Induction chirurgicale simple de perte auditive conductrice avec vérification utilisant la visualisation d'otoscope et la réponse comportementale de sursaut de clap dans le rat

Summary

Ici, nous présentons un protocole pour établir une induction conductrice reproductible de perte auditive par la perforation et la vérification chirurgicales de membrane tympanique par la visualisation d’otoscope et l’évaluation comportementale par le sursaut de clap.

Abstract

La perte auditive conductrice (LCH) est une déficience auditive répandue chez l’homme. Le but du protocole est de décrire une procédure chirurgicale simple pour induire l’ACh chez les rongeurs. Le protocole démontre CHL par perforation de membrane tympanique. La vérification de la chirurgie de LCH était par l’examen d’otoscope et l’évaluation comportementale par la réponse de sursaut de clap, reproductible et fiable, et sont des méthodes simples pour démontrer la perte d’audition s’est produite. La procédure simple de l’EsCH est avantageuse en raison de sa reproductibilité et de sa souplesse à différentes activités de recherche sur les pertes auditives. Les limites d’induire CHL par une approche chirurgicale sont associées à la courbe d’apprentissage pour effectuer l’intervention chirurgicale et la confiance dans l’examen audiologique. Induire une déficience auditive par l’UneCH permet d’étudier facilement les manifestations neuronales et les résultats comportementaux de la perte auditive.

Introduction

La prévalence de la perte auditive chez les enfants et les adultes est d’environ 19,5 %¹ et 15,2 %² respectivement. Cependant, environ 39,3 % de tous les nouveau-nés ayant subi un dépistage auditif anormal ne reçoivent pas de traitement correctif tel que rapporté par les Centers for Disease Control³. La perte auditive est une condition largement étudiée, et le rongeur est un modèle robuste pour étudier les troubles normaux liés à l’audition et l’ouïe^4,5,6,7^{,8,9 ,10,11,12,13,14,15}. Les troubles auditifs tels que la perte auditive conductrice (LCH) entraînent une augmentation de la dépression synaptique à court terme dans le cortex auditif⁴, ce qui entraîne des pentes psychométriques moins profondes associées aux seuils de détection de la modulation de fréquence. ⁵. Les modèles de perte auditive conductrice par l’ablation/déplacement chirurgical du malleus, de la ponction de membrane tympanique (TM) ou du bouchon d’oreille sont facilement employés et permettent l’induction rapide du modèle de perte auditive^{5,14 ,15,16,17,18}. L’objectif du protocole et de la méthode actuels est de démontrer un modèle simple et reproductible de CHL chez les rongeurs.

Le protocole actuel est peu coûteux (300 $US avec tous les outils) et facilement modifiable à différentes activités de recherche. Le rat a eu des évaluations détaillées de l’anatomie de l’oreille moyenne^{19,20,21,22,23}, approches chirurgicales²⁴, modèles dans les médias d’otite^{25, 26,27} et TM rinçant la régénération^{16,17,18,28,29,30}, ce qui en fait un modèle idéal pour étudier perte. Ici, une procédure simple d’induction de CHL est décrite avec la vérification par l’otoscope et l’évaluation comportementale avec la réponse de sursaut de clap dans le rat, qui peut alors être employée pour explorer des séquelles additionnelles de perte d’audition. La procédure de LCH est induite par la perforation chirurgicale du TM. La vérification de la procédure de l’OLC est effectuée par visualisation d’otoscope pour déterminer l’absence du TM. L’évaluation comportementale est effectuée par un niveau de pression sonore élevé de décibels (dB) (SPL) à la main. Cette méthode a été appliquée précédemment dans une variété de rongeurs. Il est facile à reproduire, produit des différences psychométriques robustes et des changements dans les réponses physiologiques neuronales^4,5,16,17,18.

Protocol

La présente étude et les procédures ont été approuvées par les comités d’éthique de la recherche animale de la City University de Hong Kong, de l’Université de Hong Kong et du Département de la santé de la Région administrative spéciale de Hong Kong. 1. Animaux Utiliser des rats Sprague-Dawley (SD) de deux mois (N ‘ 90, 200-250 g).REMARQUE : Les rongeurs ont été fournis par l’unité des animaux de laboratoire accréditée de l’Université de Hong Kong. Ma…

Representative Results

La procédure simple de LCH a été exécutée sur 90 rats et de ce groupe 2 a eu le saignement significatif et 2 n’a pas eu la perte d’audition le lendemain comme évalué par le sursaut comportemental de clap. Ces quatre rats ont été jetés. Les rats doivent être jetés comme décrit par les raisons dans la discussion en raison de complications. Induire la ponction tM et/ou le déplacement/déplacement de malleus (figure 2B) suscitent des manifestations …

Discussion

Nous décrivons une induction chirurgicale simple de CHL avec la vérification utilisant la visualisation d’otoscope et la réponse comportementale de sursaut de clap dans le rat. Ici nous démontrons la méthode sur le rat et précédemment cette méthode a été appliquée aux gerbilles et aux souris. La méthode peut facilement être adoptée à d’autres rongeurs. L’induction de la LCH permet l’étude d’une forme subtile de perte auditive qui se manifeste par des altérations corticales auditives et des résultats com…

Materials

Latex, polyvinyl or nitrile gloves	AMMEX		Use unpowdered gloves 8-mil
Micro spring scissors (see Fig. 1b)	RWD Life Science	S11035-08	8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice
Otoscope mini 3000	HEINE	D-008.70.120M	Standard LED otoscope will suffice
Rat or mouse	JAX labs		Any small rodent
Small rodent cage	Tecniplast	1284L	Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2