मैट्रिक्स के लिए एक प्रोटोकॉल की सहायता से लेजर desorption उड़ान मास स्पेक्ट्रोमेट्री के ionization समय (मालदी-तोफ एमएस) सिंथेटिक पॉलिमर के लक्षण वर्णन नमूना तैयारी, वर्णक्रम अधिग्रहण, और डेटा विश्लेषण के अनुकूलन सहित वर्णित है ।
वहां कई तकनीकों है कि सिंथेटिक homopolymers के लक्षण वर्णन में नियोजित किया जा सकता है, लेकिन कुछ के रूप में मैट्रिक्स के रूप में अंत में समूह विश्लेषण के लिए जानकारी के उपयोगी प्रदान-लेजर desorption ionization उड़ान मास स्पेक्ट्रोमेट्री (मालदी-तोफ MS) के समय की मदद की । इस ट्यूटोरियल नमूना तैयारी के अनुकूलन के लिए तरीकों को दर्शाता है, वर्णक्रमीय अधिग्रहण, और मालदी का उपयोग सिंथेटिक पॉलिमर के डेटा विश्लेषण–तोफ नमूना तैयारी के दौरान MS महत्वपूर्ण पैरामीटर मैट्रिक्स के चयन में शामिल हैं, एक उचित cationization नमक की पहचान, और मैट्रिक्स, कटियन, और analyte के सापेक्ष अनुपात ट्यूनिंग । इस तरह के मोड के रूप में अधिग्रहण मापदंडों (रैखिक या रिफ्लेक्टर), ध्रुवीकरण (सकारात्मक या नकारात्मक), त्वरण वोल्टेज, और देरी समय भी महत्वपूर्ण हैं । इस बहुलक को संश्लेषित करने और दोनों डेटा अधिग्रहण मानकों और नमूना तैयारी की स्थिति को अनुकूलित करने के लिए शामिल रसायन विज्ञान के कुछ ज्ञान को देखते हुए, स्पेक्ट्रा स्पष्ट करने के लिए सक्षम करने के लिए पर्याप्त संकल्प और बड़े पैमाने पर सटीकता के साथ प्राप्त किया जाना चाहिए सबसे homopolymers के अंत समूहों का निर्धारण (१०,००० नीचे जनता) दोहराने इकाई द्रव्यमान और समग्र आणविक वजन वितरण के अलावा । हालांकि पॉलिमर के एक सीमित सेट पर प्रदर्शन किया, इन सामांय तकनीक बड़े पैमाने पर वितरण का निर्धारण करने के लिए सिंथेटिक पॉलिमर की एक बहुत व्यापक रेंज के लिए लागू कर रहे हैं, हालांकि अंत समूह दृढ़ संकल्प संकीर्ण फैलाव के साथ homopolymers के लिए ही संभव है ।
बहुलकीकरण तकनीकों के रहने में सुधार के साथ, मात्रात्मक रूप से कार्यात्मक अंत समूहों के साथ परिशुद्धता पॉलिमर तेजी से उपलब्ध है1। azide के समवर्ती विकास-alkyne और thiolene क्लिक करें chemistries अंय अणुओं के लिए moieties के लगभग मात्रात्मक युग्मन सक्षम है, संकर सामग्री2,3,4 की एक सीमा तक पहुंच प्रदान . हालांकि, सटीक विश्लेषणात्मक तकनीक दोनों प्रारंभिक सामग्री और इन बहुलक विकार प्रतिक्रियाओं के उत्पादों को चिह्नित करने के लिए आवश्यक हैं । मैट्रिक्स-असिस्टेड लेजर desorption/उड़ान मास स्पेक्ट्रोमेट्री के ionization समय (मालदी-तोफ एमएस) ionization पॉलिमर के लिए एक मूल्यवान नरम निस्र्पक विश्लेषणात्मक तकनीक है, क्योंकि यह न्यूनतम के साथ एक भी आरोप राज्य में बहुलक आयनों उत्पन्न कर सकते हैं विखंडन5,6. मालदी-तोफ एमएस बहुलक लक्षण वर्णन के अंय पारंपरिक तरीकों पर प्रमुख लाभ है क्योंकि यह व्यक्ति n के संकल्प के साथ बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रा प्रदान कर सकते