وصف الاستجابات ايستب الغلوبولين المناعي تعتمد على الغدة الصعترية، والغدة الصعترية مستقلة في الفئران باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم
Summary
في هذه الورقة، ويصف لنا بروتوكولا لوصف استجابات ايستب الغلوبولين المناعي (Ig) T-تعتمد على والمستقلة تي في الفئران باستخدام ELISA. تستخدم هذه الطريقة وحدها أو في تركيبة مع التدفق الخلوي سوف تسمح الباحثين تحديد الفروق في الاستجابات ايستب بالخليه بوساطة Ig في الفئران بعد التحصين مستضد تعتمد على T ومستقلة عن تي.
Abstract
الأجسام المضادة، كما وصف كما المناعية (Ig)، التي يفرزها ميزت ب الخلايا الليمفاوية، خلايا بلاسمابلاستس/البلازما، بالحصانة humoral تقديم دفاع هائلة ضد غزو العوامل الممرضة عبر آليات متنوعة. واحد الأهداف الرئيسية للتطعيم الحث على أجسام محددة مستضد واقية لمنع حدوث إصابات تهدد الحياة. على حد سواء تعتمد على الغدة الصعترية (TD) ومستقلة عن الغدة الصعترية المستضدات (TI) يمكن الحصول على ردود IgM محددة مستضد قوية ويمكن أن تحفز أيضا إنتاج الأجسام المضادة تحولت ايستب (مفتش، والقاهرة، وفريق الخبراء الحكومي الدولي) فضلا عن توليد خلايا الذاكرة ب بمساعدة المقدمة من مستضد تقديم الخلايا (Apc). وهنا يصف لنا بروتوكولا لوصف استجابات ايستب TD و TI Ig في الفئران باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم (ELISA). في هذا البروتوكول، استجابات TD والمفتش العام منظمة الشفافية الدولية هي في الفئران التي تلقاها التحصين داخل (القائمة) مع المستضدات مترافق هابتين النموذجي كله TNP (في الشب) و TNP-السكاريد (في برنامج تلفزيوني)، على التوالي. للحث على استجابة الذاكرة TD، يرد تحصين الداعم TNP-كله في الشب في 3 أسابيع بعد التحصين الأولى مع نفس المستضد/adjuvant. يتم حصاد الأمصال الماوس عند نقاط زمنية مختلفة قبل وبعد التحصين. مجموع مستويات مصل Ig والأجسام المضادة TNP على حدة في وقت لاحق كمياً استخدام Ig محددة ايستب ساندويتش وإليزا غير المباشرة، على التوالي. من أجل قياس تركيز المصل كل ايستب Ig بشكل صحيح، العينات تحتاج إلى أن تضعف على نحو مناسب لاحتواء ضمن النطاق الخطي للمنحنيات القياسية. باستخدام هذا البروتوكول، نحصل دائماً على نتائج يمكن الاعتماد عليها بخصوصية عالية وحساسية. عندما تستخدم بالاقتران مع أساليب أخرى مكملة مثل التدفق الخلوي، والثقافة في المختبر ب خلايا الطحال والمناعي تلطيخ (المدينة)، سيسمح هذا البروتوكول الباحثين للحصول على فهم شامل لجسم الردود في وضع تجريبي معين.
