Summary

工作模式下的心功能和代谢评估

Published: January 12, 2019
doi:

Summary

诺本心脏原位灌注 (eshp), 使心脏保持跳动, 半生理状态。在工作模式下进行操作时, eshp 提供了对捐献者心脏功能和器官生存能力进行复杂评估的机会。在这里, 我们描述了我们的方法在 eshp 期间心肌性能评估。

Abstract

目前的标准器官保存方法 (冷库, cs), 使心脏暴露在冷缺血期, 限制了安全保存时间, 增加了移植后不良结局的风险。此外, cs 的静态性质不允许在保存间隔内进行器官评估或干预。诺曼原位心脏灌注 (eshp) 是一种新的方法, 保存捐赠的心脏, 通过提供含氧, 营养丰富的心脏吸乳, 最大限度地减少冷缺血。eshp 在保存标准供体心脏方面已被证明不低于 cs, 也为循环死亡测定后捐献的心脏的临床移植提供了便利。目前, 唯一可用的临床 eshp 设备在卸载、非工作状态下灌注心脏, 限制了对心肌性能的评估。相反, 在工作模式下的 eshp 提供了机会, 通过评估生理条件下的功能和代谢参数, 全面评估心脏表现。此外, 早期的实验研究表明, eshp 在工作模式下可能会导致更好的功能保存。在这里, 我们描述了在一个大型哺乳动物 (猪) 模型中对心脏进行原位灌注的协议, 该模型可针对不同的动物模型和心脏大小进行重现。此 eshp 设备中的软件程序允许实时和自动控制泵的速度, 以保持所需的主动脉和左心房压力, 并评估各种功能和电生理参数, 而对监督/操纵。

Introduction

临床相关性

虽然自1967年第一次心脏移植以来, 心脏移植的大多数方面都有了显著的发展, 但冷藏 (cs) 仍然是供体心脏保护的标准 1。cs 使器官暴露在冷缺血期, 限制了安全保存间隔 (4-6小时), 并增加了原发性移植物功能障碍2,3,4的风险。由于 cs 的静态性质, 在器官采购和移植之间的时间内, 无法评估功能或治疗干预。这是扩大标准捐助方的一个特别限制, 包括循环死亡后捐赠的心脏, 这给克服需求与目前捐助方之间的巨大差距造成了障碍 56.为了解决这一局限性, 提出了一种新的半生理方法来保存捐赠的心脏, 通过在保存时向心脏提供含氧、营养丰富的香水, 最大限度地减少冷缺血的暴露1,7.,8

原位心脏灌注

在孤立的心脏的异地检查中最常用的方法之一是朗根多夫灌注。在1895年由 oskar langendorff 介绍的这种方法中, 血液流入冠状动脉, 流出孤立心脏的冠状窦, 心脏处于空的和跳动的状态9,10.使用转移医疗器官护理系统设备 (ocs) 在 langendorff 模式下的临床 eshp 已被证明在保存标准供体心脏1方面不低于 cs, 并为 dcd 心脏的临床移植提供了便利11. 然而, 人们对该装置评价器官可行性的能力表示关切, 因为一些最初被认为可移植的捐献者心脏在 ocs3上灌注后被丢弃。ocs 在 langendorff (非工作) 模式下支持心脏, 因此具有有限的能力来评估心脏的抽水功能3,12。越来越多的证据表明, 功能参数为评估器官生存能力提供了更好的方法, 这表明在 eshp 3 期间, 评估心脏功能可能成为评估和选择移植心脏的可靠工具 此外,我们原位灌注猪心脏的研究表明, 在工作模式下, eshp 为心脏提供了增强的功能保护。灌注间隔15,16

能够在工作模式下保持心脏的 eshp 设备必须具有一定的自动化级别, 以安全、精确地保持预紧力、后负荷和流量。此外, 这种系统应具有灵活性, 以促进对心脏功能进行全面评估。这里使用的 eshp 设备配备了定制软件, 1) 提供和维护所需的主动脉 (o) 和左心房 (la) 压力流和 2) 提供功能参数的实时分析和压力波形的视觉评估。对监督的最低需求。利用标准充液压力传感器采集压力数据, 利用跨时间多普勒流量探头采集流量数据。这些信号分别通过桥接和模拟输入进行数字化。心脏水平定位, 轻微提升到柔软的硅胶膜上的大血管。插管附件穿过膜, 加入一个顺应性室, 用于抑制心室射血。这项工作的目的是为心脏移植领域的研究人员提供一个协议, 用于对心脏进行原位灌注和评估, 在正常的, 半生理条件下的工作模式, 在一个大型哺乳动物 (约克郡猪) 模型。

