قياس درجة حرارة الجسم الماوس استخدام الأشعة تحت الحمراء الحرارة خلال تاق الجهازية السلبي وتقييم الحساسية الغذائية
Summary
هنا نقدم طريقة جديدة لقياس دقة الاختلافات في درجة الحرارة الجسم في تاق الجهازية السلبي (PSA) والحساسية الغذائية الماوس نماذج استخدام حرارة الأشعة تحت حمراء. تم تكرار هذا الإجراء بدقة في السابق بي إس أية نتائج.
Abstract
قياس درجة حرارة الجسم الماوس من الأهمية بالنسبة للتحقيق في الحساسية وأعراض تحسسي. المسابر المستقيم لقراءات درجة الحرارة الشائعة، وأنها قد أثبتت أن تكون دقيقة ولا تقدر بثمن في هذا الصدد. ومع ذلك، يتطلب هذا الأسلوب لقياس درجة الحرارة الفئران أن تخديره من أجل إدراج التحقيق دون أذى للحيوان. وهذا يحد من القدرة على مراقبة أخرى تعمل الماوس في وقت واحد. من أجل التحقيق الأخرى تعمل أثناء قياس درجات الحرارة، المسابر المستقيم ليست مثالية، والمطلوب هو أسلوب آخر. هنا، علينا الأخذ بأسلوب موسع لقياس درجة الحرارة التي التعويضي الشرط للتخدير الماوس مع الحفاظ على موثوقية متساوية لتحقيقات المستقيم في قياس درجة حرارة الجسم. ونحن نستخدم حرارة الأشعة تحت حمراء التي يكشف الجسم درجات الحرارة السطحية في يتراوح بين 2 و 150 مم. هذا الأسلوب لقياس درجة حرارة الجسم النجاح في تكرار موثوق اتجاهات تغير درجة الحرارة أثناء تجارب الحساسية المفرطة نظام سلبي في الفئران. ونحن تبين أن درجات الحرارة السطحية في الجسم حوالي 2.0 درجة مئوية أقل من قياسات مسبار المستقيم، ولكن درجة انخفاض درجة الحرارة ويتبع نفس الاتجاه. وعلاوة على ذلك، يمكننا استخدام نفس الأسلوب لمراقبة الفئران في نموذج الحساسية غذائية لتقييم مستويات درجة الحرارة والنشاط في نفس الوقت.
Introduction
تم قياس درجة حرارة الجسم جزءا أساسيا من رصد آثار أعراض تحسسي في الحيوان نماذج1،2. الاختلافات في درجة الحرارة قيست تقليديا بالحرارة المسبار المستقيمي في الفئران3،4. مع هذه القياسات، محققين موثوق قد يصور الاختلافات في درجة الحرارة بين المتغيرات؛ ومع ذلك، هذا الأسلوب هو إجراء يستغرق وقتاً طويلاً ويسبب الضيق للفئران، التي يمكن أن تزيد من درجة حرارة الجسم الأساسية. سبر المستقيم يمكن أيضا أن يسبب الإصابة وتمزق الأغشية المخاطية3. وعلاوة على ذلك، ينبغي أن تخديره الفئران من أجل إدراج معاملة إنسانية المسبار المستقيمي لقياس درجة الحرارة3. هذه عملية بطيئة، ويحظر بقياس درجات الحرارة المتعاقبة خلال فترة قصيرة من الزمن. وعلاوة على ذلك، لا يمكن ملاحظة تعمل نشاط الفئران خلال هذا الوقت حتى المخدر هو تماما بليت، وهي عملية تستغرق وقتاً طويلاً آخر. في الآونة الأخيرة، استخدمت أساليب أخرى يمكن الاعتماد عليها لقياس درجة حرارة الجسم العلامات مرسل الأشعة تحت الحمراء السلبية مزروع تحت الجلد أو أجهزة البث الإذاعي التي تشمل درجة حرارة استشعار3،،من56. على الرغم من أنها مقبولة كممارسة مثالية ببعض الباحثين، لا يتم استخدام هذه الأساليب على نطاق واسع بسبب ارتفاع التكاليف الأولية والشدة للفئران، بسبب العمليات الجراحية زرع جهاز استشعار درجة الحرارة تحت الجلد أو جزء آخر من الجسم.
من أجل إثبات أن فرق في درجة حرارة انعكاس دقيق للأعراض في مرض نموذج1،2، الفئران يجب أن تكون مستيقظا أثناء قياس درجة الحرارة وتكون قادرة على العودة إلى نشاطهم المظهرية العادية مباشرة قبل وبعد القياس. وتحقيقا لهذه الغاية، سعينا لأسلوب الذي يمكن أن يتحقق هذا.
وكان هدفنا دقة وبتكلفة زهيدة قياس درجة حرارة الجسم الماوس، دون الحاجة للتخدير ودون فرض قيود على النشاط، لتمكين المراقبة السلوكية تعمل أثناء وبعد الوقت لقياس درجة الحرارة. ولتحقيق هذا الهدف، كان من الواضح أن تقنية أقل الغازية من يسبر درجة حرارة المستقيم القياسية المطلوبة. استخدمت الأشعة تحت الحمراء الحرارة لعدة عقود في الطب السريري، لا سيما في طب الأطفال، للحصول على قراءات دقيقة درجة الحرارة. وكان أسلوب بديل التي سمحت للأطباء بسرعة ودقة الحصول على قياسات درجات الحرارة عند الرضع والأطفال صعب أن نشاط متحركة. تنفيذ هذا الأسلوب نفسه في الفئران، وقد تطورت طريقة ناجحة للحصول على درجات حرارة دون تخدير. الأهم من ذلك، نحن تبين أن هذه الطريقة قادرة على تكرار نتائج تاق المنهجية السلبية الراسخة فيما يتعلق بالتغيرات في درجات الحرارة، في حين يجري أيضا قادرة على مراقبة نشاط الماوس في جميع أنحاء القياس. وعلاوة على ذلك، يمكننا استخدام نفس الأسلوب لتقييم درجات حرارة الجسم من الفئران حساسية الغذاء، أثناء التحقيق في نفس الوقت الأعراض الأخرى، لإثبات أن درجة حرارة الجسم هو في الواقع انعكاسا دقيقا لمستوى النشاط والنمط الظاهري عموما من الماوس.
Protocol
Representative Results
Discussion
بروتوكول وصف أنشئت بهدف قياس درجة حرارة الجسم دون استخدام التخدير. وعلى الرغم من سهولة نسبية مع درجة الحرارة التي يمكن الحصول على قراءات، هناك العديد من المحاذير التي تستوعب هذه التقنية، بالإضافة إلى آثار أكثر وضوحاً مثل التعامل مع الإجهاد ودرجات الحرارة المحيطة مختلفة.
أ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
المنح البحثية في كواكامي وأيده مختبر المعهد الوطني للصحة: R01 AR064418-01A1 ومنظمة العفو الدولية R21 115534-01، و R01 HL124283-01 R41AI124734-01.
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
References
- Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).
- Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
- Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).
- Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection. Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).
- Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats. Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).
- Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).
- Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice. Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).
- Brandt, E. B., et al. Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).
- Ando, T., et al. Histamine-releasing factor enhances food allergy. The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).
- Brandt, E. B., et al. Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).