Introduction
ب اللمفاويات هي اللاعب الرئيسي في حصانة humoral ونوع الخلية فقط في الثدييات التي قادرة على إنتاج الأجسام المضادة، كما وصفته المناعية (Ig)1،2. الأجسام المضادة التي تفرزها الخلايا ب تقديم دفاع هائلة ضد غزو العوامل الممرضة عبر آليات متنوعة بما في ذلك تحييد، opsonization، وتكمل التنشيط، مما يؤدي إلى حصانة الحماية3. ويتحقق إفراز الأجسام المضادة بخلايا ب فقط بعد التنشيط الكامل ب خلايا معينة، الأمر الذي يتطلب عادة اثنين متميزة إشارات3. يتم ترحيل إشارة 1 بالربط المباشر من المستضد (Ag) لمستقبلات الخلية ب (المركز) أعرب على سطح الخلايا السذاجة محددة ب3. تبعاً لمصدر 2 إشارة، يمكن تقسيم الخلية بالتنشيط تعتمد على الغدة الصعترية (الدفتيريا) أو مستقلة عن الغدة الصعترية (TI)3،4. في رد مستضد TD، توفرها 2 إشارة تنشيط المشابهة CD4 مساعد (رح) خلايا تي، التي تعبر عن CD154، يجند لمستقبلات كوستيمولاتوري CD40 أعرب ب الخلايا1،،من23. في استجابة مستضد TI، 2 إشارة تأتي من الاشتباك أما مستقبلات مثل عدد القتلى (TLRs في حالة النوع 1 جي تي) أو العابرة للربط واسعة النطاق من بكرس (في حالة النوع 2 جي تي) في ب3،4خلايا. نوع 1 منظمة الشفافية الدولية (TI-1) مولدات المضادات الميكروبية يغاندس من TLRs، بما في ذلك ليبوبوليساكتشاريديس البكتيرية (لبس)، الكشف الفيروسية، والجرثومية “البد الحمض النووي”4،5. نوع 2 منظمة الشفافية الدولية (TI-2) مولدات المضادات بنية متكررة عالية، وهي قادرة على تقديم فترات طويلة ومستمرة إشارات إلى الخلية بواسطه العابرة للربط متعددة من4،بكرس6. وتشمل أمثلة نموذجية من المستضدات تي-2 السكريات المكوّرات الرئوية ومترافق هابتين السكاريد6،7. يمكن الحصول على ردود IgM محددة مستضد قوية المستضدات TD ومنظمة الشفافية الدولية ويمكن أيضا تحفز إنتاج الأجسام المضادة تحولت ايستب (مفتش، والقاهرة، وفريق الخبراء الحكومي الدولي) بمساعدة تقدمها مستضد تقديم الخلايا (Apc) مثل الخلايا الجذعية (DCs)1 ،،من23. وعلاوة على ذلك، المستضدات TD ومنظمة الشفافية الدولية قادرة على حمل ردود الذاكرة مع المساعدة من ناقلات الجنود المدرعة، ولكن TD المستضدات أكثر كفاءة في حفز الذاكرة خلية بالجيل3،8.
في هذا البروتوكول، هي أثارت ردود TD و TI Ig في الفئران بالتحصين داخل (القائمة) مع نموذج مترافق هابتين المستضدات مفج 2,4,6-ترينيتروفينيل-ثقب المفتاح هيموسيانين (TNP-كله) و TNP-السكاريد (المحايدة، الغاية تشعبت وكتلة عالية)، على التوالي9،،من1011. عادة ما تستخدم مولدات TD مع أخرى الأعشاب لتعزيز إنتاج الأجسام المضادة12. هنا في موقعنا البروتوكول، يتم حقن TNP-كله مع الشب، adjuvant استخداماً في التحصين الدراسات12. وتشمل الأمثلة الأخرى من المواد التي يمكن أن تستخدم كامل أو غير كامل فروند الشعبية adjuvant (فرنكات الجماعة المالية الأفريقية أو إيفا)، بدهن مونوفوسفوريل/تريهالوسي ديكورينوميكولاتي (“ربي” adjuvant)، والبد أوليجوديوكسينوكليوتيديس،، إلخ13 14. بعد التحصين، سيرا الماوس يتم حصادها في نقاط زمنية مختلفة، والأجسام المضادة TNP محددة في الأمصال كمياً باستخدام Ig ايستب محددة مرتبطة بالانزيم المرتبط بالانزيم (إليزا)9،10، 11.
