Summary

Ein Mausmodell Ablenkung Osteogenesis

Published: November 14, 2018
doi:

Summary

Wir präsentieren eine tibiale Ablenkung Osteogenesis Mausmodell mit einem maßgeschneiderten Distraktor entwickelt. Die Verwendung einer Maus als ein Analyseziel ist vorteilhaft für die Förderung der Forschung.

Abstract

Ablenkung Osteogenesis (DO) ist ein chirurgisches Verfahren, das Skelett Geweberegeneration ohne Stammzelltransplantation beinhaltet. Eine-Modell besteht aus den folgenden drei Phasen: die Phase der Latenz nach Osteotomie und Vermittlung von externen Distraktor; die Ablenkung-Phase, wobei die getrennten Knochenenden allmählich und kontinuierlich abgelenkt werden; und die Konsolidierungsphase. Dieses maßgeschneiderte Distraktor verwendet für DO besteht aus zwei unvollständige Acrylharz Ringen und einer Erweiterung-Schraube. Der Prozess wurde von einer Form mit Silikon Abformmasse und dann erstellen maßgeschneiderte Distraktor initiiert. Dental, Harz wurde in die Schalung gemacht der Abformmasse Silikon gegossen, und es durfte polymerisieren um die unvollständige Harz Ringe für die maßgeschneiderte Distraktor erforderlich zu erstellen. Diese Ringe wurden mit einer Erweiterung-Schraube mit transparentem Harz befestigt. Der maßgeschneiderte Distraktor erstellt über diesen Ansatz hing an der Tibia von Mäusen. Die Tibia war an der Vorrichtung mit einem Paar von 25 G Nadeln proximal, ein paar 27 G Nadeln nach distal, befestigt und Acrylharz. Nach einer Latenzzeit von 5 Tagen leitete Ablenkung mit einer Rate von 0,2 mm/12 h. Für 8 Tage, wodurch insgesamt 3,2 mm Abstand der Verlängerung setzte. Die Mäuse wurden 4 Wochen nach Ablenkung geopfert. Knochenbildung in der Ablenkung Lücke war mit Röntgen und Histologie bestätigt.

Introduction

Ablenkung Osteogenesis (DO) ist eine etablierte Behandlungsmethode für eine Vielzahl von Skeletterkrankungen wie Gliedmaßen Länge Abweichungen, Knochendefekte und Gliedmaßen Missbildungen1. Diese einzigartige Behandlungsstrategie basiert auf der “Spannung Prinzip” von Ilizarov vorgeschlagen. Diese Methode erfordert mehrere Tage für Latenz, mehrere Wochen für aktive Ablenkung und mehrere Monate für die Konsolidierung, bis der Reifen Knochen gebildeten2ist.

Die hypoxischen Gegebenheiten durch Blockade der Blut fließen3,4 und mechanische Stimulation5,6 sind besonders wichtig bei der Heilung zu tun. Hypoxie-induzierte Angiogenese trägt Sauerstoff, Nährstoffen, lösliche Faktoren und Zellen für die Reparatur von Gewebe lokal über die Blutbahn notwendig. Mechanische Stimulation durch Erweiterung Betrieb führt biologische Reaktionen wie Differenzierung von mesenchymalen Stammzellen, Knochenbildung, Verkalkung und Umbau. Serielle Behandlung ermöglicht die Bildung von nicht nur harte Gewebe, sondern auch Weichteile, wie Nerven, Muskeln, Blutgefäße und Hautgewebe, ohne die Notwendigkeit für Stammzelltransplantationen. Daher gilt eine-Modell als ein hervorragendes Modell für die Regeneration von verschiedenen Geweben zu analysieren.

Kaninchen und Hunde sind die am häufigsten verwendeten Tiere in der Grundlagenforschung für DO; Allerdings gibt es einige Analysetools für diese Tiere. Die Verwendung von einem Mausmodell ermöglicht eine genauere Analyse. Es eignet sich besonders für Experimente mit Knockout-Mäusen. Allerdings sollte bei der Verwendung einer Maus als ein Versuchstier eine Extensionsgerät erstellt werden. Hier entwickelt präsentieren wir Ihnen eine Maus Tibia kann Modellieren mit eine maßgeschneiderte Distraktor erstellt mit einem Dentallabor Werkzeug und Technik, die in einer früheren Studie verwendet wurde.

Protocol

Alle Experimente wurden gemäß Protokollen durch die Animal Care and Use Committee unserer Institution genehmigt durchgeführt. Sterilisieren Sie alle Instrumente vor dem Eingriff. 1. Vorbereitung einer Form für die Erstellung von maßgeschneiderten Distraktor Machen Sie zwei unvollständige Ringe (Außendurchmesser, 20 mm, Innendurchmesser 10 mm), die ein Teil der Distraktor, mit einem Blatt von Paraffinwachs (145 x 74 mm) mit einem Evans-Wachs-Carver sind. 4 der gleichen …

Representative Results

Abbildungen 1A und 1 b präsentieren unvollständige Ringe (äußeren Durchmesser, 20 mm, innere Durchmesser, 10 mm, 5 mm Dicke) mit Paraffinwachs. Zwei Wachsmodelle in Silikon Abformmasse eingebettet waren, und eine Form für die Harz-Ringe (Abbildung 1C) gegründet. Polymerisierten Harz wurde sofort in dieser Form gegossen wurden, und Harz Ringe (Abbildung 1D)….

Discussion

Wenn ein großes Tier als ein experimentelles Modell verwendet wird, eine fertige Extensionsgerät kann verwendet werden, und es ist einfach zu erhalten gute Fixierung und bewerten die Erweiterung Operation selbst und die Erweiterung. Wenn eine Maus als ein experimentelles Modell verwendet wird, ist es jedoch notwendig, einige oder alle Geräte zu entwickeln. Isefuku Et Al. und Tay Et Al. das Gerät aus und erstellt ein Maus-Modell7,8. Carvahjo<…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Die Autoren danken Frau Makiko Kato für die Bereitstellung von Ermutigung, diese Studie abzuschließen. Wir danken auch die Division von Versuchstieren und Medical Research Engineering, Nagoya University Graduate School of Medicine, für die Unterbringung von Mäusen.

Materials

Paraffin wax YAMAHACHI DENTAL MFG. CO. For preparation a mold for resin rings
Labocone putty GC Corporation For preparation a mold for resin rings
Utility wax GC Corporation For preparation a mold for resin rings
Expansion screw Ortho Dentaurum 600-301-30 Component of custom-made distractor
Unifast III GC Corporation Immediate polymerization resin Component of custom-made distractor
Ortho Crystal NISSIN Transparent resin Component of custom-made distractor
25-gauge needle TERUMO NN-2516R For custom-made distractor
27-gauge needle TERUMO NN-2719S For custom-made distractor
ICR mouse Chubu Kagaku Shizai Corporation Experimental animal
Somnopentyl Kyoritsu Seiyaku Pentobarbital sodium salt
Isoflurane FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation 099-06571 Isoflurane inhalation solution

References

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Cite This Article
Fujio, M., Osawa, Y., Matsushita, M., Ogisu, K., Tsuchiya, S., Kitoh, H., Hibi, H. A Mouse Distraction Osteogenesis Model. J. Vis. Exp. (141), e57925, doi:10.3791/57925 (2018).

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