Bioaerosols 음이온 교환 수 지를 사용 하 여 바이러스의 검출

Joshua W. Schaeffer; Jeffrey C. Chandler; Margaret Davidson; Sheryl L. Magzamen; Alma Pérez-Méndez; Stephen J. Reynolds; Lawrence D. Goodridge; John Volckens; Alan B. Franklin; Susan A. Shriner; Bledar Bisha

doi:10.3791/58111

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방법 논문

Bioaerosols 음이온 교환 수 지를 사용 하 여 바이러스의 검출

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DOI:

10.3791/58111

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2018년 8월 22일

Joshua W. Schaeffer¹ , Jeffrey C. Chandler² , Margaret Davidson¹^,³ , Sheryl L. Magzamen¹ , Alma Pérez-Méndez⁴ , Stephen J. Reynolds¹ , Lawrence D. Goodridge⁵ , John Volckens⁶ , Alan B. Franklin² , Susan A. Shriner² , Bledar Bisha⁷

¹High Plains Intermountain Center for Agricultural Health and Safety, Department of Environmental and Radiological Health Sciences, Colorado State University, ²National Wildlife Research Center, Wildlife Services, Animal and Plant Health Inspection Service, United States Department of Agriculture, ³Western Sydney University, ⁴Leprino Foods, Inc, ⁵Department of Food Science and Agricultural Chemistry, McGill University, ⁶Department of Mechanical Engineering, Colorado State University, ⁷Department of Animal Science, University of Wyoming

이 논문에서

요약

음이온 교환 수 지 기반 방법, 바이러스의 충돌-기반 bioaerosol 샘플링 시연 액체에 적응 합니다. 다운스트림 분자 탐지와 결합 하면 메서드 bioaerosols에서 바이러스의 손쉬운 및 민감한 감지.

초록

이 프로토콜에서는 바이러스에 대 한 사용자 지정된 bioaerosol 샘플링 방법을 보여 줍니다. 이 시스템에서는, 음이온 교환 수 지에서 bioaerosols 부정 청구 바이러스의 효능 농도 액체 치는 행위 기반 공기 샘플링 디바이스와 결합 이다. 따라서, 수 지 bioaerosol 샘플링 워크플로에 추가 농도 단계 역할을 합니다. 바이러스 성 입자의 핵 산 추출 다음 결과 샘플 분자 분석에 대 한 적합 한 음이온 교환 수 지에서 직접 수행 됩니다. 또한,이 프로토콜 사용자 bioaerosol 챔버 다양 한 환경 조건과 환경 변수 온도, 습도, 등의 지속적인 모니터링에 대 한 허용 아래 바이러스 라덴 bioaerosols 생성할 수 설명 바람 속도, 고 졸 대량 농도입니다. 이 프로토콜을 사용 하 여의 주요 장점은 수정 되지 않은 기존의 액체 임 핀 저를 직접 비교를 통해 평가 바이러스 탐지의 감도 증가입니다. 다른 장점은 집중 다양 한 부정 청구 바이러스, 음이온 교환 수 지 (샘플 당 ~$0.14), 및 사용의 용이성의 저렴 한 비용을 포함 합니다. 단점 수 지 흡착 바이러스 성 입자의 infectivity 평가이 프로토콜의 무 능력을 포함 하 고 액체 샘플링 버퍼의 최적화에 대 한 필요는 임 핀 저 내에서 사용 하는 잠재적으로.

서론

이 방법의 목적은 bioaerosols에서 부정 청구 바이러스의 분자 탐지를 촉진 하기 위하여 매우 중요 한 bioaerosol 샘플링 플랫폼을 제공. 미생물, 바이러스 성 입자를 포함 하 여 장시간 시간¹bioaerosols에서 살아남을 수 있습니다. Bioaerosols 비교적 긴 거리를 여행 하 고 생존 및 infectivity, 산업 영향 받은 개인에서 6 킬로미터의 거리에 있는 타워에서 Legionnaires' 질병의 발발에 의해 입증으로 유지 수 및 18 사망자²결과. 간접 전송 bioaerosols 중재 하는 인 간에 게 바이러스의 여러 설정에서 발생할 수 있으며 학교와 레스토랑³^,⁴노로바이러스 감염에 대 한 입증 되었습니다. 바이러스의 bioaerosol 전송의 생산 시설⁵^, 바이러스의 운동에 주요 요인으로 간주 되 고이 전송 경로와 마찬가지로, 돼지 및 가금류 농장에서와 같은 농업 설정에서 발생할 수 있습니다. ⁶ ^, ⁷ ....