أليسا هو تحليل القائم على لوحة يستخدم على نطاق واسع كأداة تشخيص في الطب، وأيضا كأداة تحليلية في بحوث الطب الأحيائي15،16. يتم استخدامه للكشف والتحديد الكمي لتحليلها بما في ذلك الأجسام المضادة، الهرمونات، السيتوكينات، المستقطبات، ومختلف المستضدات، إلخ. يمكن أن يؤديها أليسا في العديد من تنسيقات مختلفة، بما في ذلك ساندويتش، المباشرة وغير المباشرة، وتنافسية أليسا15،16. وبصفة عامة، أنها تنطوي على تعطيل تداول المستضد على سطح صلب، عادة لوحة microtiter 96، حسنا، الذي هو المحتضنة مع جسم الأولية. بعد الحضانة، يتم غسلها الجسم غير منضم بعيداً. في أليسا مباشرة، هو مترافق جسم الأولية مباشرة إلى إنزيم (عادة الفجل البيروكسيديز أو الفوسفاتيز القلوية)، التي يمكن أن تنشق الركازة اللونية تسفر عن تغيير لون مرئية الكشف عنها بواسطة أداة الكشف عن إشارة مثل جهاز المطياف الضوئي15،16. وفي المقابل، إذا كان جسم ثانوية المرتبطة بالانزيم يستخدم لربط جسم الأولية، ثم هذا يعتبر غير مباشرة15،أليسا16. أليسا المباشر أسرع حين أليسا غير المباشر هو أكثر حساسية15،16. في ساندويتش أليسا، اللوحات المغلفة بجسم “التقاط” تستخدم لشل مستضد الاهتمام بالعينات، ومن ثم يمكن الكشف عن مستضد الملتقطة بالضد “اكتشاف” آخر بطريقة مباشرة أو غير مباشرة15، 16-“ساندويتش أليسا” يوفر خصوصية عالية منذ الكشف عن antigen بواسطة اثنين من الأجسام المضادة المختلفة للمستضد. في أليسا تنافسية، يتم تأسيس المنافسة بين مستضد عينة مستضد لوحة زمنياً للربط لجسم الأولية، وثم يتم تركيز مستضد في عينة كمياً بقياس الانخفاض في إشارة من الركازة 15 , 16. أليسا تنافسية يمكن أن يؤديها باستخدام التنسيق المباشر أو غير المباشر المشار إليها أعلاه وهي مفيدة للكشف عن المستضدات صغيرة مع15،بيفرتون واحد فقط16.
تشمل التقنيات البديلة لقياس الأجسام المضادة راديو-المناعة (ريا)، اليكتروتشيميلومينيسسينسي (القامة) المقايسة وسطح الرنين مأكل مثل الطحين (موارد البرنامج الخاصة) الاعتداء17. وكان ريا المناعة الأولى وضع تلك التدابير وجود مستضد (أو جسم) بخصوصية عالية وحساسية باستخدام الكواشف راديولابيليد18،19. ومع ذلك، بسبب المخاوف من سمية المشعة والعمر التخزيني وتكاليف التخلص من التراخيص الخاصة للعمل مع المواد المشعة، أليسا أفضل ويستخدم الأسلوب أكثر ملاءمة للمشترك20،21. هو القامة مقايسة حساسة للغاية التي يتم تهيئتها باستخدام الكهرباء لتوليد الأنواع شدة رد الفعل من السلائف مستقرة على سطح القطب ردود فعل تشيميلومينيسسينت، ويمكن استخدامها لقياس مقدار تحليلها (مثل المستضدات أو 22من الأجسام المضادة). ومع ذلك، يصدرون يتطلب أداة خاصة وبالتالي لا تستخدم على نطاق واسع أليسا23. من موارد البرنامج الخاصة فحص مباشر التي يمكن استخدامها لقياس ربط يغاندس (مثلاً.، الأجسام المضادة) للجزيئات معطلة (مثلاً.، المستضدات) على جهاز استشعار رقاقة السطحية24. موارد البرنامج الخاصة بالكشف عن التفاعلات في الوقت الحقيقي جداً على وجه التحديد ولا تتطلب استخدام الكواشف المسمى كما هو الحال في أليسا. ومع ذلك، موارد البرنامج الخاصة أيضا يتطلب معدات خاصة ولديه حساسية أقل مما أليسا17. ونظرا للقيود المفروضة على الطرق البديلة، أليسا هو الأسلوب الأكثر ملائمة ومريحة لهدفنا في هذا البروتوكول. هنا، يمكننا وصف استخدام ساندويتش أليسا لتحليل مجموع مستويات ايستب Ig وإجراءات أليسا غير المباشرة لتحليل محددة مستضد Ig إيسوتيبيس.
Protocol
Representative Results
Discussion
هنا، نحن تصف البروتوكول لوصف استجابات ايستب TD و TI Ig في الفئران باستخدام ELISA. ويتطلب التنفيذ الناجح لهذا البروتوكول استخدام المواد المحددة في الجدول 1، بما في ذلك لوحات المقايسة أليسا والتحصين Ags، الماوس Ig ايستب-خاصة بالأجسام المضادة والمعايير. وينبغي الحرص على تجنب استخدام لوحات ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
بتأييد هذه الدراسة بالمعاهد الوطنية للصحة منح R01 CA158402 (P. شيه) و R21 AI128264 (P. شيه)، منح وزارة الدفاع W81XWH-13-1-0242 (ص شيه)، على “جائزة الطيار” من معهد نيو جيرسي السرطان من خلال المنحة رقم P30CA072720 من معهد السرطان الوطني (ص شيه) منحة بوسكه الطبية الحيوية (ص شيه)، وزمالة فيكتور ستولر (A. لالاني)، وب أن والزمالة لازم جيمس باء (س. تشو).
