אפיון והמודינמיקה פולשנית של התסמונת פורטל-יתר לחץ דם אצל חולדות זה קשה וחיוור.
Summary
כאן נתאר פרוטוקול מפורט למדידות פולשנית של פרמטרים והמודינמיקה כולל הפורטל לחץ, זרימת הדם splanchnic ספיקת הדם מערכתית על מנת לאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם אצל חולדות.
Abstract
זהו פרוטוקול מפורט המתאר פולשנית מדידות והמודינמיקה בחולדות חולה איידס על האפיון של תסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם. פורטל יתר לחץ דם (PHT) עקב שחמת הכבד אחראי על סיבוכים חמורים ביותר בחולים עם מחלת כבד. תמונה מלאה של התסמונת עם יתר לחץ דם הפורטל מאופיין על ידי לחץ מוגבר פורטל (PP) עקב מוגברת התנגדות כלי הדם intrahepatic (IHVR), hyperdynamic זרימת הדם, זרימת דם מוגברת splanchnic. מתקדמת splanchnic vasodilation עורקי, תפוקת הלב מוגבר עם קצב לב גבוה (HR) אבל לחץ הדם בעורק נמוך מאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם.
טיפולים כיום מפותחים הזה במטרה להקטין PP מאת גם IHVR מיקוד או מוגברת זרימת הדם splanchnic — אבל תופעות לוואי על ספיקת הדם מערכתית עלולה להתרחש. לפיכך, אפיון מפורט של פורטל ורידים, splanchnic ופרמטרים והמודינמיקה מערכתית, כולל מדידה של PP זרימת דם ורידי פורטל (PVBF), זרימת דם עורקית מצע המעי העליון, כלומר לחץ הדם בעורק (מפה), HR יש צורך פרה הערכת יעילותם של טיפולים חדשניים עבור PHT. המאמר הסרטונים שלנו מספק את הקורא עם פרוטוקול מובנה לביצוע מדידות והמודינמיקה פולשנית בחולדות חולה איידס. בפרט, נתאר את צנתור עורק הירך, וריד שער הכבד דרך הווריד ileocolic ואת המידה של פורטל ורידים, splanchnic הדם לזרום דרך perivascular אולטרסאונד דופלר זרימה הגששים. התוצאות נציג של עכברוש שונים דגמי PHT יוצגו.
Introduction
PHT מוגדר כמו לחץ דם מוגברת פתולוגית וריד שיכולים לגרום סיבוכים חמורים בחולים עם שחמת כגון דימום variceal, מיימת1. בעוד ולשננו מראש (למשל, פקקת וריד שער), שלאחר ולשננו (למשל, תסמונת באד-קיארי) PHT נדירים, PHT intrahepatic עקב שחמת הכבד מייצג הגורם הנפוץ ביותר של PHT2.
בשחמת הכבד, PP הוא גדל בעיקר כתוצאה IHVR גבוהות3. בשלבים מתקדמים, PHT מועצמת על ידי PVBF מוגברת עקב תפוקת הלב מוגבר וירידה מערכתית ו splanchnic התנגדות כלי הדם – הגדרת תסמונת הפורטל לחץ דם גבוהה4. חוק אוהם (ΔP = Q * R) מרמז על כי IHVR וזרימת הדם אינם פרופורציונליים לעמ’5. בחולים, מדידה ישירה של PP הוא מסוכן, לא שגרתי שבוצעו; במקום זאת, מעבר הצבע לחץ ורידי הכבד (HVPG) משמש מדד עקיף של6,עמ’7. HVPG מחושבת על-ידי חיסור חינם הכבד ורידים הלחץ (FHVP) wedged הכבד ורידים הלחץ (WHVP), אשר נמדדים באמצעות צנתר בלון ממוקמת ב וריד הכבד8. HVPG פיזיולוגית נע בין 1-5 מ מ כספית, בזמן HVPG ≥ 10 מ מ כספית מגדיר משמעותיים קלינית הפורטל לחץ דם (CSPH), מצביעה על סיכון מוגבר לסיבוכים הקשורים PHT, כגון דימום variceal, מיימת, אנצפלופתיה כבדית9 . למרות PP (קרי, HVPG) הוא הפרמטר הרלוונטי ביותר עבור חומרת PHT, מידע על רכיבים אחרים של PHT, כולל חומרת hyperdynamic מחזור (HR, מפה), זרימת דם עורקית מצע המעי splanchnic העליון /, IHVR, הם קריטיים להשיג הבנה מקיפה של המנגנון הבסיסי ברורים של PHT.
