model for hearing loss in biotinidase deficiency. Ann Otol Rhinol Laryngol. 100 (4), 294-300 (1991).
- Mukherjea, D., et al. NOX3 NADPH oxidase couples transient receptor potential vanilloid 1 to signal transducer and activator of transcription 1-mediated inflammation and hearing loss. Antioxid Redox Signal. 14 (6), 999-1010 (2011).
- Kaur, T., et al. Adenosine A1 receptor protects against cisplatin ototoxicity by suppressing the NOX3/STAT1 inflammatory pathway in the cochlea. J Neurosci. 36 (14), 3962-3977 (2016).
- Kaur, T., Mukherjea, D., Sheehan, K., Jajoo, S., Rybak, L. P., Ramkumar, V. Short interfering RNA against STAT1 attenuates cisplatin-induced ototoxicity in the rat by suppressing inflammation. Cell Death Dis. 2 (180), (2011).
