Zor kene istila laboratuvar tavşan çok yönlü bir Model
Summary
Biz sert keneler laboratuvar tavşan beslemek için basit ve çok yönlü bir sistem geliştirdik. Zahmetli bizim iletişim kuralı kolayca erişilebilir malzemeler kullanır ve çeşitli deneysel ayarları gereksinimlerine bağlı olarak ayarlanabilir. Yöntemi rahat izleme ve/veya keneler örnekleme tüm beslenme süresi boyunca sağlar.
Abstract
Deneysel amaçlar laboratuvarda zor kene kolonileri bakım da dahil olmak üzere çeşitli kene araştırma canlı hayvan kullanımı önemlidir. Keneler, hematophagous (yumurta) hariç tüm gelişim dönemleri vardır ve yemek kan omurgalı onların ana bilgisayarlarına bağlı edinme onların yaşam döngüsü başarıyla tamamlanması için esastır. Burada tavşan sert keneler, beslenme için kolayca açılabilir kapsül kullanan basit bir yöntemi gösterir. Önerilen yöntemin avantajları, sadeliği, kısa süreli ve belirli deneysel gereksinimleri ihtiyaçlarına en önemlisi çok yönlü ayar içerir. Yöntem birden çok chambers (irili ufaklı) kullanımı birden fazla aşamaları veya farklı deneysel grup genel olarak hayvan gereksinimi azaltırken besleme izni aynı hayvan üzerinde mümkün kılar. Kullanılan Sigara rahatsız edici ve kolayca erişilebilen malzemelerin rahatsızlık kolayca bir deneyden kurtarıldı ve evlat edinmek için sunulan veya etik Protokolü izin veriyorsa yeniden hayvanlara en aza indirir.
Introduction
Sert keneler (Ixodidae) yavaş beslenme eklembacaklılar bilinen ve bir ana bilgisayarda bir kaç günlüğüne eklenebilir ya da1hafta, bu tür bağlı olarak ve gelişimsel sahne. Bu zorunlu hematophagous eklembacaklılar çok çeşitli virüsler, bakteriler ve tek hücreli gibi bulaşıcı ajanların vektörleridir ve böylece insan ve hayvan sağlığı1için önemli bir risk mevcut. Ne zaman kene biyoloji okuyan veya yeni kontrol yöntemleri değerlendirilmesi, etkili bir kene besleme sistemi kurulması amacıyla etkili bir şekilde deneyler tasarım ve çalışma goal(s) gerçekleştirmek çok önemlidir. Son zamanlarda, birkaç yapay kene besleme sistemleri (canlı hayvan kullanımı kaçınarak) Gelişmiş2,3,4 olmuştur ve mümkün olduğunda kullanılmalıdır. Ancak, bu sistemler üzerinde canlı hayvan besleme kene tamamen değiştirmeyi mümkün olmamıştır ve bilimsel çalışmalar için gerekli birçok fizyolojik koşulları için uygun yerine değildir. Bu nedenle, bazı durumlarda, deneysel hayvan ana kullanımı deneysel sonuçlar uygunluğunu garanti etmek çok önemlidir.
Laboratuvar Yeni Zelanda tavşanları birkaç iksodid kene tür5,6,7,8,9için en uygun ve erişilebilir ana olmak göstermiştir. Tavşan besleme kene iki ortak strateji sık kullanılmıştır: a) tavşan kulakları pamuk bez veya çorap6,7ile kaplı beslenirler ve b) besleme Pamuk çanta9, naylon şişeler10 veya neopren Chambers’ı11 tavşan arkaya yapıştırılmış. Keneler (özellikle erken aşamalarında, larva veya perileri) tarama ve derin kulak hayvan için rahatsız edici ve kene besleme ve/veya kurtarılması izleme yapar kanalda, eklemek çünkü tavşan kulaklara besleme zarif bir sistem değildir tıkanmış keneler zor. Bu sistem Ayrıca hayvan için önemli bir rahatsızlık temsil eden sadece iki kene grup tamamen Elizabethan yaka tarafından korunan çorap kapalı kulakları üzerinde sınırlıdır. Diğer sistemleri9,10,11 kesinlikle daha gelişmiş ve zor kene koloni bakım için uygundur. Ancak, deneysel grupları tavşanı yerleştirilen yanı sıra değiştirilebilir boyutları/şekiller besleme odalarının sınırlıdır. Ayrıca, bu iletişim kuralları kez tırmalamak ve damat önlemek için Elizabethan yaka kullanımını önlemek için arka tavşan bacağı hobbling gerektirir.
Burada biz Elizabethan yaka ihtiyacını ortadan kaldırarak veya deneme sırasında hobbling kapalı odalarında geri bir ceket tarafından kapalı tavşan yapıştırılmış sert keneler birden çok grupları beslemek için basit, zahmetli ve çok etkili bir yöntem öneriyorum. Özellikle, sistemimiz elastik kapsül bir etilen-vinil asetat (EVA) köpük tabakası sivrisinek kafes tarafından kaplı ve traş tavşan geri hızlı (3 dk) güçlendirilerek Sigara rahatsız edici lateks tutkalla yapıştırılmış yapılan kullanır. Bu teknik istenen boyutunu veya şeklini birden fazla kapsül ek sağlar ve birkaç hafta sonra Deney tavşanları tamamen iyileşti. Sistem esas olarak nimf ve yetişkin zor onay aşamaları için uygundur, ama küçük bir değişiklik ile de besleme larva için kullanılabilir. EVA köpük tabanlı yöntemleri zor kene besleme için diğer tür omurgalı ana bilgisayarlar, örneğin (ki bu kağıt seçenekleri olarak gösterilir) koyun adapte.