לפיכך, בניגוד מדידות עקיפות של PP בבני אדם, המתודולוגיה הציג על חולדות מציעה את היתרון של מדידה ישירה של PP ו מאפשרת ההקלטה של פרמטרים נוספים והמודינמיקה אפיון התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם. בנוסף, מדידה ישירה של PP readout אינטגרטיבית מעולה הסכום של פיברוזיס בכבד (דטרמיננטה העיקריים של IHVR), מתגבר על מגבלות מסוימות של כימות פיברוזיס הקשורים טעויות דגימה של רקמת הכבד.
הדגמים מכרסמים הנפוצות ביותר של חולה איידס PHT כוללים מצדו צינור המרה כירורגי (BDL) הנוצרות על-ידי רעלן הכבד פגיעה (כלומר, על ידי פחמן tetrachloride, thioacetamide או אינטרוסמין המינהל), תזונה-induced כבד מטבולית מודלים המחלה. Prehepatic PHT (הלא-חולה איידס) יכולה להיגרם על ידי חלקי וריד שער הכבד מצדו (PPVL)10.
מכרסמים קטנים מתאימים היטב שיטת שהוצגו, לרבות עכברים, אוגרים, חולדות או ארנבים, והן משויכות עלויות תחזוקה נמוכה יחסית. למרות זאת כל ההערכות והמודינמיקה ניתנים לביצוע לביצוע עכברים, יותר דיוק, הפארמצבטית של תוצאות נראים עם חולדות או מכרסמים גדולים בשל היתרון הברור של גודל בעלי חיים. בנוסף, מיקרו-הנגינה המסוימים והתקנים נחוצים כדי לקבל פרמטרים והמודינמיקה דומה בעכברים. לבסוף הם עמידים יותר עם תחתון משויכות התחלואה והתמותה, לפיכך, שיעור הנשירה צפויים נמוך אצל חולדות מאשר בעכברים.
המתודולוגיה הציג הוא מתאים היטב עבור הערכת טיפולים ספציפיים של מחלת כבד (קרי, תרופות אנטי דלקתיות או anti-fibrotic) או רומן תרופתי מתקרב את הטון וסקולרית השפעה ו/או אנדותל ביולוגיה; ופרמטרים. לפיכך, סביר אפקט והמודינמיקה PHT.
Protocol
Representative Results
Discussion
PP הוא הפרמטר העיקרי לתוצאה להערכה של התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם, משקף את חומרת שבבסיס שחמת. התצהיר מטריקס (קרי, פיברוזיס) והן vasoconstriction sinusoidal (בשל גדל ביטוי הכבד של vasoconstrictors, ירד היענות vasodilators) לגרום IHVR מוגברת. החשיבות של PP והשפעתה על מחלת כבד כרונית הוכח מרובים פרה11,<…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים וטרינרים, אחיות, בעלי חיים שומרי-מרכז של המחקר הביו-רפואי על תמיכתם רציפה במהלך פרויקטים מחקריים שלנו. המחברים להכיר את הקלט החשובים של כל הסוקרים של פרוטוקול זה. כמה המחקר מומן על ידי “יאנג המדע בפרס” של החברה האוסטרית לגסטרואנטרולוגיה ו Hepatology (ÖGGH) ל PS ופרס “סקודה” של האוסטרי החברה לרפואה פנימית כדי ללכוד את…
Materials
| Instruments | |||
| LabChart 7 Pro software | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Software |
| ML870 PowerLab 8/30 | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Electronic multichannel recorder |
| MLT0380/D | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Pressure transducer (x2: for Portal Pressure and Arterial Pressure) |
| ML112 Quad Bridge Amplifier | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Bridge amplifier |
| TS420 | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | - | Flowmeter module |
| Biological Research Apparatus 7025 | UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italy | - | Ventilator |
| Vapor 2000 | Dräger Medical AG & Co. KG, Lübeck, Germany | - | Isofluran Vaporizer |
| Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Superior Mesenteric Artery) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | #MA1PRB | Ultrasonic flow probe (1mm) |
| Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Portal Vein) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | #MA2PSB | Ultrasonic flow probe (2mm) |
| 1st for intubation & 2nd for clean skin incisions | - | - | Mayo scissor [x2] |
| Metzenbaum scissor | - | - | - |
| Cuticle scissor | - | - | - |
| e.g. Adson Brown tissue forceps | - | - | Tissue Forceps |
| High precision 45° angle broad point forceps [x2] | - | - | - |
| Hemostat [x4] | - | - | - |
| e.g. Mikulicz peritoneal clamp | - | - | Curved clamp |
| e.g. Dieffenbach clamp | - | - | Micro clamp |
| e.g. micro spatula with flat ends, width 4 mm, | - | - | Micro metal spatula |
| for transbuccal suture at intubation | - | - | Needle holder |
| Scalpel grip | - | - | - |
| selfmade | - | - | Intubation desk |