है बहुलक जन वितरण के भीतर mers । एक परिणाम के रूप में, इस तरह के बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रा औसत आणविक वजन, दोहराने इकाई द्रव्यमान के बारे में सटीक जानकारी प्रदान कर सकते हैं, और आणविक वजन फैलाव7, जो बारी में कर सकते हैं स्पष्ट प्रतिस्पर्धा बहुलकीकरण तंत्र ऐसी श्रृंखला 8 स्थानांतरण के रूप में . तथापि, मालदी-तोफ MS विशेष रूप से के बारे में जानकारी प्रदान करने के लिए बहुलक अंत समूह9,10, जो अंत समूह संशोधनों की पुष्टि करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है10,11 और अन्य ट्रांस्फ़ॉर्मेशन12 जैसे बहुलक cyclizations11,13. समान रूप से महत्वपूर्ण, analyte की अपेक्षाकृत छोटी राशि (उप माइक्रोग्राम) बड़े पैमाने पर spectrometric विश्लेषण के लिए आवश्यक इस तकनीक लक्षण वर्णन जब केवल सामग्री की मात्रा का पता लगाने के लिए उपयोगी बनाता है उपलब्ध हैं ।
मालदी-तोफ एमएस विश्लेषण पॉलिमर के चार अलग चरणों में विभाजित किया जा सकता: नमूना तैयारी, साधन अंशांकन, वर्णक्रमीय अधिग्रहण, और डेटा विश्लेषण. नमूना तैयारी अनुकूलित मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रा पैदा करने के लिए सबसे आवश्यक कदम है और नमूना साधन14,15में पेश किया जाता है से पहले होता है । बहुलक analyte के रूप में समान घुलनशीलता मानकों के साथ एक उचित मैट्रिक्स के चयन के लिए उच्च गुणवत्ता मालदी प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण है-तोफ मास स्पेक्ट्रा और मैट्रिक्स चयन के लिए दिशानिर्देश14,15अन्यत्र सूचना दी गई है, 16,17. नमूना तैयार करने के लिए बहुलक मालदी “व्यंजनों” का एक डाटाबेस भी ऑनलाइन18प्रकाशित किया गया है । उपंयास पॉलिमर के लिए, मैट्रिक्स चयन सबसे पहले बहुलक के घुलनशीलता को समझने और समान घुलनशीलता पैरामीटर14,19के साथ एक मैट्रिक्स का चयन करके संपर्क किया जा सकता है । उच्च प्रोटॉन संबध के साथ पॉलिमर सबसे मैट्रिक्स14 द्वारा protonated जा सकता है (जो अक्सर carboxylic एसिड समूह होते हैं), लेकिन अन्य पॉलिमर के लिए, एक cationization एजेंट14की आवश्यकता है । क्षार आयनों ऑक्सीजन युक्त प्रजातियों (जैसेपॉलिएस्टर और polyethers) के साथ अच्छी तरह से adduct, जबकि unसंतृप्त हाइड्रोकार्बन (जैसेpolystyrene) चांदी और तांबा आयनों14जैसे संक्रमण धातुओं के साथ adduct, 19. क्योंकि इस प्रयोग में बहुलक नमूनों में ऑक्सीजन परमाणुओं को रीढ़ में निहित, सोडियम या पोटेशियम trifluoroacetate (TFA) cationization एजेंट के रूप में इस्तेमाल किया गया । एक बार मैट्रिक्स और cationization एजेंटों का चयन किया गया है, analyte के सापेक्ष अनुपात, कटियन एजेंट, और मैट्रिक्स सावधानी से शोर करने के लिए उच्च संकेत सुनिश्चित करने के लिए अनुकूलित किया जाना चाहिए । इस कार्यविधि में, नमूना तैयारी के लिए पैरामीटर पहले से ही ऑप्टिमाइज़ किया गया है, हालांकि एक अनुभवजंय नमूना ऑप्टिमाइज़ेशन प्रक्रिया (चरण 1.4.1., आरेख 1) जो व्यवस्थित रूप से तीन घटकों की सांद्रता बदलता है (analyte, मैट्रिक्स और कटियन) तेजी से अपने इष्टतम अनुपात का निर्धारण करने के लिए प्रभावी है ।