Materials
| VersaMax Tunable Microplate Reader | MDS Analytical Technologies | VERSAMAX | Equipment to read the plates |
| SOFTmax PRO 5.3 | MDS Analytical Technologies | SOFTmax PRO 5.3 | Software for the plate reader |
| GraphPad Prism | GraphPad | Prism | Software for graphing and statistics |
| TNP-AECM-polysaccharide (FICOLL) | Biosearch Technologies | F-1300-10 | A TI Ag for immunization |
| TNP-KLH | Biosearch Technologies | T-5060-5 | A TD Ag for immunization |
| TNP(38)-BSA | Biosearch Technologies | T-5050-10 (conjugation ratio: 38) | Coating Ag for TNP-specific ELISA |
| TNP(3)-BSA | Biosearch Technologies | T-5050-10 (conjugation ratio: 3) | Coating Ag for high affinity TNP-specific Ig |
| Imject Alum | Fisher Scientific | PI-77161 | Alum adjuvant for immunization |
| Falcon Polypropylene tubes | Fisher Scientific | 14-959-11A | For incubation of TNP-KLH/alum |
| BD Insulin Syringe | Fisher Scientific | 14-829-1B | For i.p. injection of mice |
| Immuno 96-Well Plates, Flat-Bottom | Fisher Scientific | 14-245-61 | For ELISA |
| Untreated 96-Well Microplates, Round-Bottom | VWR | 82050-622 | For serial dilutions of standards and samples |
| Phosphatase substrate, 5 mg Tablets | Sigma | S0942-200TAB | AP substrate |
| Diethanolamine | VWR | IC15251690 | A component of AP substrate buffer |
| Goat anti-mouse IgM | SouthernBiotech | 1020-01 | Capture Ab for mouse IgM |
| Goat anti-mouse IgG1 | SouthernBiotech | 1070-01 | Capture Ab for mouse IgG1 |
| Goat anti-mouse IgG2a | SouthernBiotech | 1080-01 | Capture Ab for mouse IgG2a |
| Goat anti-mouse IgG2b | SouthernBiotech | 1090-01 | Capture Ab for mouse IgG2b |
| Goat anti-mouse IgG3 | SouthernBiotech | 1100-01 | Capture Ab for mouse IgG3 |
| Goat anti-mouse IgA | SouthernBiotech | 1040-01 | Capture Ab for mouse IgA |
| Goat anti-mouse IgE | SouthernBiotech | 1110-01 | Capture Ab for mouse IgE |
| AP-Goat anti-mouse IgM | SouthernBiotech | 1020-04 | Detection Ab for mouse IgM |
| AP-Goat anti-mouse IgG1 | SouthernBiotech | 1070-04 | Detection Ab for mouse IgG1 |
| AP-Goat anti-mouse IgG2a | SouthernBiotech | 1080-04 | Detection Ab for mouse IgG2a |
| AP-Goat anti-mouse IgG2b | SouthernBiotech | 1090-04 | Detection Ab for mouse IgG2b |
| AP-Goat anti-mouse IgG3 | SouthernBiotech | 1100-04 | Detection Ab for mouse IgG3 |
| AP-Goat anti-mouse IgA | SouthernBiotech | 1040-04 | Detection Ab for mouse IgA |
| AP-Goat anti-mouse IgE | SouthernBiotech | 1110-04 | Detection Ab for mouse IgE |
| Mouse IgM standard | BD Biosciences | 553472 | TNP-specific IgM, Clone G155-228 |
| Mouse IgG1 standard | BD Biosciences | 554054 | TNP-specific IgG1, Clone 107.3 |
| Mouse IgG2a standard | BD Biosciences | 556651 | TNP-specific IgG2a, Clone G155-178 |
| Mouse IgG2b standard | BD Biosciences | 554055 | TNP-specific IgG2b, Clone 49.2 |
| Mouse IgG3 standard | BD Biosciences | 553486 | KLH-specific IgG3, Clone A112-3 |
| Mouse IgA standard | BD Biosciences | 550924 | Mineral oil-induced IgA, Clone MOPC-320 |
| Mouse IgE standard | BD Biosciences | 557079 | TNP-specific IgE, Clone C38-2 |
References
- Moise, A., Nedelcu, F. D., Toader, M. A., Sora, S. M., Tica, A., Ferastraoaru, D. E., Constantinescu, I. Primary immunodeficiencies of the B lymphocyte. Journal of Medicine and Life. 3, 60-63 (2010).
