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방법 논문

수동 체계 알레르기 및 식품 알레르기 평가 하는 동안 적외선 온도계를 사용 하 여 마우스 신체 온도 측정

25.9K 조회수

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DOI:

10.3791/58391

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2018년 9월 14일

 ,  , 

이 논문에서

요약

여기 우리는 수동 조직의 알레르기 (PSA) 및 적외선 온도계를 사용 하 여 음식 알레르기 마우스 모델에서 몸 온도 차이 정확 하 게 측정 하는 새로운 방법을 제시. 이 절차는 이전 PSA 결과에 정확 하 게 중복 되었습니다.

초록

마우스 신체 온도 측정은 알레르기 및 과민 증상 조사에 대 한 파라마운트 중요 합니다. 온도 판독을 위한 직장 프로브는 일반적, 그리고 그들은 정확 하 고 귀중 한 이런 맥락에서 입증 되었습니다. 그러나, 온도 측정의이 방법 동물에 상해 없이 프로브를 삽입 하기 위해 취 수에 쥐를 요구 한다. 이 마우스의 다른 고기를 동시에 관찰 하는 능력을 제한 합니다. 온도 측정 하는 동안 다른 고기를 조사 하기 위하여 직장 프로브는 이상적, 그리고 또 다른 방법은 원하는. 여기, 우리가 동등한 신뢰성 체온 측정 프로브를 직장을 유지 하면서 마우스 마 취에 대 한 요구 사항을 나빠지고 온도 측정의 비 침범 성 방법 소개. 2, 150 m m 사이의 범위에서 신체 표면 온도 감지 하는 적외선 온도계를 사용 합니다. 이 신체 온도 측정 방법은 수동 시스템 알레르기 실험 쥐에 있는 동안 온도 변화 트렌드를 안정적으로 복제에 성공입니다. 우리 몸 표면 온도 약 2.0 ° C 직장 프로브 측정, 보다 낮은 보여주지만 온도 하락의 정도 같은 추세는 다음과 같습니다. 또한, 같은 기술을 사용 하 여 온도 및 활동 레벨을 동시에 평가 하는 식품 알레르기 모델에서 쥐를 관찰.

서론

체온의 측정은 동물에 과민 증상의 효과 모니터링의 필수적인 부분 모델1,2되었습니다. 온도 차이 마우스3,4직장 프로브의 온도계에 의해 전통적으로 측정 되었다. 이러한 측정 조사 안정적으로 변수; 간의 온도 차이 묘사는 그러나,이 방법은 시간이 많이 걸리는 절차 이며 몸 핵심 온도 증가 시킬 수 있는 마우스, 조 난 발생. 직장 검색 해도 점 막 찢 어 및 감염3발생할 수 있습니다. 또한, 고통 없이 측정 온도3직장 프로브를 삽입 하기 위해 쥐를 취 한다. 이것은 느린 과정, 그리고 그것은 시간의 짧은 기간 내에 연속으로 온도 측정을 금지. 또한, 마우스 활동 고기까지 마 취는 완전히 없어진, 또 다른 시간이 걸리는 과정은이 시간 동안 관찰 될 수 없습니다. 더 최근에, 다른 신뢰할 수 있는 방법으로 체온을 측정 하는 피하 이식된 수동 적외선 트랜스폰더 태그 또는 무선 송신기는 온도 센서3,,

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프로토콜

모든 동물 실험은 알레르기와 면역학에 대 한 동물 관리 및 사용 라호야 연구소의 위원회에 의해 승인 되었다.