| blut, flexible and with a suitable diameter for arterial cannula and venflow | - | - | Blunt steel wire |
| modified arterial line 20G with Flowstich | Becton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK | #682245 | Arterial line |
| Heating pad | - | - | - |
| Rectal temerature probe | - | - | - |
| Saline heater | - | - | - |
| Laryngoscope (specific for animal size, e.g. rat) | - | - | - |
| Inductionbox for inhalation anesthesia | - | - | - |
| Scale (able to measure mg) | - | - | - |
| Hair clipper | - | - | - |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Consumables | |||
| e.g. modified BD Venflon Pro Safety 14GA | Becton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Sweden | #393230 | Peripheral venous catheter (14G) |
| Fine-Bore Polyethylene Tubing, ID 0.58mm, OD 0.96mm, Portex, | Smiths Medical International Ltd., Kent, UK | #800/100/200 | Catheter tube (PE-50) |
| e.g. Omnifix-F Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #9161406V | Syringe 1mL |
| e.g. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #4606051V | Syringe 5mL |
| e.g. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #4606205V | Syringe 20mL |
| e.g. BD Microlance 3, 18G – 1 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #304622 | Cannula (18G) |
| e.g. BD Microlance 3, 23G – 1" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #300800 | Cannula (23G) |
| e.g. BD Microlance 3, 30G – 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #304000 | Cannula (30G) |
| e.g. Leukoplast S | BSN medical GmbH, Hamburg, Germany | #47619-00 | Adhesive tape |
| e.g. Gazin RK Mullkompressen (18x8cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10972 | Gauze compress (small) |
| e.g. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10961 | Gauze compress (big) |
| Silk Braided black, USP 4/0, EP 1.5 | SMI AG, St. Vith, Belgium | #2021-04 | Suture (Silk 4/0, EP 1.5) |
| e.g. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 Prime | Johnson & Johnson Medical GmbH – Ethicon Deutschland, Germany | #EH7552 | Transbuccal suture |
| e.g. Cottonbuds (2.2mm, 15cm) | Paul Hartmann AG, Heidenheim, Germany | #967936 | Cotton buds |
| e.g. Vue Ultrasoundgel | Optimum Medical Limited, UK | #1157 | Ultrasound gel |
| e.g. Glubran 2 | Gem srl, Viareggio, Italy | #G-NB2-50 | Tissue glue |
| e.g. Surgical scalpell knife Nr. 10 – carbon steel | Swann-Morton, England, B.S. | #202 | Scalpel Knife |
| Heparin, 5000 i.E./mL (Natriumheparin) | Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mürztal, Austria | - | Heparin |
| Florane | Aesica Queenborough Ltd., Queenborough, UK | - | Isoflurane |
| OeloVital (5g) | Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria | - | Eye gel |
| Ketasol | aniMedica GmbH, Senden-Bösensell, Germany | - | Ketamine |
| Rompun | Bayer Austria Ges.m.b.H., Vienna, Austria | - | Xylazine |
| Xylocain 10% Pumpspray | AstraZeneca Österreich GmbH, Vienna, Austria | - | Lidocaine pump spray |
| Dipidolor | Jansen-Cilag Pharma GmbH, Vienna, Austria | - | Piritramide |
| NaCl 0.9% Fresenius, 1L | Fresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Austria | #13LIP132 | Physiological saline solution |
References
- Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).
- Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H. Evolution in the understanding of the pathophysiological basis of portal hypertension: How changes in paradigm are leading to successful new treatments. J Hepatol. 62, S121-S130 (2015).
- Blachier, M., Leleu, H., Peck-Radosavljevic, M., Valla, D. C., Roudot-Thoraval, F. The burden of liver disease in Europe: a review of available epidemiological data. J Hepatol. 58 (3), 593-608 (2013).
- Colle, I., Geerts, A. M., Van Steenkiste, C., Van Vlierberghe, H. Hemodynamic Changes in Splanchnic Blood Vessels in Portal Hypertension. Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 291 (6), 699-713 (2008).