डेटा अधिग्रहण भी मापदंडों के एक नंबर के अनुकूलन की आवश्यकता है । सबसे महत्वपूर्ण मापदंडों स्पेक्ट्रोमीटर, साधन आपरेशन मोड (रैखिक बनाम रिफ्लेक्टर), त्वरण वोल्टेज, और निष्कर्षण देरी समय के सकारात्मक या नकारात्मक आयन मोड शामिल हैं । एक और तरीका है कि संकल्प को बढ़ाया जा सकता है “reflectron” मोड20,21,22,23के उपयोग के माध्यम से है । Reflectron मोड मूलतः उड़ान ट्यूब के अंत में आयनों को प्रतिबिंबित करने से डिटेक्टर के उड़ान पथ युगल स्रोत के पास एक डिटेक्टर की ओर वापस जबकि अलग गति के साथ आयनों refocusing, और इसलिए हालांकि संकल्प में वृद्धि सिग्नल की शक्ति को कम. इसके अलावा, उच्च संकल्प स्पेक्ट्रा लेजर शक्ति है जो संख्या और collisions की ऊर्जा कम और इसलिए विखंडन और काइनेटिक सजातीयता को कम करने से संकेत-शोर अनुपात को कम करके प्राप्त किया जा सकता24। इन मापदंडों के सभी ट्यूनिंग द्वारा, आयनों प्रारंभिक स्थिति या वेग है कि लेजर desorption प्रक्रिया के दौरान होता है में किसी भी सजातीयता के प्रभाव को कम करने के लिए ध्यान केंद्रित किया जा सकता है । जब अधिग्रहण मानकों को अनुकूलित कर रहे हैं, isotopic संकल्प अक्सर १०,००० दा से अधिक में जनता के साथ आयनों के लिए प्राप्त किया जा सकता है, हालांकि इस उड़ान ट्यूब और साधन डिजाइन की लंबाई पर भी निर्भर है । सबसे कार्बनिक यौगिकों कि कम से एक heteroatom होते है जैसे लिथियम, सोडियम, और पोटेशियम के रूप में क्षार cations के साथ जटिल करने के लिए प्रवण हैं । क्षार धातुओं के कई monoisotopes या सीमित आइसोटोप के होते हैं और इसलिए वितरण व्यापक नहीं है.
जबकि साधन मापदंडों डेटा परिशुद्धता का अनुकूलन करने के लिए देखते किया जा सकता है, डेटा सटीकता केवल एक उपयुक्त अंशांकन11के साथ हासिल की है. प्रोटीन और पेप्टाइड्स मूल रूप से उनके monodispersity और उपलब्धता के कारण calibrants के रूप में इस्तेमाल किया गया है, लेकिन चर स्थिरता और दोष25के प्रसार से पीड़ित हैं । अधिक लागत प्रभावी और स्थिर विकल्प अकार्बनिक समूहों और polydisperse पॉलिमर26,27,28,29शामिल हैं । दुर्भाग्य से, इन विकल्पों की सुविधा आम जनता, जो बड़े पैमाने पर कार्य जटिल, साथ ही साथ छोटे आम जनता फैलाने, उंहें केवल १०,००० डा नीचे अंशांकन के लिए उपयोगी बना । इन मुद्दों का मुकाबला करने के लिए Grayson एट अल. 25 एक dendrimer आधारित, पॉलिएस्टर एमएस अंशांकन प्रणाली है कि monodisperse है विकसित की है, और दोनों व्यापक मैट्रिक्स और विलायक संगतता, शेल्फ जीवन स्थिरता (> 8 साल) समेटे हुए है, और कम उत्पादन लागत । इस प्रणाली की ताकत पर आधारित है, यह इन प्रयोगों के लिए calibrant के रूप में चुना गया था ।
