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방법 논문

사용 하 여 계통 발생 분석은 진 핵 유전자 원산지 조사

14.6K 조회수

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DOI:

10.3791/56684

⸱

2018년 8월 14일

 ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

순서 상 동 자의 진핵생물과 SemiSWEETs에서 prokaryotes에서에 따라 계통 발생 나무를 구성 하는 방법을 설명 합니다. 계통 발생 분석은 다른 유기 체 그룹에서 동종 단백질 또는 유전자 진화 relatedness를 설명 하는 유용한 도구.

초록

계통 발생 분석을 사용 하 여 뉴클레오티드 또는 아미노산 시퀀스 또는 다른 매개 변수를 도메인 시퀀스 등 3 차원 구조는 분자에서 다른 taxa (분류 단위) 사이 진화 관계를 표시 하는 트리를 구성 수준입니다. 계통 발생 분석 사용할 수 있습니다 개별 taxon, 내 도메인 관계 조사를 실질적인 받은 생물 형태학과 생리학, 하지만 어떤 연구자 부족으로 인해 화석 증거에 대 한 변경에 대 한 특히는 생물의 긴 진화 역사 또는 담았다의 부족.

이 텍스트는 계통 발생 방법, 아미노산 순서 정렬 Clustal 오메가, 그리고 둘 다 최대 가능성 (ML) 분자 진화 유전학의를 사용 하 여 후속 계통 발생 나무 건축을 사용 하 여를 사용 하 여에 대 한 자세한 프로토콜 설명 분석 (메가) 및 MrBayes 통해 베이지안 추론. 진 핵 설탕 것 이다 결국 수출 전송기 수 (달콤한) 유전자의 기원 조사, 228 과자 35 달콤한 단백질에서 단 세포 진핵생물과 원핵생물에서 57 약간 단 단백질을 포함 하 여 분석 되었다. 흥미롭게도, SemiSWEETs 원핵생물에서 찾아냈다 그러나 과자는 진핵생물에서 발견 됐다. 이론적으로 다른 방법을 사용 하 여 건설의 계통 발생 나무 2 개는 지속적으로 첫 번째 핵 달콤한 유전자 세균성 약간 단 유전자와 archaeal 약간 단 유전자의 융합에서 줄기 수 있습니다 제안 했다. 그것은 하나는 결론을 끌기 위해는 계통 발생 분석에만 기반으로 어렵거나 심지어 실험 방법을 통해 분별 하는 다른 taxa 사이의 기본 관계를 설명 하는 데 유용 하지만 신중 해야 지적 가치 .

서론

DNA 또는 RNA 순서 생리 및 생 화 확 적인 방법을 통해 분석 하거나 형태학 및 화석 증거를 통해 관찰 될 수 있는 기본 고기에 대 한 유전 정보를가지고. 의미에서 유전 정보 외부 고기 때문에 전자는 후자에 대 한 기초 평가 보다 더 안정적입니다. 진화 연구, 화석 증거에서는 매우 직접적이 고 설득력 있는입니다. 그러나, 미생물와 같은 많은 유기 체를 긴 지질 시대 화석 형성 작은 기회가 있다. 따라서, 뉴클레오티드 시퀀스 및 관련된 현존 생물에서 아미노산 시퀀스 등 분자 정보 진화 관계1을 탐험에 대 한 가치는 있습니다. 현재 연구에서 기본적인 계통 발생 지식과 배우기 쉬운 프로토콜의 간단한 소개 자신의 계통 발생 나무를 구성 하는 이민자를 위한 제공 했다.

동종 유전자, 세포, 또는 심지어 유기2계통 발생 관계를 추론 (뉴클레오티드) DNA와 단백질 (아미노산) 시퀀스를 사용할 수 있습니다. DNA 시퀀스 동안 진화 변화에 의해 영향을 받을 가능성이 더 높습니다. 대조적으로, 아미노산 시퀀스는 훨씬 더 안정 주어진 뉴클레오티드 시퀀스에 동의어 돌연변이 아미노산 시퀀스에서 돌연변이 발생 하지 않습니다. 그 결과, DNA 시퀀스는 반면 아미노산 시퀀스는....

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프로토콜

1. 시퀀스 정렬

  1. 진 핵 정하고 별도 문서에 간결한 SemiSWEET의 아미노산 시퀀스를 수집 하 고 FASTA 형태로 그들을 나열. 유사성 검색 기본 로컬 맞춤 검색 도구 (폭발) 도구를 사용 하 여 생명 공학 정보 (NCBI), 유럽 분자 생물학 실험실 (EMBL), 및 일본 (DDBJ) 데이터베이스의 DNA 데이터 은행에 대 한 국립 센터에서 시퀀스 다운로드.
    1. 예제 파일에서 진핵생물과 원핵생물의 단일 MtN3/타 액 도메인 (3 막 횡단 나선)를 소지 하는 57 약간 단 단백질 시퀀스의 두 MtN3/타 액 도메인 (7 막 횡단 나선)를 소지 하는 228 putative 달콤한 단백질 시퀀스를 수집 13.
    2. 프로세스를 단순화 하려면 계통 발생 나무 건축을 위해 228 putative 과자 중 단 세포 진 핵 생물에서 35 후보 달콤한 단백질을 선택 합니다. 이러한 시퀀스는 독자가 실제 데이터 세트에 연습 수 있도록 연결 됩니다.
  2. 35 달콤한 시퀀스 정렬 Clustal 오메가 (http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/)으로 그들을 입력 하 여.

