Veno-एक माउस में शिरापरक Extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन
Summary
यहां हम एक गैर intubated, अनायास श्वास माउस में veno-शिरापरक extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन (ECMO) की तकनीक का वर्णन एक प्रोटोकॉल मौजूद । ECMO के इस murine मॉडल तीव्र और अंत चरण फेफड़ों के रोगों के प्रायोगिक अध्ययन में प्रभावी ढंग से लागू किया जा सकता है ।
Abstract
extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन (ECMO) का उपयोग हाल के वर्षों में काफी बढ़ गया है । ECMO तीव्र के लिए एक विश्वसनीय और प्रभावी चिकित्सा के रूप में अच्छी तरह से अंत चरण फेफड़ों के रोगों बन गया है । नैदानिक मांग और ECMO के लंबे समय तक उपयोग में वृद्धि के साथ, प्रक्रियात्मक अनुकूलन और बहु की रोकथाम-अंग क्षति महत्वपूर्ण महत्व के हैं । इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य एक गैर intubated में veno-शिरापरक ECMO की एक विस्तृत तकनीक वर्तमान है, सहज श्वास माउस । इस प्रोटोकॉल ECMO और शल्य चिकित्सा कदम के तकनीकी डिजाइन को दर्शाता है । यह murine ECMO मॉडल ECMO (जैसे, सूजन, रक्तस्राव और thromboembolic घटनाओं) से संबंधित pathophysiology के अध्ययन की सुविधा देगा । आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों की बहुतायत के कारण ECMO संबंधी जटिलताओं में शामिल आणविक तंत्र को भी विच्छेदित किया जा सकता है.
Introduction
Extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन (ECMO) एक अस्थाई जीवन समर्थन प्रणाली है कि फेफड़ों और दिल के कार्यों के लिए पर्याप्त गैस विनिमय और छिड़काव की अनुमति लेता है । हिल एट अल1 १९७२ में रोगियों में ECMO का पहला प्रयोग बताया; हालांकि, यह केवल व्यापक रूप से २००९2में H1N1 इंफ्लूएंजा महामारी के दौरान अपनी सफल आवेदन के बाद किया गया । आज, ECMO नियमित रूप से अंत में एक lifesaving प्रक्रिया के रूप में प्रयोग किया जाता है चरण दिल और फेफड़ों के रोगों3। Veno-शिरापरक ECMO तेजी से जाग, गैर intubated में आक्रामक यांत्रिक वेंटिलेशन के लिए एक विकल्प के रूप में कार्यरत है, अनायास दुर्दम्य श्वसन विफलता के साथ रोगियों श्वास4।
इसके व्यापक अपनाने के बावजूद, विविध जटिलताओं ECMO5,6,7के लिए सूचित किया गया है । जटिलताओं कि ECMO पर रोगियों द्वारा अनुभव किया जा सकता है रक्तस्राव, घनास्त्रता, पूति, थ्रोम्बोसाइटोपेनिया, डिवाइस से संबंधित खराबियों, और हवा आवेश शामिल हैं । इसके अलावा, एक प्रणालीगत भड़काऊ प्रतिक्रिया सिंड्रोम (सीिी) बहु में जिसके परिणामस्वरूप-अंग क्षति अच्छी तरह से दोनों नैदानिक और प्रायोगिक अध्ययन8,9में वर्णित है । इस तरह के मस्तिष्क रोधगलन के रूप में स्नायविक जटिलताओं भी अक्सर लंबी अवधि के ECMO चिकित्सा के दौर से गुजर रोगियों में सूचित कर रहे हैं । मामलों को भ्रमित करने के लिए अक्सर यह अंतर करना मुश्किल है कि क्या जटिलताओं ECMO के कारण होता है या अंतर्निहित तीव्र और अंत चरण रोगों के साथ विकारों से पैदा होता है ।
विशेष रूप से एक स्वस्थ जीव पर ECMO के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए, एक विश्वसनीय प्रयोगात्मक पशु मॉडल स्थापित किया जाना चाहिए । छोटे जानवरों पर ECMO के प्रदर्शन पर बहुत कुछ रिपोर्ट कर रहे हैं और सभी चूहों तक ही सीमित हैं. तारीख करने के लिए, ECMO के कोई माउस मॉडल साहित्य में वर्णित किया गया है । आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस उपभेदों की एक बड़ी संख्या की उपलब्धता के कारण, एक माउस ECMO मॉडल की स्थापना ECMO में शामिल आणविक तंत्र की आगे की जांच की अनुमति होगी-जटिलताओं से संबंधित10,11।
कार्डियोपल्मोनरी बाईपास (CPB)12के हमारे पहले वर्णित murine मॉडल के आधार पर, हम गैर ECMO, अनायास श्वास चूहों में veno-शिरापरक intubated की एक स्थिर विधि विकसित की है । ECMO सर्किट (चित्रा 1), बहिर्वाह और बहिर्वाह cannulas, एक सिकुड़नेवाला पंप, oxygenator, और हवा में फँसाने जलाशय युक्त, हमारे पहले वर्णित मॉडल के समान है murine CPB12 एक छोटे भड़काने के अपवाद के साथ वॉल्यूम (०.५ mL) । इस प्रोटोकॉल विस्तृत तकनीक, शारीरिक निगरानी, और रक्त गैस एक सफल ECMO प्रक्रिया में शामिल विश्लेषण दर्शाता है ।
Protocol
Representative Results
Discussion
इससे पहले, हम एक माउस12,13में CPB के एक सफल मॉडल का वर्णन किया । तीव्र या अंत चरण फेफड़ों विकारों के लिए इस तरह के एक मॉडल को लागू करने के लिए हम चूहों के लिए एक आसान उपयोग veno-शिरापरक ECMO सर्क…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह परियोजना ड्यूश Forschungsgemeinschaft से KFO ३११ अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था ।
Materials
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | in 1:1 with Tetraspan |
| Tetraspan 6% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | in 1:1 with Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2,5 IU per ml of priming |
| NaHCO3 8,4% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% in priming solution |
| Carprofen | Zoetis Inc., USA | PZN:00289615 | 5mg/kg/BW |
| 1 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C10PU-MCA1301 | carotide artery |
| 2 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | jugular vein |
| 8-0 Silk suture braided | Ashaway Line & Twine Co., USA | 75290 | ligature |
| Isoflurane | Piramal Critical Care GmbH | PZN:9714675 | narcosis |
| Spring Scissors – 6mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instruments |
| Spring Scissors – 2mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15000-03 | instruments |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | instruments |
| Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instruments |
| Castroviejo Micro Needle Holder – 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instruments |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | instruments |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instruments |
| Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 | Drägerwerk AG & Co. KGaA | anesthesia 1,3 -2,5% | |
| Multichannel Data Aquisition Device with ISOHEART Software | Hugo Sachs Elektronik GmbH, Germany | invasive pressure, ECG, t °C | |
| i-STAT portable device | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA | blood gas analysis | |
| i-STAT CG4+ and CG8+ cartridges | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA | blood gas analysis | |
| C57Bl/6 mice, male, 30 g, 14 weeks old | Charles River Laboratories | housed 1 week before |
References
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