वहाँ अंशांकन के दो मुख्य प्रकार हैं: आंतरिक और बाहरी30. जब बाह्य औजार, आम जनता के साथ एक मानक है कि ब्रैकेट analyte के मालदी लक्ष्य प्लेट पर analyte से एक अलग नमूना स्थिति में रखा जाता है जिसमें से एक अंशांकन फ़ाइल उत्पन्न किया जा सकता एक अलग जन स्पेक्ट्रम उत्पन्न करने के लिए. दूसरी ओर, सटीकता में वृद्धि अक्सर एक आंतरिक अंशांकन, जो दोनों calibrant और analyte संकेतों के साथ एक संकर स्पेक्ट्रम प्राप्त करने के लिए analyte के साथ calibrant मिश्रण शामिल है के साथ प्राप्त किया जा सकता है । नीचे वर्णित कार्यविधि में, एक बाहरी अंशांकन लागू किया गया था । जन पैमाने के उचित अंशांकन के बाद, सटीक analyte जन डेटा प्राप्त किया जा सकता है । सबसे सटीक अंशांकन सुनिश्चित करने के लिए, यह महत्वपूर्ण है कि डेटा प्राप्ति अंशांकन के बाद जल्द ही होता है ।
अंत में, एक बार अनुकूलित, नपेed डेटा सेट प्राप्त कर रहे थे, और डेटा बहुलक नमूनों के बारे में संरचनात्मक जानकारी प्रदान करने के लिए विश्लेषण किया गया । बहुलक वितरण के भीतर n-mers के बीच की रिक्ति दोहराई जाने वाली इकाई द्रव्यमान का सटीक माप प्रदान कर सकती है । संख्या औसत आणविक भार (एमएन) और अन्य जन वितरण गणना (जैसे, एमडब्ल्यू (वजन औसत आणविक भार) और Đ (फैलाव)) भी मास स्पेक्ट्रा में संकेत वितरण से निर्धारित किया जा सकता ( गणना के लिए ४.२ कदम) । शायद सबसे विशिष्ट, homopolymers के मामले में, अंत समूह जनता की राशि अकेले दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान के संबंध में बहुलक वितरण की ऑफसेट निर्धारित करने से पुष्टि की जा सकती है । । जानकारी संपंन मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रा मूल्यवान लक्षणीय डेटा है कि और अधिक पारंपरिक बहुलक लक्षणीय तकनीकों जैसे आकार अपवर्जन क्रोमैटोग्राफी, रूपान्तर-बदलने अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी के पूरक है प्रदान करते हैं, और परमाणु चुंबकीय अनुनाद ।
मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रोमेट्री की वजह से अपनी क्षमता का बहुलक लक्षण वर्णन के लिए एक अमूल्य विश्लेषणात्मक उपकरण के लिए अकेले आरोप लगाया राज्य में बहुलक आयनों पैदा करने के लिए और ंयूनतम विखंडन के साथ है । इस नरम ionization तकनीक लघु लेजर दालों का इस्तेमाल करने के लिए ठोस desorb बहुलक analyte के राज्य के नमूनों में एंबेडेड एक मैट्रिक्स यौगिक गैस चरण में बहुलक आयनों उत्पंन करने के लिए । अणुओं आम तौर पर cations कि मैट्रिक्स में शामिल करने के लिए जन स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा उनके विश्लेषण को सक्षम कर रहे है के साथ रंग से जुड़े हैं । इन macromolecular आयनों तो एक निष्कर्षण वोल्टेज से त्वरित कर रहे हैं उन्हें क्षेत्र में लाने के लिए उड़ान ट्यूब जो उनके एम/जेड सक्षम कर सकते हैं के लिए अपने समय के आधार पर निर्धारित किया जा सकता है के क्षेत्र में मुक्त-उड़ान आयन स्रोत और डिटेक्टर के बीच5 , ३२.
