Summary

ウサギに寄生したマダニの汎用性の高いモデル

Published: October 06, 2018
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Summary

ウサギをハードのダニを餌にシンプルで汎用性の高いシステムを提案します。私たち非骨の折れるプロトコルやすい材料を使用して、さまざまな実験的設定の要件に応じて調整することができます。メソッドでは、快適な監視および/または全体の給餌期間中にダニのサンプリングをことができます。

Abstract

ダニ研究の動物の使用は、さまざまな実験室でマダニの植民地の維持を含む実験の目的のため重要です。ダニ、(卵) を除くすべての発達段階は、吸血性、血食事、脊椎動物のホストに接続されている場合を取得自分の生活サイクルが正常に完了のために不可欠。ウサギのハードのダニの餌に簡単に開閉式のカプセルを使用する単純な方法を示します。提案手法の利点には、そのシンプルさ、短い期間と実験の特定の要件のニーズに最も重要な汎用性の高い調整があります。メソッドになります動物全体的な要件を軽減しながら複数の段階または別の実験グループの供給を可能にする同じ動物に (各種サイズ) の複数室の使用可能。非刺激性、簡単にアクセスできる材料を使用ことができます簡単に実験から回復し採用のために提供または倫理的なプロトコルは、それを許可されている場合を再利用、動物に不快感を最小限に抑えます。

Introduction

ハード タイマー刻み (された) 低速送り節足動物としてよく知られているし、数日間ホストに付けることができるまたは週間、種に応じて、発達段階1。これらの義務の吸血性節足動物はさまざまな細菌、原虫、ウイルスなどの病原菌の媒介し、このように人間と動物の健康1に重大なリスクを提示します。ときダニの生物学を勉強したり、新しい制御法の評価、飼養管理方式の効果的な目盛りの確立は効果的に実験を設計し、研究の目的を達成するために重要。最近、(生きている動物の使用を避ける) いくつかの人工チック給餌システムの開発2,3,4をされている、可能な限り使用されるべきであります。しかし、これらのシステムは、ティック、生きている動物の給餌を完全に置き換えることができるしていない、彼らは科学的な研究に必要な多くの生理学的な条件のための適切な代替ではありません。したがって、いくつかのケースで実験動物のホストの使用は、実験結果の妥当性を保証することが重要です。

研究所ニュージーランドのウサギは、いくつかマダニ マダニ種5,6,7,8,9の最も適切なアクセス可能なホストに示されています。ウサギの餌目盛りの 2 つの一般的な戦略が頻繁に使用されている: a) コットン布や靴下67で覆われているウサギの耳に餌と b) 綿袋9、ナイロン ボトル10またはネオプレンで給餌部屋11ウサギの背中に釘付け。ウサギの耳に餌はエレガントなシステム タイマー刻み (特に初期段階、幼虫や幼虫) 可能性がありますクロールし、動物のために快適ではないし、ダニの餌やのリカバリの監視は、外耳道の奥深くに添付充血ダニは難しい。このシステムは動物のためのかなりの不快感を表すエリザベスつばによって保護されたソックスで覆われて完全に耳に 2 つだけのティック グループも。他システムの9,10,11は間違いなくより高度なマダニ植民地維持のために適して。しかし、ウサギは、実験グループの数だけでなく、授乳室の変更のサイズ/形状に制限されます。さらに、これらのプロトコルがよく傷および手入れをすることを防ぐためにエリザベス朝の首輪の使用を避けるために後部のウサギの足をちょこちょこ必要があります。

ここエリザベス カラーの必要性を除去する実験中にちょこちょこチャンバ ジャケットで覆われて戻ってウサギに釘付けのハード タイマー刻みの複数のグループをフィードする単純な非骨の折れると非常に効果的な手法を提案します。具体的には、当社のシステムは、蚊メッシュで覆われ、剃毛のウサギに戻って高速凝固 (3 分) 非刺激性ラテックス接着剤で接着エチレンビニル アセテート (EVA) 発泡シートから作られた弾性のカプセルを使用します。このテクニックにより、望みの大きさや形の複数のカプセルの添付ファイルと実験後の数週間、ウサギが完全に回復します。システムは主にマダニ幼虫および大人の段階に適したが、少しの変更で幼虫も餌の使用することができます。供給ハードのティックの EVA フォーム ベースの方法は、脊椎動物のホスト (本稿での選択肢の 1 つとして示されて) いる羊などの他の種類に適応する可能性があります。

Protocol

注: この研究では、食物と一緒に標準ケージの中で維持されたウサギと水提供食品、環境・衛生・安全 (ANSES) 認定動物施設カルカソンヌ、フランスでのフランス語代理店の自由。動物が異常な皮膚反応や健康上の問題の合併症のための 2 つの経験豊富な技術者が 2 回毎日。実験室は、タイマー刻みの偶発的なエスケープを避けるために両面テープで戸口のインテリアをフレーミングに?…

Representative Results

ここで提案する初めてのマダニは EVA 発泡体の供給の詳細なステップバイ ステップ法 (図 1および 図 2) のジャケットで覆われて剃毛ウサギの背中に適用されるカプセル。このプロトコルは、同じホスト上の別のティック グループが必要とマダニの大量飼育にも使える各種実験に適しています。研究室で主に吸…

Discussion

このプロトコルの全体の最も重要なステップは、剃毛肌にしっかりとカプセルを接着することです。このため、少なくとも 3 分間一定の圧力は、コーナーで特に重要です。それはそれらを適用する重要なカプセルにダニを接種シールの中にカチカチのエスケープを避けるためにオープンされているものから反対側の隅に深く。実験を計画するときは、すべてのカプセルが咀嚼や傷によって損?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

我々 は、イブリン ル Naour、研究所フランス国立農業研究 (INRA)、アラン ・ ベルニエ (INRA) ホテル ル Bidel (ANSES) ・の技術的な支援を認めます。コンスエロ ・ Almazán は、卓越性、統合的な生物学の新興感染症 (LabEx IBEID)、パスツール研究所の研究室から奨学金によって支えられました。ウサギと羊が ANSES によって購入されました。この仕事の一部健康グラント RO1AI090062 Y の公園に国立衛生研究所によって資金を供給されました。博士ジェフリー ・ l ・ ブレアは、原稿のレビューに認められています。

Materials

New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg) Charles River  Strain Code 571
Rambouillet sheep Local provider-tick free farm Female 6 months old
EVA foam 5 mm thick  Cosplay Shop EVA-PE451kg (950mm x 450mm) 10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species
Foam Sheet 9" X 12" 6 mm-White Amazon FOAMSHT6-20 6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop
Full length rabbit jackets  Harvard Apparatus, Inc.  620077- medium, 6270078 – large 
Non-toxic latex glue  Tear mender  Fabric & Leather Adhesive
Tubular cotton orthopedic stockinette BSN Medical 9076 (12-15 cm wide)
Mosquito mesh  Loisirs Creatifs Very fine filter nylon mesh fabric Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable.
Leukoplast  BSN medical S.A.S LF 72361-02
Adhesive hook-and-loop tape AIEX store AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour Fullfiled by Amazon
Fast drying glue   Fixtout  Superglue

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Cite This Article
Almazán, C., Bonnet, S., Cote, M., Slovák, M., Park, Y., Šimo, L. A Versatile Model of Hard Tick Infestation on Laboratory Rabbits. J. Vis. Exp. (140), e57994, doi:10.3791/57994 (2018).

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