腸の部分的な閉塞のマウス モデル
Summary
激しい腹痛、吐き気、嘔吐、便の通過を防止するを引き起こすことができる腸の部分的または完全な閉塞に腸内の障害物が。マウスの腸の部分的な obsructions を作成するこの手順は、病理細胞増殖と細胞死腸内の基になるメカニズムを勉強で信頼性の高いです。
Abstract
阻害や蠕動運動、腸の障害は、腹部の癒着や腫瘍増殖を含む最も胃腸の (GI) の病気によって引き起こされることができます。メカニズムを改造携帯が関与し、によって引き起こされる、腸の障害はよくわかっていません。腸障害のいくつかの動物モデルが開発されているが、マウス モデルが最もコスト/時間有効。マウス モデルは、それが正しく実行されない場合、高い死亡率を持つ腸部分閉塞 (PO) の外科的移植を使用します。また、PO 外科治療を受けたマウスは適切な封鎖が使用されていないまたはが正しく配置場合肥大を開発する失敗します。ここでは、非常に低い死亡率と信頼性が高く、再現性のある腸障害を生成する PO 手術のための詳しいプロトコルについて述べる。このプロトコルは、小腸で消化運動を部分的にブロックする回腸を囲む外科的に配置されたシリコーン リングを利用しています。部分的な閉塞は、腸の消化運動の停止による拡張になります。腸管の拡張は、徐々 に死を引き起こすそれまで 2 週間にわたって開発をしてリングの口側に平滑筋肥大を誘導します。手術の PO マウス モデル肥厚性腸組織平滑筋細胞 (SMC)、間質細胞のカハール (ICC) PDGFRα+を含む消化管細胞の病理学的変化を調べる場合に役立ちます体内のモデルを提供し、神経腸閉塞の開発中にセルです。
Introduction
イレウスは、腸1を介して移動から消化された食品・液体・ ガスを防止する小規模または大規模な腸の部分的または完全な閉塞です。、閉塞するため、閉塞はルーメン2を縮小に厚くなる腸壁を誘導します。腸閉塞は腹部癒着組織形成を引き起こす腹部や骨盤内の手術の結果として、または炎症性腸疾患 (クローン病)、憩室炎、ヘルニア、捻転、狭窄など消化管疾患から発生することが腸重積症、便秘、宿便、偽閉塞、癌および腫瘍の3,4,5。これらのケースでのイレウスはしばしば腸6筋肥大に します。
内腔の PO 腸の膨満感を誘発して蠕動運動機能7,8,9,10を続ける必要性への応答で閉塞の周りの平滑筋層の厚さを増加させる 11,12,13。猫13内同様肥大を一貫して開発、犬12、モルモット11ラット10マウス7平滑筋肥大を研究する腸の PO の動物モデルが開発されました、腸管の筋層。
腸 PO のマウス モデルは、生成し、生体内でのイレウスの勉強に最も費用効果的な方法です。小腸障害マウス回腸を囲むために外科シリコーン リングを使用して実行されます。PO マウスは、PO 手術8,15後、筋膜厚 (肥大) の初期 (過形成)、細胞数の増加と増加を示した。SMC は、14肥大条件に応えて平滑筋層内で成長している主なプラスチック製の電池が ICC など他のセルおよび SMC に密接に関連付けられて、また再設定 PDGFRα+セルです。PO マウスが、小腸の肥大を開発について報告した smc が、増殖性が高い7,15,16PDGFRα+細胞に脱分化型します。逆に、ICC は退化、肥大した平滑筋層内腸 obsruction7の開発中に失われました。PO モデルのもう一つの主要な利点は、腸神経系と伝達を行う神経因性の運動パターンの変化を誘導する能力です。主要な伝播マウス小腸の神経因性の運動パターン移行するモータです複雑な (MMC) 神経因性は、ICC や電気的徐波17は必要ありません。PO モデルは、部分的な閉塞で Mmc や腸の神経を改造する方法に明確な洞察力を提供できます。
ここでは、シリコン リングを使用して腸の PO 手術のためマウス プロトコルを提案する.確実に PO 手術を受けるマウス小腸の筋の肥大を生成します。肥大筋肉内 SMC、ICC、PDGFRα+、および神経細胞は劇的に改造しました。
Protocol
Representative Results
Discussion
模倣する人間の腸閉塞、腸管平滑筋肥大を一貫して再現性をもって腸の PO 手術を受けるマウスに開発を実証しました。腸閉塞の手術は、犬12猫13モルモット11、ラット10マウス7を含むさまざまな動物の開発されています。腸閉塞のマウス モデルは、時間、コスト、サイズ、および他のより大きい動物モ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
著者はベンジャミン ・ J Weigler、獣医、博士を感謝したいし、彼らの弁護士と同様に、マウスに提供されるウォルト ・ マンデヴィル、優秀な動物向け獣医 (動物資源・ キャンパスに通う獣医、ネバダ大学リノ)外科的処置。
Materials
| Surgical drape | Medical and veterinary supplies | SMS40 | 40”X100 yards |
| Underpad, econ, pro plus | Medical and veterinary supplies | MSC281224 | 17×24” |
| Iris scissors | Braintree scientific, Inc | SC-i-130 | |
| Iris scissors | Vantage | V95-304 | |
| Dumont electronic & jeweler tweezers | Dumont | 98-180-3 | |
| Braided absorbable suture | Covidien polysorb | SL-5687G | 5-0, polyglactin |
| Nylon non-absorbable mono filament | AD surgical | S-N618R13 | 6-0, nylon |
| Surgical blade | Dynarex | No.15 | |
| Needle holder | Jacobson microvascular | 36-1342TC | 8.5 inch |
| Scalpel handle | Flinn scientific | AB1049 | |
| Microsurgical scissor | WPI | 503305 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Puralube VET | 3.5 g | |
| Fluriso (isoflurane) | Vetone | V1 502017 | 250 ml |
| Steri-strip reinforced skin closure | 3M | R1547 | |
| Surgical gloves | Medline | MSG2270 | |
| Ear loop face mask | The safety zone | RS700 | |
| Avant gauze non-woven sponges | Caring | PRM25444 | |
| Surgical cup | Admiral craft OYC-2 | 725-A42 | 2.5 oz |
| Swabstick | ChloraPrep | 260103 | 2% w/v Chlorhexidine Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA) |
| Cotton tipped applicator | Puritan | 806-WC | |
| Buprenorphine | Zoo pharm | BZ8069317 | 1 mg/ml |
| Gentamycin sulfate | Vetone | G-6336-04 | 100 mg/ml |
| Fast acting gel cream remover | Veet | 8111002 | |
| Syringe | AHS | AH01T2516 | 1 ml with needle |
| Silicon ring | VWR | 60985-720 | 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter |
| C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 4-6 weeks old |
References
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