- Laleman, W., Van Landeghem, L., Wilmer, A., Fevery, J., Nevens, F. Portal hypertension: from pathophysiology to clinical practice. Liver International. 25 (6), 1079-1090 (2005).
- Franchis, R. d. . Updating Consensus in Portal Hypertension: Report of the Baveno III Consensus Workshop on definitions, methodology and therapeutic strategies in portal hypertension. Journal of Hepatology. 33 (5), 846-852 (2000).
- Zardi, E. M., Di Matteo, F. M., Pacella, C. M., Sanyal, A. J. Invasive and non-invasive techniques for detecting portal hypertension and predicting variceral bleeding in cirrhosis: a review. Annals of medicine. 46 (1), 8-17 (2014).
- Kumar, A., Sharma, P., Sarin, S. K. Hepatic venous pressure gradient measurement: time to learn. Indian J Gastroenterol. 27 (2), 74-80 (2008).
- Tsochatzis, E. A., Bosch, J., Burroughs, A. K. Liver cirrhosis. Lancet. 383 (9930), 1749-1761 (2014).
- Abraldes, J. G., Pasarín, M., García-Pagán, J. C. Animal models of portal hypertension. World Journal of Gastroenterology : WJG. 12 (41), 6577-6584 (2006).
- Reiberger, T., et al. Sorafenib attenuates the portal hypertensive syndrome in partial portal vein ligated rats. Journal of Hepatology. 51 (5), 865-873 (2009).
- Schwabl, P., et al. Pioglitazone decreases portosystemic shunting by modulating inflammation and angiogenesis in cirrhotic and non-cirrhotic portal hypertensive rats. Journal of Hepatology. 60 (6), 1135-1142 (2014).
- Reiberger, T., et al. Nebivolol treatment increases splanchnic blood flow and portal pressure in cirrhotic rats via modulation of nitric oxide signalling. Liver International. 33 (4), 561-568 (2013).
- Schwabl, P., et al. The FXR agonist PX20606 ameliorates portal hypertension by targeting vascular remodelling and sinusoidal dysfunction. Journal of Hepatology. 66 (4), 724-733 (2017).
- Mandorfer, M., et al. Sustained virologic response to interferon-free therapies ameliorates HCV-induced portal hypertension. J Hepatol. 65 (4), 692-699 (2016).
- Schwabl, P., et al. Interferon-free regimens improve portal hypertension and histological necroinflammation in HIV/HCV patients with advanced liver disease. Aliment Pharmacol Ther. 45 (1), 139-149 (2017).
- Reiberger, T., Mandorfer, M. Beta adrenergic blockade and decompensated cirrhosis. Journal of Hepatology. 66 (4), 849-859 (2017).
- Reiberger, T., et al. Carvedilol for primary prophylaxis of variceal bleeding in cirrhotic patients with haemodynamic non-response to propranolol. Gut. 62 (11), 1634-1641 (2013).
- Reiberger, T., et al. Austrian consensus guidelines on the management and treatment of portal hypertension (Billroth III). Wiener klinische Wochenschrift. 129 (3), 135-158 (2017).
- de Franchis, R. Expanding consensus in portal hypertension. Journal of Hepatology. 63 (3), 743-752 (2015).
- Pinter, M., et al. The effects of sorafenib on the portal hypertensive syndrome in patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma – a pilot study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 35 (1), 83-91 (2012).
- Schwabl, P., Laleman, W. Novel treatment options for portal hypertension. Gastroenterol Rep (Oxf). 5 (2), 90-103 (2017).
- Klein, S., Schierwagen, R., Uschner, F., Trebicka, J. . Mouse and Rat Models of Induction of Hepatic Fibrosis and Assessment of Portal Hypertension. , (2017).
- Russell, W. M. S., Burch, R. L. . The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).
- Langhans, W., Myrtha, A., Riediger, T., Lutz, T. A. . Routine animal use procedures. , (2016).
- Animal Care and Use Program. . Rat and Mouse anesthesia and analgesia: Formulary and General Drug Information. , (2016).
- Davis, J. A. . Current Protocols in Neuroscience. , (2001).
- Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Effects of isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl on physiological variables continuously measured by telemetry in Wistar rats. BMC Veterinary Research. 10 (1), 198 (2014).
- Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
- Becker, K., et al. . Statement on anesthesia methodologies: Recommondations on anaesthesia methodologies for animal experimentation in rodents and rabbits. , (2016).