- Bishop, G. A., Haxhinasto, S. A., Stunz, L. L., Hostager, B. S. Antigen-specific B-lymphocyte activation. Critical Reviews in Immunology. 23, 149-197 (2003).
- Murphy, K. . Janeway’s Immunobiology. 8th Edition. 1, (2012).
- Vinuesa, C. G., Chang, P. P. Innate B cell helpers reveal novel types of antibody responses. Nature Immunology. 14, 119-126 (2013).
- Bekeredjian-Ding, I., Jego, G. Toll-like receptors–sentries in the B-cell response. Immunology. 128, 311-323 (2009).
- Mond, J. J., Lees, A., Snapper, C. M. T cell-independent antigens type 2. Annual Review of Immunology. 13, 655-692 (1995).
- Garcia de Vinuesa, C., O’Leary, P., Sze, D. M., Toellner, K. M., MacLennan, I. C. T-independent type 2 antigens induce B cell proliferation in multiple splenic sites, but exponential growth is confined to extrafollicular foci. European Journal of Immunology. 29, 1314-1323 (1999).
- Kurosaki, T., Kometani, K., Ise, W. Memory B cells. Nature Reviews Immunology. 15, 149-159 (2015).
- Xie, P., Stunz, L. L., Larison, K. D., Yang, B., Bishop, G. A. Tumor necrosis factor receptor-associated factor 3 is a critical regulator of B cell homeostasis in secondary lymphoid organs. Immunity. 27, 253-267 (2007).
- Xie, P., Kraus, Z. J., Stunz, L. L., Liu, Y., Bishop, G. A. TNF Receptor-Associated Factor 3 Is Required for T Cell-Mediated Immunity and TCR/CD28 Signaling. The Journal of Immunology. 186, 143-155 (2011).
- Lalani, A. I., Moore, C. R., Luo, C., Kreider, B. Z., Liu, Y., Morse, H. C., Xie, P. Myeloid Cell TRAF3 Regulates Immune Responses and Inhibits Inflammation and Tumor Development in Mice. The Journal of Immunology. 194, 334-348 (2015).
- Lee, S., Nguyen, M. T. Recent advances of vaccine adjuvants for infectious diseases. Immune Network. 15, 51-57 (2015).
- Gavin, A. L., Hoebe, K., Duong, B., Ota, T., Martin, C., Beutler, B., Nemazee, D. Adjuvant-enhanced antibody responses in the absence of toll-like receptor signaling. Science. 314, 1936-1938 (2006).
- Klinman, D. M., Currie, D., Gursel, I., Verthelyi, D. Use of CpG oligodeoxynucleotides as immune adjuvants. Immunological Reviews. 199, 201-216 (2004).
- Gan, S. D., Patel, K. R. Enzyme immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay. Journal of Investigative Dermatology. 133, 12 (2013).
- Shah, K., Maghsoudlou, P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA): the basics. British Journal of Hospital Medicine. 77, 98-101 (2016).
- Nencini, F., Pratesi, S., Petroni, G., Matucci, A., Maggi, E., Vultaggio, A. Assays and strategies for immunogenicity assessment of biological agents. Drug Development Research. 75, 4-6 (2014).
- Haber, E., Page, L. B., Richards, F. F. Radio immunoassay employing gel filtration. Analytical Biochemistry. 12, 163-172 (1965).
- Yalow, R. S., Berson, S. A. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man. 1960. Obesity Research. 4, 583-600 (1996).
- Lequin, R. M. Enzyme immunoassay (EIA)/enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Clinical Chemistry. 51, 2415-2418 (2005).
- Wreghitt, T. G., Tedder, R. S., Nagington, J., Ferns, R. B. Antibody assays for varicella-zoster virus: comparison of competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), competitive radioimmunoassay (RIA), complement fixation, and indirect immunofluorescence assays. Journal of Medical Virology. 13, 361-370 (1984).
