实验家兔硬蜱的多用途模型
Summary
我们开发了一个简单和多功能的系统, 以满足实验兔的硬蜱。我们的非费力协议使用容易接近的材料并且可以根据不同的实验设置的要求调整。该方法允许舒适的监测和/或取样的蜱在整个喂养期间。
Abstract
在蜱的研究中使用活的动物对于各种实验目的, 包括在实验室中维持硬蜱菌落是至关重要的。在蜱, 所有发育阶段 (除了鸡蛋) 是 hematophagous, 并获得一个血餐时, 附着在他们的脊椎动物寄主是必不可少的, 成功地完成他们的生命周期。在这里, 我们演示了一个简单的方法, 使用方便可开启式胶囊喂养的硬蜱在兔子。所提出方法的优点包括简单性、工期短和对特定实验要求的需要进行最重要的多功能调整。该方法使在同一动物上使用多个腔 (各种大小) 成为可能, 允许多阶段或不同实验组喂养, 同时减少整体动物需求。使用的非刺激性和容易接近的材料减少了对动物的不适, 这可以很容易地从实验中恢复, 并提供通过或重用, 如果伦理协议允许它。
Introduction
硬蜱 (硬蜱科) 是众所周知的缓慢喂养节肢动物, 可以附加在主机上数天, 或几周, 取决于物种和发育阶段1。这些强制性的 hematophagous 节肢动物是多种传染性药物的载体, 如细菌、原生动物和病毒, 从而对人类和动物健康造成重大风险1。在研究蜱生物或评估新的控制方法时, 建立有效的蜱进给系统是至关重要的, 以便有效地设计实验并完成研究的目标。最近, 一些人工蜱喂养系统 (避免使用活的动物) 已经开发了2,3,4 , 他们应该尽可能使用。然而, 这些系统无法完全取代活体动物的蜱喂养, 而且它们不适合用于科学研究所需的许多生理条件。因此, 在某些情况下, 实验动物宿主的使用对于保证实验结果的相关性至关重要。
新西兰兔的实验室已证明是最适合和可访问的主机为几个 ixodid 蜱物种5,6,7,8,9。常用的两种方法是对家兔进行蜱喂养: a) 用棉布或袜子覆盖的兔耳喂养6、7和 b) 在棉袋中喂养9, 尼龙瓶10或氯丁橡胶11室粘在兔子的背上。喂养兔子的耳朵不是一个优雅的系统, 因为蜱 (特别是早期阶段, 幼虫或若虫) 可能爬行和附着在耳道深, 这是不舒服的动物, 使监测蜱喂养和/或恢复肿胀蜱很难。这个系统也仅限于两个刻度组的耳朵完全覆盖的袜子保护的伊丽莎白的衣领, 代表了一个很大的不适的动物。其他系统9,10,11肯定更先进, 非常适合于硬蜱殖民地维护。然而, 它们的数量有限的实验组放置在兔子, 以及在可修改的大小/形状的喂养室。此外, 这些协议往往需要蹒跚的后兔腿, 以避免擦伤和使用伊丽莎白的衣领, 以防止梳理。
在此, 我们提出了一个简单的, 非费力的和非常有效的方法, 以满足多组的硬蜱在封闭室粘着的兔子背部覆盖的夹克, 消除了对伊丽莎白时代的衣领或在实验中步履蹒跚的需要。具体来说, 我们的系统使用的弹性胶囊由乙烯-醋酸乙烯酯 (EVA) 泡沫板覆盖的蚊帐和粘附到剃光兔背部与快速固化 (3 分钟) 无刺激性乳胶胶水。这种技术允许附着多个理想大小或形状的胶囊, 并在实验后的几周内完全恢复家兔。该系统主要适用于若虫和成人硬蜱阶段, 但对幼虫喂养也有少许修改。以 EVA 泡沫为基础的硬蜱喂养方法可以适应其他类型的脊椎动物宿主, 例如绵羊 (这是本文所示的替代品之一)。
Protocol
Representative Results
Discussion
这整个协议中最重要的一步是将胶囊牢固地粘在剃光的皮肤上。因此, 恒定的压力至少3分钟是关键的, 特别是在角落。当接种的蜱进入胶囊, 这是重要的是要把它们深入到对面的角落, 从开放的, 以避免蜱逃逸期间的密封。在计划实验时, 确保所有的胶囊都被夹克覆盖, 以避免咀嚼或刮伤。确保夹克的颈部区域足够紧, 以防止咀嚼, 但足够松, 使兔子保持舒适。
所描述的技术的主?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢法国国立农业研究研究所 (INRA)、阿兰伯尼尔 (INRA) 和 Océane Evelyne (Bidel) 的技术援助。肯翠萝 Almazán 得到了来自实验室的研究, 来自于巴斯德研究所的新兴传染病 (LabEx IBEID) 的综合生物学。兔子和绵羊是由 ANSES 购买的。这项工作的一部分由国立卫生研究院资助 RO1AI090062 公园。杰弗里. 布莱尔博士因审阅手稿而被承认。
Materials
| New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg) | Charles River | Strain Code 571 | |
| Rambouillet sheep | Local provider-tick free farm | Female 6 months old | |
| EVA foam 5 mm thick | Cosplay Shop | EVA-PE451kg (950mm x 450mm) | 10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species |
| Foam Sheet 9" X 12" 6 mm-White | Amazon | FOAMSHT6-20 | 6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop |
| Full length rabbit jackets | Harvard Apparatus, Inc. | 620077- medium, 6270078 – large | |
| Non-toxic latex glue | Tear mender | Fabric & Leather Adhesive | |
| Tubular cotton orthopedic stockinette | BSN Medical | 9076 (12-15 cm wide) | |
| Mosquito mesh | Loisirs Creatifs | Very fine filter nylon mesh fabric | Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable. |
| Leukoplast | BSN medical S.A.S | LF 72361-02 | |
| Adhesive hook-and-loop tape | AIEX store | AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour | Fullfiled by Amazon |
| Fast drying glue | Fixtout | Superglue |
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