Delici cisim kaynaklı Iris neovaskülarizasyon Rubeosis Iridis bir fare modeli olarak
Summary
Iris neovaskülarizasyon, iskemik retina hastalığı, ortak bir komplikasyonu görme tehdit neovasküler glokom için neden olabilir. Burada, anjiogenez oransal maddeler noninvaziv değerlendirme için kullanılabilir deneysel Iris neovaskülarizasyon inducing için fare bir protokol açıklayın.
Abstract
Angiogenez noninvaziv değerlendirme için genel bir model olarak delik kaynaklı Iris neovaskülarizasyon modeli açıklar. Model neovasküler Glokom, görme tehdit komplikasyonu diabetik retinopati hedefleme için uygundur. Bu yöntem Iris vasküler yanıt indüksiyon üzerinde kendinden contalı Üveal delikler BALB/c fareler üzerinde bir dizi dayanmaktadır ve fare oküler damarlara doğum sonrası olgunlaşma yararlanır. Fare pups Üveal delikler günden ne zaman belgili tanımlık pups doğal doğum sonrası güne kadar 24,5 onların gözlerini açmak postnatal 12.5, tabi. Nedeniyle saydamlığı kornea Iris damarlara kolayca zaman içinde noninvaziv in vivo yöntemler tarafından çözümlenebilir. Ayrıca, yarı saydam Iris BALB/c farelerin flatmounted en az belirsiz arka plan boyama ile detaylı immunohistologic analiz için olabilir. Bu modelde, anjiogenez esas olarak enflamatuar tarafından tahrik edilmektedir ve plazminojen sistemleri etkinleştirme. Delik kaynaklı modeli Iris neovaskülarizasyon küçük Rodents ikna etmek için ilk ve doğrudan noninvaziv vivo içinde analiz anjiogenik sürecinin izin avantajı vardır. Ayrıca, model anjiogenik modülasyonlu maddelerle, hangi potansiyel angiogenez bir vivo içinde bakış açısı ile çalışmada vurgulamaktadır birleştirilebilir.
Introduction
Silier vücut ve koroid ile birlikte iris gözün en bozukluklarına doku uvea oluşmaktadır. Iris damarlara göz ön TMMOB homeostazı korumada esastır. Atar ve toplar damarlardaki arasında bol anastomoz bağlantıları bir sonucu olarak, besin ve oksijen Iris kendisi sadece, ama tüm ön bölümüne göz1temini Iris kan damarları sağlar.
Yeni kan damarları veya önceden varolan olanlardan angiogenez oluşumu geliştirme ve2şifa yara gibi fizyolojik süreçlerde esastır. Angiogenez ince kurallı faktörlere, vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF) ve plazminojen aktivatör inhibitör (PAI), hem de birden fazla inflamatuar faktörleri çok sayıda tarafından düzenlenir ve bu faktörlerin bir dengesizlik için patolojik yol açabilir angiogenez3.
Gözlerimin içine neovaskülarizasyon proliferatif Diyabetik retinopati (PDR) ve neovasküler glokom (NVG) gibi görme tehdit eden hastalıkların nedeni. Bu oküler hastalıklar, Fokal neovaskülarizasyon yaygın olarak retina dokularının henüz inflamatuar dengesizlik bulunur ve anjiogenik faktörler derinliklerinde her iki arka ve ön oküler göz rubeosis iridis ile ilişkili olmuştur Iris patolojik neoangiogenesis4için klinik terim. Bu patolojiler angiogenez geçmesi yetişkin Iris kapasitesini gösterir. Farelerde, oküler damarlara doğumdan sonra olgunlaşmamış ve olgunlaşma doğum sonrası devam ediyor. Bu özelliği gelişme oksijen kaynaklı retinopati, yakından retinopati Prematüre5klinik durumunu taklit eden bir model fare modeli istismar edilir. Buna ek olarak, anjiogenez ve iltihap yara iyileşme mekanizmalarını6önemli bir rol oynamaktadır ve kendisi şifa yara angiogenez modelleri7ile ilişkili olduğu düşünülmektedir.