- Mathew, B. C., Biju, R. S., Thapalia, N. An overview of electrochemiluminescent (ECL) technology in laboratory investigations. Kathmandu University Medical Journal. 3, 91-93 (2005).
- Mikulskis, A., Yeung, D., Subramanyam, M., Amaravadi, L. Solution ELISA as a platform of choice for development of robust, drug tolerant immunogenicity assays in support of drug development. The Journal of Immunological Methods. 365, 38-49 (2011).
- Wadhwa, M., Bird, C., Dilger, P., Gaines-Das, R., Thorpe, R. Strategies for detection, measurement and characterization of unwanted antibodies induced by therapeutic biologicals. The Journal of Immunological Methods. 278, 1-17 (2003).
- Wolforth, J. B. Methods of Blood Collection in the Mouse. Laboratory Animals. 29, 47-53 (2000).
- Stunz, L. L., Busch, L. K., Munroe, M. E., Sigmund, C. D., Tygrett, L. T., Waldschmidt, T. J., Bishop, G. A. Expression of the Cytoplasmic Tail of LMP1 in Mice Induces Hyperactivation of B Lymphocytes and Disordered Lymphoid Architecture. Immunity. 21, 255-266 (2004).
- Xie, P. TRAF molecules in cell signaling and in human diseases. Journal of Molecular Signaling. 8, 7 (2013).
- Lalani, A. I., Zhu, S., Gokhale, S., Jin, J., Xie, P. TRAF molecules in inflammation and inflammatory diseases. Current Pharmacology Reports. 4, 64-90 (2018).
- Tate, J., Ward, G. Interferences in immunoassay. The Clinical Biochemist Reviews. 25, 105-120 (2004).
- Specter, S., Friedman, H. Age- and sex-related differences in antibody formation and blastogenic responsiveness of splenocytes from RIII mice developing virus-induced mammary adenocarcinoma. The Journal of the National Cancer Institute. 67, 1347-1351 (1981).
- Giefing-Kroll, C., Berger, P., Lepperdinger, G., Grubeck-Loebenstein, B. How sex and age affect immune responses, susceptibility to infections, and response to vaccination. Aging Cell. 14, 309-321 (2015).
- Kaminski, D. A., Stavnezer, J. Antibody class switching differs among SJL, C57BL/6 and 129 mice. International Immunology. 19, 545-556 (2007).
- Sellers, R. S., Clifford, C. B., Treuting, P. M., Brayton, C. Immunological variation between inbred laboratory mouse strains: points to consider in phenotyping genetically immunomodified mice. Veterinary Pathology. 49, 32-43 (2012).
- Conour, L. A., Murray, K. A., Brown, M. J. Preparation of animals for research–issues to consider for rodents and rabbits. Institute of Laboratory Animal Resources Journal. 47, 283-293 (2006).
- Vlkova, M., Rohousova, I., Hostomska, J., Pohankova, L., Zidkova, L., Drahota, J., Valenzuela, J. G., Volf, P. Kinetics of antibody response in BALB/c and C57BL/6 mice bitten by Phlebotomus papatasi. PLOS Neglected Tropical Diseases. 6, 1719 (2012).
- Mestas, J., Hughes, C. C. Of mice and not men: differences between mouse and human immunology. The Journal of Immunology. 172, 2731-2738 (2004).
- Ruane, D., Chorny, A., Lee, H., Faith, J., Pandey, G., Shan, M., Simchoni, N., Rahman, A., Garg, A., Weinstein, E. G., et al. Microbiota regulate the ability of lung dendritic cells to induce IgA class-switch recombination and generate protective gastrointestinal immune responses. The Journal of Experimental Medicine. 213, 53-73 (2016).
- Chorny, A., Puga, I., Cerutti, A. Innate signaling networks in mucosal IgA class switching. Advances in Immunology. 107, 31-69 (2010).
- Van Praet, J. T., Donovan, E., Vanassche, I., Drennan, M. B., Windels, F., Dendooven, A., Allais, L., Cuvelier, C. A., van de Loo, F., Norris, P. S., et al. Commensal microbiota influence systemic autoimmune responses. The EMBO Journal. 34, 466-474 (2015).
- Nguyen, Q. N., Himes, J. E., Martinez, D. R., Permar, S. R. The Impact of the Gut Microbiota on Humoral Immunity to Pathogens and Vaccination in Early Infancy. PLOS Pathogens. 12, 1005997 (2016).