Protocol

本手稿中的所有程序都是按照加拿大动物护理理事会的指导原则和实验室动物护理和使用指南进行的。这些议定书得到了艾伯塔大学动物护理机构委员会的批准。该方案已应用于幼小约克郡猪35-50 公斤之间。所有参与 eshp 程序的个人都接受了适当的生物安全培训。 1. 手术前准备 将风琴室正确地放置在仪器车上, 并将硅支撑膜安装在风琴室内。在图 1</str…

Representative Results

在灌注开始时 (在非工作模式下), 当系统和灌注的温度接近正常时, 心脏通常会恢复窦性心律。当进入工作模式时, 当 la 压力接近所需的值时, 应观察到对 o 压力跟踪的喷射, 并应逐渐增加 la 流量 (心脏输出量的反射)。在约克郡猪模型 (35-50 公斤) 和启动心脏重量180-220 克, 最初的 la 流量将是约 2, 000 mL/min, 这通常将接近约 2, 750 mL/min 在工作模式灌注的第一个小时。<strong class="…

Discussion

成功灌注是根据研究的目的来定义的;但是, 这应该包括不间断的 eshp 所需的时间量和完整的收集有关心功能的数据在灌注过程中。为此, 必须遵循议定书中的几个关键步骤。

心脏是一个对氧气和能量有很高需求的器官, 最大限度地减少插管和灌注前的缺血时间是必须遵循的重要原则。采购过程、将心脏安装在 eshp 设备上以及启动灌注不应超过20-30分钟。

为…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

这项工作得到了加拿大国家移植研究方案赠款的支持。sh 是一个医学和牙科学院的学生在心脏科学的研究生。dhf 接受了国家科学和工程研究委员会和加拿大卫生研究所的合作研究项目 (chrp) 赠款。

Materials

Debakey-Metzenbaum dissecting scissors Pilling 342202
MAYO dissecting scissors Pilling 460420
THUMB forceps Pilling 465165
Debakey straight vascular tissue forceps  Pilling 351808
CUSHING Gutschdressing forceps Pilling 466200
JOHNSON needle holder Pilling 510312
DERF needle holder Pilling 443120
Sternal saw Stryker 6207
Sternal retractor Pilling 341162
Vorse tubing clamp Pilling 351377
MORRIS ascending aorta clamp Pilling 353617
Surgical snare (tourniquet) set Medtronic CVR79013
2-0 SILK black 12 X 18" strands ETHICON A185H
3-0 PROLENE blue 18" PS-2 cutting ETHICON 8687H
Biomedicus pump drive (modified) Medtronic 540 Modified to allow remote electronic control of pump speed
Biomedicus pump Maquet BPX-80
Membrane oxigenator D 905 SORIN GROUP 50513
Tubing flow module   Transonic Ts410
PXL clamp-on flow sensor Transonic ME9PXL-BL37SF
TruWave pressure transducer Edwards VSYPX272
Intercept tubing 3/8" X 3/32" X 6' Medtronic 3506
Intercept tubing 1/4" X 1/16" X 8' Medtronic 3108
Heated/Refrigerated Bath Circulator  Grant TX-150
ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer Radiometer 989-963
5F Ventriculr straight pigtail cathter CORDIS 534550S
5F AVANTI+ Sheath Introducer CORDIS 504605A
Emerald Amplatz Guidewire CORDIS 502571A
Dual chamber pace maker Medtronic 5388
Defibrilltor CodeMaster M1722B
Infusion pump Baxter AS50
Surgical electrocautery device Kls Martin ME411
Gas mixer SECHRIST 3500 CP-G
Medical oxygen tank praxair 2014408
Cabon dioxide tank praxair 5823115
Bovine serum albumin MP biomedicals 218057791