Bu çalışmada, delik kaynaklı Iris neovaskülarizasyon modeli açıklar. Üveal delikler limbus, dış sınırı hangi sistem şifa yara tetikleyen tarafından Iris neovaskülarizasyon neden gerçekleştirilir. Nedeniyle şeffaflık kornea, iris damarlara olabilir kolayca vivo içinde noninvaziv yöntemlerle analiz. Delinmiş gözleri plazminojen etkinleştirme ve inflamatuar işaretleri8artış ile ilişkili olduğu düşünülmektedir iris vasküler yatağın bir artış mevcut. Sunulan model anjiogenez ve anjiogenik bileşikler eleme çalışma için yeni bir araç olarak büyük bir potansiyele sahiptir ve anjiogenik işlemleri doğrudan vivo içinde görselleştirme sağlar.
Protocol
Representative Results
Discussion
Mevcut iletişim kuralında, indüksiyon Üveal ponksiyon tarafından Iris vasküler tepki için yeni bir yöntem sunulur. Ponksiyon yara iyileşme mekanizmalarını tetikler ve vasküler Iris10,11yanıt-e doğru teşvik etmektedir. Gibi PDR ve nerede retina göz posterior segmentte yanıtlarını yaygınlaşacak anjiogenik rubeosis iridis, İris12 artan bir vaskülarizasyon klinik durumda sonuçlanacak NVG, oküler patolojiler anlaşarak bu </s…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar Linnea Tankred ve Diana Rydholm hayvancılık için teşekkür ederiz.
Materials
| Bonn eye scissors | Bausch & Lomb | 23060 | |
| Clayman-Vannas curved scissors | Bausch & Lomb | E3383 C | |
| Clayman-Vannas straight scissors | Bausch & Lomb | E3383 S | |
| Objective adapter for camera | Handcrafted | N/A | Or any system that allows adapting a camera to the microscope |
| Heating Pad 100-110 watts | Non Applicable | N/A | Available in pet/veterinarian stores |
| Hypodermic 30g beveled needle | KDM GmBH germany | 911914 | |
| Iphone 4S | Apple | Non Applicable | Or other high resolution image acquistion device |
| Isoflurane | Baxter | KDG 9623 | |
| McPherson tying forceps | Bausch & Lomb | E1815 S | |
| Micro tying forceps | Bausch & Lomb | 63140 | |
| Minims tetracaine hydrochloride | Bausch & Lomb | N/A | 1 % (w/v) Eye Drops |
| Neutral-buffered formalin | Bioreagens | 0018-40 | |
| Normal saline solution | Fresenius Kabi | 210352 | 0.9 % (w/v) NaCl in injectable water |
| Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010023 | Balanced and buffered PBS pH 7.4 |
| Petri dish 10 cm | Starstedt | 83.3902 | |
| Petri dish 3 cm | Starstedt | 83.3900 | |
| Safe Seal Tube 2.0 mL | Starstedt | 72.685.200 | Or any eppendorf style tubes |
| TC plate 96-well | Starstedt | 83.3924 | |
| Transfer pipette 3.5 mL | Starstedt | 86.1171 | Or any other Pasteur pipette style |
| Univentor 400 anesthesia unit | Univentor Limited | N/A | Or equivalent flow regulator with induction chamber and mask for volatile anesthesia |
| Wild M650 surgical microscope | Wild Heerbrugg | N/A | Or other surgical or magnifying stereoscope |
References
- Morrison, J. C., Van Buskirk, E. M. Anterior collateral circulation in the primate eye. Ophthalmology. 90 (6), 707-715 (1983).
- Dreyfuss, J. L., Giordano, R. J., Regatieri, C. V. Ocular Angiogenesis. J Ophthalmol. 2015, 892043 (2015).