अन्य बहुलक लक्षणीय तकनीक की तुलना में, मालदी-तोफ एमएस स्पेक्ट्रा गुणवत्ता भारी डेटा अधिग्रहण मापदंडों और नमूना तैयारी पर निर्भर है । हालांकि नमूना तैयारी के लिए कोई फार्मूला सेट है, नमूना तैयारी के प्रत्येक घटक के समारोह को समझने और अधिक तेजी से अनुभवजंय अनुकूलन के लिए अनुमति देता है । मालदी नमूना तैयारी में सबसे महत्वपूर्ण कारक मैट्रिक्स का चयन है क्योंकि बहुलक analyte के साथ मैट्रिक्स की अनुकूलता उत्तेजित मैट्रिक्स की अनुमति देने के लिए महत्वपूर्ण है एकल, desorbed अणुओं में एक के5राज्य, 15,17,19. एक बार उपयुक्त मैट्रिक्स और cationization एजेंटों का चयन किया गया है, analyte, मैट्रिक्स, और cationization एजेंट का सही अनुपात निर्धारित किया जाना चाहिए । यह नमूनों की एक दो आयामी ग्रिड बनाने के द्वारा empirically प्राप्त किया जा सकता है (चित्रा 1) मालदी पर-तोफ एमएस लक्ष्य प्लेट (चित्रा 2) एक धुरी पर बढ़ती मैट्रिक्स एकाग्रता और बढ़ती cationization एजेंट एकाग्रता के साथ अन्य.
मालदी नमूना तैयारी के समान, डेटा प्राप्ति पैरामीटर निर्धारित करने के लिए कोई सूत्र सेट नहीं है; हालांकि, कुछ प्रवृत्तियों वर्णक्रमीय अनुकूलन को तेज करने के लिए विचार किया जाना चाहिए । Reflectron मोड, जो संकल्प बढ़ जाती है, लेकिन समग्र संकेत घटाता है, आम तौर पर कम द्रव्यमान पर्वतमाला के लिए चुना है (इन उदाहरणों में, नीचे ४,००० Da) जहां isotopic संकल्प प्राप्त किया जा सकता है । इन मामलों में, monoisotopic मास परिकलन और पीक picking विधियों का उपयोग किया गया था । ४,००० दा ऊपर जनता के साथ बहुलक नमूनों के लिए, रैखिक मोड औसत द्रव्यमान गणना के साथ प्रयोग किया जाता था और उठा तरीकों नुकीला । संकेत संकल्प में सुधार करने के लिए, आयन स्रोत वोल्टेज छोटे वेतन वृद्धि में बड़े जन पॉलिमर एक बड़ा वोल्टेज अंतर होने के सामान्य प्रवृत्ति के साथ समायोजित किया जाना चाहिए (IS1 बनाम IS2).
जबकि अनुकूलित नमूना तैयारी और अधिग्रहण मापदंडों परिशुद्धता प्रदान कर सकते हैं, बड़े पैमाने पर सटीकता केवल प्रभावी अंशांकन के माध्यम से प्राप्त किया जा सकता है । समय की उड़ान के लिए एक दिया द्रव्यमान चर अधिग्रहण मापदंडों और यहां तक कि प्लेट पदों के लिए संमान के साथ आसानी से भिंन हो सकते हैं, इसलिए एक अंशांकन अनुकूलित अधिग्रहण मापदंडों के प्रत्येक सेट के लिए बाहर किया जाना चाहिए ताकि सही द्रव्यमान उपज के लिए निर्धारण५,३०. एक बार अधिग्रहण मापदंडों और नमूना तैयारी अनुकूलित किया गया है, स्पेक्ट्रा इन सटीक एक ही स्थिति का उपयोग कर नपेed किया जाना चाहिए ।
क्योंकि असाधारण संकल्प और बड़े पैमाने पर सटीकता की अनुकूलित मालदी में मनाया-बहुलक की तोफ मास स्पेक्ट्रा, इस तकनीक बहुलक जन वितरण डेटा का निर्धारण करने के लिए एक मूल्यवान मानार्थ उपकरण बन गया है । हालांकि, इसके लिए बहुलक जन वितरण के भीतर व्यक्तिगत दोहराने इकाइयों को हल करने की क्षमता अंत समूह ऐसे जेल permeation क्रोमैटोग्राफी (GPC) और परमाणु के रूप में अंय बहुलक लक्षण वर्णन तकनीकों के सापेक्ष विश्लेषण के लिए एक विशेष लाभ प्रदान करता है चुंबकीय अनुनाद (एनएमआर) । यह अंत समूह functionalization प्रतिक्रियाओं और अंत समूह conjugations प्रतिक्रियाओं की मात्रात्मक प्रकृति की निष्ठा का निर्धारण करने के लिए विशेष रूप से मूल्यवान है । इस पांडुलिपि को बड़े पैमाने पर सटीकता के दो दशमलव अंक के साथ व्यक्तिगत बहुलक दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान को हल करने की क्षमता का प्रदर्शन किया है, विश्वास के एक उच्च स्तर के साथ अंत समूह संशोधनों की पुष्टि को सक्षम करने । सटीक बहुलक संश्लेषण के क्षेत्र में हाल ही में किया गया है कि पर्याप्त अग्रिम के साथ, मालदी-तोफ एमएस macromolecular संरचना और कार्यक्षमता निर्धारित करने के लिए एक तेजी से महत्वपूर्ण उपकरण बनता जा रहा है.