- Jeevan-Raj, B. P., Robert, I., Heyer, V., Page, A., Wang, J. H., Cammas, F., Alt, F. W., Losson, R., Reina-San-Martin, B. Epigenetic tethering of AID to the donor switch region during immunoglobulin class switch recombination. The Journal of Experimental Medicine. 208, 1649-1660 (2011).
- Chen, Z., Getahun, A., Chen, X., Dollin, Y., Cambier, J. C., Wang, J. H. Imbalanced PTEN and PI3K Signaling Impairs Class Switch Recombination. The Journal of Immunology. 195, 5461-5471 (2015).
- Boboila, C., Yan, C., Wesemann, D. R., Jankovic, M., Wang, J. H., Manis, J., Nussenzweig, A., Nussenzweig, M., Alt, F. W. Alternative end-joining catalyzes class switch recombination in the absence of both Ku70 and DNA ligase 4. The Journal of Experimental Medicine. 207, 417-427 (2010).
- Shah, H. B., Koelsch, K. A. B-Cell ELISPOT: For the Identification of Antigen-Specific Antibody-Secreting Cells. Methods in Molecular Biology. 1312, 419-426 (2015).
- Bonsignori, M., Moody, M. A. Simultaneous Detection of Antigen-Specific IgG- and IgM-Secreting Cells with a B Cell Fluorospot Assay. Cells. 1, 15-26 (2012).
- Sasaki, Y., Derudder, E., Hobeika, E., Pelanda, R., Reth, M., Rajewsky, K., Schmidt-Supprian, M. Canonical NF-kappaB activity, dispensable for B cell development, replaces BAFF-receptor signals and promotes B cell proliferation upon activation. Immunity. 24, 729-739 (2006).
- Goodlad, J. R., Macartney, J. C. Germinal-center cell proliferation in response to T-independent antigens: a stathmokinetic, morphometric and immunohistochemical study in vivo. European Journal of Immunology. 25, 1918-1926 (1995).
- Xie, P., Poovassery, J., Stunz, L. L., Smith, S. M., Schultz, M. L., Carlin, L. E., Bishop, G. A. Enhanced Toll-like receptor (TLR) responses of TNFR-associated factor 3 (TRAF3)-deficient B lymphocytes. Journal of Leukocyte Biology. 90, 1149-1157 (2011).
- Kaku, H., Horikawa, K., Obata, Y., Kato, I., Okamoto, H., Sakaguchi, N., Gerondakis, S., Takatsu, K. NF-kappaB is required for CD38-mediated induction of C(gamma)1 germline transcripts in murine B lymphocytes. International Immunology. 14, 1055-1064 (2002).
- Dudley, D. D., Chaudhuri, J., Bassing, C. H., Alt, F. W. Mechanism and control of V(D)J recombination versus class switch recombination: similarities and differences. Advances in Immunology. 86, 43-112 (2005).
- Lange, H., Hecht, O., Zemlin, M., Trad, A., Tanasa, R. I., Schroeder, H. W., Lemke, H. Immunoglobulin class switching appears to be regulated by B-cell antigen receptor-specific T-cell action. European Journal of Immunology. 42, 1016-1029 (2012).
- Moore, C. R., Liu, Y., Shao, C. S., Covey, L. R., Morse, H. C., Xie, P. Specific deletion of TRAF3 in B lymphocytes leads to B lymphoma development in mice. Leukemia. 26, 1122-1127 (2012).
- Bergmann, B., Grimsholm, O., Thorarinsdottir, K., Ren, W., Jirholt, P., Gjertsson, I., Martensson, I. L. Memory B cells in mouse models. Scandinavian Journal of Immunology. 78, 149-156 (2013).
- McHeyzer-Williams, L. J., Milpied, P. J., Okitsu, S. L., McHeyzer-Williams, M. G. Class-switched memory B cells remodel BCRs within secondary germinal centers. Nature Immunology. 16, 296-305 (2015).
- Elgueta, R., Marks, E., Nowak, E., Menezes, S., Benson, M., Raman, V. S., Ortiz, C., O’Connell, S., Hess, H., Lord, G. M., et al. CCR6-dependent positioning of memory B cells is essential for their ability to mount a recall response to antigen. The Journal of Immunology. 194, 505-513 (2015).