1. 마우스 Anesthetization 동안 신체 온도 측정

  1. 마 취 유도 상자에 마우스를 놓습니다. 5 %isoflurane 산소 1 L/min 흐름을 사용 하 여 anesthetize.
    참고: Anesthetization 확인 때 마우스 자발적인 운동 중단 되었습니다 모바일 30 s. 또는 모니터 호흡 속도, 그리고 쥐 매 2 당 1 호흡 호흡은 일단 s anesthetization 확인 이상, 또는.
  2. 마우스는 검지 손가락과 엄지손가락으로 목의 목 덜 미를 잡고 하 고 더 낮은 복 부를 노출 하려면 새끼 손가락으로 꼬리를 잡고.
  3. 땅에 병렬의 시체와 함께 마우스를 잡고 아랫 배는 아래 적외선 온도계 센서를 놓습니다.
    참고: 외부 평평한 표면 온도계 (아니라 센서의 표면)의 복 부의 표면에서 약 2-5 m m 이어야 한다. 이 복제 결과 온도 측정 동안 마우스 (2 절에서 설명한) 마 취는 하지. 그것은 복 부의 대상 사이트를 확인 해야 합니다. 위 두 젖꼭지 사이 목표로 일관 된 결과 수 있습니다.
  4. 온도 측정 하는 방 아 쇠를 잡으십시오. 마우스와 온도....

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결과

수동 체계 알레르기: iv 주입에 대 한 10 주 오래 된 여성 BALB/c 마우스 했다 마 취. 주입, 이전 1 단계에 설명 된 대로 그들의 체온 (비디오 1)를 측정 했습니다. 그림 1 은 4 주사 후 두 모집단의 온도 추세를 보여줍니다. IgE 응 마우스 PBS 컨트롤 마우스 20 분71.1 ° C의 최대 드롭 했다 하는 동안 20 분 3.0 ° C의 최대 온도 하락을 보여주었다. 또한,이 과정을 통해 활동 점수 각 마우스의 이동에 따라 평가 했다. 마우스는 어떤 동요 없이 처음 관찰 되었다. 다음, 그들은으로 계산기의 손을 소개 하 고 마우스와 부드러운 접촉 하 여 동요와 함께 관찰 되었다. 그들의 반응에 따라, 쥐 평가 고 1 ~ 3의 규모에 득점. 1의 점수를 나타냅니다 마우스 움직이기 또는 동요; 없이 최소한 모바일 2의 점수는 동요.......

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토론

설명 하는 프로토콜은 마 취의 사용 없이 온도 측정 하는 목적으로 설립 되었다. 상대적 용이성은 온도 판독을 얻을 수 있습니다에 불구 하 고 스트레스와 다른 주위 온도 처리 등 더 확실 한 효과 뿐만 아니라이 기술을 수용 하는 몇 가지 경고가 있다.

첫째, 실험을 통해 일관 된 온도 판독을 유지 하기 위해 온도 측정 되 고 위치 해야 합니다. 수 미리 정해진 해부학 랜드마크를 사용 하 여 및 조사 했다 시체의 측정을 복제할 수 있어야 합니다. 위치입니다. 보호 하는 마우스의 forepaws는 감 금 소 또는 온도계의 지의 입술 같은 직선-가장자리 표면에 복 부는 온도계의 적외선 센서에 쉽게 노출 됩니다. 일반적으로, 복 부 일관 된 결과 대 한 몇 가지 유연성을 허용 하는 큰 표면 영역입니다. 또한, 복 부는 마우스의 등 쪽 표면 보다 엷 머리 하 고 따라서 더 정확한 신체 온도 독서에 대 한 있습니다.

둘째, 뒷 발 때 온도 측.......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

연구 실험실 NIH에 의해 지원 되었다 가와카미에 부여: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01, 및 R41AI124734-01.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
비접촉 적외선 온도계SinoPieDT-8861
안티-디니트로페닐 (DNP) IgE시그마 AldrichD8406-.2MG
PrecisionGlide 30 G 바늘BD305128
PrecisionGlide 26 G 바늘 BD305111
1 mL 주사기BD309659
디 니트로 페닐 - 인간 혈청 알부민Biosearch 기술D-5059-10
닭 달걀 흰자위의 오브 알부민시그마 AldrichA5503-50G
Imject 명반ThermoFisher Scientific77161
동물 먹이 바늘, 일회용Fisher Scientific01-208-87

참고문헌

  1. Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), Quiz 516-507 506-515 (2007).
  2. Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
  3. Newsom, D. M., Bolg....

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재인쇄 및 허가

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