- Breuss, J. M., Uhrin, P. VEGF-initiated angiogenesis and the uPA/uPAR system. Cell Adh Migr. 6 (6), 535-615 (2012).
- Rodrigues, G. B., et al. Neovascular glaucoma: a review. Int J Retina Vitreous. 2, 26 (2016).
- Stahl, A., et al. The mouse retina as an angiogenesis model. Invest Ophth Vis Sci. 51 (6), 2813-2826 (2010).
- DiPietro, L. A. Angiogenesis and wound repair: when enough is enough. J Leukocy Biol. 100 (5), 979-984 (2016).
- Eming, S., Brachvogel, B., Odorisio, T., Koch, M. Regulation of angiogenesis: Wound healing as a model. Prog Histochem Cytoc. 42 (3), 115-170 (2007).
- Beaujean, O., Locri, F., Aronsson, M., Kvanta, A., André, H. A novel in vivo model of puncture-induced iris neovascularization. PloS One. 12 (6), e0180235 (2017).
- Zudaire, E., Gambardella, L., Kurcz, C., Vermeren, S. A Computational Tool for Quantitative Analysis of Vascular Networks. PloS One. 6 (11), (2011).
- Dorrell, M., Uusitalo-Jarvinen, H., Aguilar, E., Friedlander, M. Ocular neovascularization: basic mechanisms and therapeutic advances. Surv Ophthalmol. 52 Suppl 1, S3-S19 (2007).
- Kvanta, A. Ocular angiogenesis: the role of growth factors. Acta Ophthalmol. 84 (3), 282-288 (2006).
- Salman, A. G. Intrasilicone Bevacizumab Injection for Iris Neovascularization after Vitrectomy for Proliferative Diabetic Retinopathy. Ophthalmic Res. 49 (1), 20-24 (2013).
- Jeong, Y. C., Hwang, Y. H. Etiology and Features of Eyes with Rubeosis Iridis among Korean Patients: A Population-Based Single Center Study. PloS One. 11 (8), e0160662 (2016).
- Speier, S., Nyqvist, D., Köhler, M., Caicedo, A., Leibiger, I. B., Berggren, P. -. O. Noninvasive high-resolution in vivo imaging of cell biology in the anterior chamber of the mouse eye. Nat Protoc. 3 (8), 1278-1286 (2008).
- Stefansson, E., Landers, M. B., Wolbarsht, M. L., Klintworth, G. K. Neovascularization of the Iris – an Experimental-Model in Cats. Invest Ophth Vis Sci. 25 (3), 361-364 (1984).
- Nork, T. M., Tso, M., Duvall, J., Hayreh, S. S. Cellular Mechanisms of Iris Neovascularization Secondary to Retinal Vein Occlusion. Arch Ophthalmol-Chic. 107 (4), 581-586 (1989).
- Hjelmeland, L. M., Stewart, M. W., Li, J. W., Toth, C. A., Burns, M. S., Landers, M. B. An Experimental-Model of Ectropion Uveae and Iris Neovascularization in the Cat. Invest Ophth Vis Sci. 33 (5), 1796-1803 (1992).
- Tolentino, M. J., Miller, J. W., Gragoudas, E. S., Chatzistefanou, K., Ferrara, N., Adamis, A. P. Vascular endothelial growth factor is sufficient to produce iris neovascularization and neovascular glaucoma in a nonhuman primate. Arch Ophthalmol-Chic. 114 (8), 964-970 (1996).
- Paula, J. S., et al. Rabbit Rubeosis Iridis Induced by Intravitreal Latex-derived Angiogenic Fraction. Curr Eye Res. 36 (9), 857-859 (2011).
- Takei, A., Ekström, M., et al. Gene Transfer of Prolyl Hydroxylase Domain 2 Inhibits Hypoxia-inducible Angiogenesis in a Model of Choroidal Neovascularization. Sci Rep. 7, 42546 (2017).