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결과

계통 발생 나무 35 달콤한 시퀀스의 첫 번째 MtN3/타 액 도메인의 모든 한 clade와 다른 clade로 클러스터 달콤한 시퀀스의 두 번째 MtN3/타 액 도메인으로 클러스터를 표시 합니다. 또한, 과자 및 SemiSWEETs의 정렬 결과 표시 일부 SemiSWEETs α-Proteobacteria에서 달콤한 시퀀스의 첫 번째 MtN3/타 액 도메인으로 정렬 SemiSWEETs Methanobacteria (archaea)에서 두 번째 MtN3/타 액과 정렬 하는 반면 달콤한 시퀀스의 도메인입니다. 이 결과 함께 과자 포함 된 두 개의 MtN3/타 액 도메인 archaeon14와 세균성 SemiSWEET의 진화 융합에서 파생 될 수 있습니다 것이 좋습니다.

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토론

그것은 뉴클레오티드 또는 아미노산 시퀀스8에 따라 계통 발생 나무를 만들기 위해 생물 학적 연구에 점점 더 인기 끌고있다. 일반적으로, 시퀀스 정렬, 계통 발생 나무 계산 결과의 시각화 및 적당 한 방법 또는 알고리즘, 정렬 된 시퀀스의 평가 포함 하는 실천의 세 가지 중요 한 단계가 있습니다. 제시 연구에서 열 정렬의 3 라운드 실시 했다: 첫째, 첫 번째 및 두 번째 MtN3/타 액 도메인을 포함 하 여 감 미로 운 단백질 시퀀스 정렬 했다; 둘째, 각각의 독립적인 taxon로 과자 개별 MtN3/타 액 도메인 시퀀스는 수집 되었고 정렬 함께; 그리고 마지막으로, 약간 단 시퀀스와 달콤한 시퀀스 공동으로 정렬 했다. Phylogenic 트리 건설 순서 줄 맞춤의 한 라운드 일반적으로 필요 합니다.

예비 단계에서 동종 시퀀스 NCBI 또는 다른 데이터베이스에서 다운로드할 수 있습니다. 이러한 다운로드 한 시퀀스 잘 주석 하지 경우 상영.......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

이 작품은 국립 자연 과학 재단의 중국 (31371596), 바이오 기술 연구 센터, 중국 3 협곡 대학 (2016KBC04), 그리고 장쑤 성, 중국 (BK20151424)의 자연 과학 재단에 의해 지원 되었다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Adobe Illustration, Adobe Systems Software Ireland Ltd.에서 개발한 그래픽 도구, Copyright © 2017
BioEdit, Windows 95/98/NT/2000/XP/7용으로 작성된 생물학적 시퀀스 정렬 편집기. 저작권 © Tom Hall
Clustal Omega는 아미노산 또는 뉴클레오티드 서열의 다중 서열 정렬을 위한 패키지입니다.  http://www.clustal.org/
CorelDRAW는 그래픽 디자인 소프트웨어입니다. 저작권 © 2017 Corel Corporation
, FigTree, 에든버러 대학교에서 설계한 계통수 그래픽 뷰어
MEGAMolecularEvolutionary Genetics Analysis version6.0
http://www.megasoftware.net/home MrBayes, 베이지안 계통발생 추론 도구
NVIDIA회사는 게임 및 전문 시장을 위한 그래픽 처리 장치(GPU)를 설계합니다. 법인 저작권 및 사본; 2017
PAUPParsimony를 사용한 계통 발생 분석. David Swofford의 프로그램은 여러 뉴클레오티드 모델에서 최대우도법을 구현합니다.
Photoshop, Adobe Systems Software Ireland Ltd.에서 개발 및 게시 한 래스터 그래픽 편집기 Copyright © 2017
RHYTHM헤킥스 연락처에 대한 지식 기반 예측. 자릿&에큐트; 베를린 – Protein Formatics Group - Copyright 2007-2009
TMHMM단백질의 막관통 나선을 예측하기 위한 도구. http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/
Compter4GB 메모리, Core 2 이상 CPU. 윈도우 7, 윈도우 10
, , ,

참고문헌

  1. Nei, M., Kumar, S. Molecular Evolution and Phylogenetics. , Oxford University Press. Oxford. (2000).
  2. Foth, B. J. Phylogenetic analysis to uncover organellar origins of nuclear-encoded genes. Methods Mol Biol. 390, 467-488 (2007).
  3. Baldauf, S. L.

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