Protocol
Representative Results
Discussion
Tüm bu protokol konusunda en önemli adım traş cilde sıkıca kapsül tutkal etmektir. Bu nedenle, en az 3 dakika sabit basınç özellikle köşelerde önemlidir. Ne zaman kapsül içine keneler aşı, bunları uygulamak önemlidir kene kaçış mühürleme sırasında önlemek için açık bir ters köşeye derin. Deneyler planlarken, tüm kapsül zarar çiğneme veya çizilmemesi önlemek için ceket tarafından tutulduğundan emin ol. Boyun bölgesi ceket yeterince gevşek ama çiğneme tavşan konforlu kalmasın?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Evelyne Le Naour, Fransız Ulusal Enstitüsü Tarım Araştırma (INRA), Alain Bernier (INRA) ve Océane Le Bidel (ANSES) Teknik yardım anıyoruz. Consuelo Almazán bir laboratuvar mükemmellik, bütünleyici biyoloji, ortaya çıkan bulaşıcı hastalıklar (LabEx IBEID), Pasteur Enstitüsü bursu tarafından desteklenmiştir. Tavşan ve koyun ANSES tarafından satın alındı. Bu eser parçası sağlık grant RO1AI090062 Y. Park Ulusal Enstitüleri tarafından finanse edildi. Dr. Jeffrey L. Blair el yazması gözden geçirmek için kabul edilmektedir.
Materials
| New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg) | Charles River | Strain Code 571 | |
| Rambouillet sheep | Local provider-tick free farm | Female 6 months old | |
| EVA foam 5 mm thick | Cosplay Shop | EVA-PE451kg (950mm x 450mm) | 10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species |
| Foam Sheet 9" X 12" 6 mm-White | Amazon | FOAMSHT6-20 | 6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop |
| Full length rabbit jackets | Harvard Apparatus, Inc. | 620077- medium, 6270078 – large | |
| Non-toxic latex glue | Tear mender | Fabric & Leather Adhesive | |
| Tubular cotton orthopedic stockinette | BSN Medical | 9076 (12-15 cm wide) | |
| Mosquito mesh | Loisirs Creatifs | Very fine filter nylon mesh fabric | Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable. |
| Leukoplast | BSN medical S.A.S | LF 72361-02 | |
| Adhesive hook-and-loop tape | AIEX store | AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour | Fullfiled by Amazon |
| Fast drying glue | Fixtout | Superglue |
References
- Sonenshine, D. E., Roe, M. Ticks, People and Animals. Biology of Ticks, Vol I. , (2014).
- Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
- Bonnet, S., Jouglin, M., Malandrin, L., Becker, C., Agoulon, A., L’hostis, M., Chauvin, A. Transstadial and transovarial persistence of Babesia divergens DNA in Ixodes ricinus.ticks fed on infected blood in a new skin-feeding technique. Parasitology. 134 (2), 197-207 (2007).
- Bonnet, S., Liu, X. Laboratory artificial infection of hard ticks: A tool for the analysis of tick-borne pathogen transmission. Acarologia. 52 (4), 453-464 (2012).
- Khols, G. M. Tick rearing methods with special reference to the Rocky Mountain Wood Tick, Dermacentor andersoni Stiles. Culture methods for invertebrate animals. , (1937).
- Faccini, J. L. H., Chacon, S. C., Labruna, M. B. Rabbits (Oryctolagus cuniculus) as experimental hosts for Amblyomma dubitatum Neumann (Acari: Ixodidae) [Coelhos (Oryctolagus cuniculus) como hospedeiros experimentais de Amblyomma dubitatum Neumann (Acari: Ixodidae). Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia. 58 (6), 1236-1239 (2006).
- Chacon, S. C., Freitas, L. H. T., Barbieri, F. S. Relationship between weight and number of engorged Amblyomma cooperi. Nuttal (sic) and Warburton, 1908 (Acari: Ixodidae) larvae and nymphs and eggs from experimental infestations on domestic rabbits. Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 13, 6-12 (2004).
- Sonenshine, D. E. Maintenance of ticks in the laboratory. Maintenance of Human, Animal, and Plant Pathogen Vectors. , (1999).
- Levin, M. L., Schumacher, L. B. M. Manual for maintenance of multi-host ixodid ticks in the laboratory. Experimental and Applied Acarology. 70 (3), 343-367 (2016).
- Bouchard, K. R., et al. Maintenance and experimental infestation of ticks in the laboratory setting. Biology of Disease Vectors. , (2005).
- Jones, L. D., Davies, C. R., Steele, G. M., Nutall, P. A. The rearing and maintenance of ixodid and argasid ticks in the laboratory. Animal Technology. 39, 99-106 (1988).
- Slovák, M., Labuda, M., Marley, S. E. Mass laboratory rearing of Dermacentor reticulatus ticks (Acarina, Ixodidae). Biologia, Bratislava. 57 (2), 261-266 (2002).
- Rechav, Y., Dauth, J. Development of resistance in rabbits to immature stages of the Ixodid tick Rhipicephalus appendiculatus. Medical and Veterinary Entomology. 1, 177-183 (1987).
- Zacarias do Amaral, M. A., Azevedo Prata, M. C., Daemon, E., Furlong, J. Biological parameters of cattle ticks fed on rabbits. Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 21 (1), 22-27 (2012).