References

  1. Ardehali, A., et al. Ex-vivo perfusion of donor hearts for human heart transplantation (PROCEED II): a prospective, open-label, multicentre, randomised non-inferiority trial. Lancet. 385 (9987), 2577-2584 (2015).
  2. Collins, M. J., Moainie, S. L., Griffith, B. P., Poston, R. S. Preserving and evaluating hearts with ex vivo machine perfusion: An avenue to improve early graft performance and expand the donor pool. European Journal of Cardiothoracic Surgery. 34 (2), 318-325 (2008).
  3. Freed, D. H., White, C. W. Donor heart preservation: Straight up, or on the rocks?. Lancet. 385 (9987), 2552-2554 (2015).
  4. Guibert, E. E., et al. Organ preservation: Current concepts and new strategies for the next decade. Transfusion Medicine and Hemotherapy. 38 (2), 125-142 (2011).
  5. Collins, M. J., et al. Use of diffusion tensor imaging to predict myocardial viability after warm global ischemia: Possible avenue for use of non-beating donor hearts. Journal of Heart and Lung Transplantation. 26 (4), 376-383 (2007).
  6. White, C. W., et al. A cardioprotective preservation strategy employing ex vivo heart perfusion facilitates successful transplant of donor hearts after cardiocirculatory death. Journal of Heart and Lung Transplantation. 32 (7), 734-743 (2013).
  7. Iyer, A., et al. Normothermic ex vivo perfusion provides superior organ preservation and enables viability assessment of hearts from DCD donors. American Journal of Transplantation. 15 (2), 371-380 (2015).
  8. Peltz, M., et al. Perfusion preservation maintains myocardial ATP levels and reduces apoptosis in an ex vivo rat heart transplantation model. Surgery. 138 (4), 795-805 (2005).
  9. Liao, R., Podesser, B. K., Lim, C. C. The continuing evolution of the Langendorff and ejecting murine heart: New advances in cardiac phenotyping. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 303 (2), H156-H167 (2012).
  10. Rivard, L., Gallegos, R., Ogden, I., Bianco, R. Perfusion Preservation of the Donor Heart: Basic Science to Pre-Clinical. Journal of Extra Corporeal Technology. 41 (3), 140-148 (2009).
  11. Dhital, K. K., et al. Adult heart transplantation with distant procurement and ex vivo preservation of donor hearts after circulatory death: A case series. Lancet. 385 (9987), 2585-2591 (2015).
  12. Messer, S., Ardehali, A., Tsui, S. Normothermic donor heart perfusion: Current clinical experience and the future. Transplant International. 28 (6), 634-642 (2015).
  13. White, C. W., et al. Assessment of donor heart viability during ex vivo heart perfusion. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 93 (10), 893-901 (2015).
  14. Messer, S. J., et al. Functional assessment and transplantation of the donor heart after circulatory death. Journal of Heart and Lung Transplantation. 35 (12), 1443-1452 (2016).
  15. Hatami, S., et al. Endoplasmic reticulum stress in ex vivo heart prfusion: A comparison between working vs non-working modes. Canadian Journal of cardiology. 33 (10), (2017).
  16. White, C. W., et al. Ex vivo perfusion in a loaded state improves the preservation of donor heart function. Canadian Journal of cardiology. 31 (10), s202 (2015).
  17. White, C. W., et al. A wholeblood-based perfusate provides superior preservation of myocardial function during ex vivo heart perfusion. Journal of Heart and Lung Transplantation. (14), (2014).
  18. Lips, D. J., et al. Left ventricular pressure-volume measurements in mice: comparison of closed-chest versus open-chest approach. Basic Research in Cardiology. 99 (5), 351-359 (2004).
  19. Morita, S. Is there a crystal ball for predicting the outcome of cardiomyopathy surgery? Preload recruitable stroke work, may be a possible candidate. Journal of Cardiology. 71 (4), 325-326 (2018).
  20. Hatami, S., et al. . Canadian Society for Transplantation. , (2017).
  21. Anthony, C., et al. Ex vivo coronary angiographic evaluation of a beating donor heart. Circulation. 130 (25), e341-e343 (2014).
  22. Sandha, J. K., et al. Steroids Limit Myocardial Edema During Ex vivo Perfusion Of Hearts Donated After Circulatory Death. Annals of Thoracic Surgery. , (2018).
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Hatami, S., White, C. W., Ondrus, M., Qi, X., Buchko, M., Himmat, S., Lin, L., Cameron, K., Nobes, D., Chung, H., Nagendran, J., Freed, D. H. Normothermic Ex Situ Heart Perfusion in Working Mode: Assessment of Cardiac Function and Metabolism. J. Vis. Exp. (143), e58430, doi:10.3791/58430 (2019).

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