The authors have nothing to disclose.
लेखक स्मार्ट सामग्री डिजाइन, विश्लेषण, और प्रसंस्करण कंसोर्टियम (SMATDAP) सहकारी समझौते आईआईए के तहत राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन द्वारा वित्त पोषित-१४३०२८० और ला बोर्ड रीजेंट्स के एक स्नातक फैलोशिप (एमईपी) के लिए स्वीकार करते हैं । इन प्रयोगों के लिए पॉलिमर के नमूने MilliporeSigma (सिग्मा-Aldrich) द्वारा प्रदान किए गए थे । ओपन एक्सेस इस लेख के प्रकाशन MilliporeSigma द्वारा प्रायोजित है ।
polyoxyethylene bis(azide) (Mn=2000) | MilliporeSigma (Aldrich) | 689696 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/689696?lang=en®ion=US |
poly(ethylene glycol) 2-amino-ethyl ether acetic acid (Mn= 5000) | MilliporeSigma (Aldrich) | 757918 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/757918?lang=en®ion=US |
poly(L-lactide), thiol terminated (Mn=2500) | MilliporeSigma (Aldrich) | 747386 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/747386?lang=en®ion=US |
SpheriCal® peptide low | MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) | PFS20 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs20?lang=en®ion=US |
SpheriCal® peptide medium | MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) | PFS21 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs21?lang=en®ion=US |
SpheriCal® peptide high | MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) | PFS22 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs22?lang=en®ion=US |
2,4 dinitrofluorobenzene | TCI | A5512 | |
maleimide | MilliporeSigma (Aldrich) | 129585 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/129585?lang=en®ion=US |
1-ethynylfluorobenzene | Fisher Scientific | 766-98-3 | |
triethylamine | MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) | 471283 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/471283?lang=en®ion=US |
N,N,N',N",N"-pentamethyldiethylenetriamine | MilliporeSigma (Aldrich) | 369497 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/369497?lang=en®ion=US |
Copper(I)Bromide | MilliporeSigma (Aldrich) | 254185 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/254185?lang=en®ion=US |
glacial acetic acid | Fisher Scientific | A38212 | |
sodium metabisulfite | MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) | 13459 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigald/13459?lang=en®ion=US |
potassium trifluoroacetate | MilliporeSigma (Aldrich) | 281883 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/281883?lang=en®ion=US |
trans-2-[3-(tert-butylphenyl)-2-methyl-2-properylidene]malononitrile | MilliporeSigma (Aldrich) | 727881 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/727881?lang=en®ion=US |
a-cyano-4-hydroxycinnamic acid | MilliporeSigma (Sigma) | C8982 | http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/c8982?lang=en®ion=US |
tetrahydrofuran | Fisher Scientific | T425-1 | |
dichloromethane | VWR Analytical | BDH1113-4LG |