Vivo में भ्रूण और अपरा विकास के विश्लेषण के लिए उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड
Summary
यहाँ हम vivo में चूहों में भ्रूण के विश्लेषण के लिए उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड की तकनीक का वर्णन. इस विधि के अनुवर्ती भ्रूण और अपरा मापदंडों के विश्लेषण के साथ ही गर्भावस्था भर में मातृ और भ्रूण रक्त के प्रवाह की अनुमति देता है ।
Abstract
अल्ट्रासाउंड इमेजिंग मानव और पशु ऊतकों में अंग विसंगतियों और ट्यूमर का पता लगाने के लिए इस्तेमाल एक व्यापक तरीका है । विधि गैर इनवेसिव, हानिरहित, और दर्द रहित है, और आवेदन आसान है, तेजी से, और कहीं भी किया जा सकता है, यहां तक कि मोबाइल उपकरणों के साथ. गर्भावस्था के दौरान, अल्ट्रासाउंड इमेजिंग मानक बारीकी से भ्रूण के विकास की निगरानी करने के लिए प्रयोग किया जाता है । तकनीक अंतर्गर्भाशयी वृद्धि प्रतिबंध (IUGR), कम और दीर्घकालिक दोनों मां और भ्रूण के लिए स्वास्थ्य परिणामों के साथ एक गर्भावस्था जटिलताओं का आकलन करने के लिए महत्वपूर्ण है । IUGR की प्रक्रिया को समझना प्रभावी चिकित्सकीय रणनीतियों के विकास के लिए अपरिहार्य है ।
अल्ट्रासाउंड प्रणाली इस पांडुलिपि में इस्तेमाल एक अल्ट्रासाउंड उपकरण छोटे जानवरों के विश्लेषण के लिए उत्पादित है और गर्भावस्था अनुसंधान सहित विभिन्न अनुसंधान क्षेत्रों में इस्तेमाल किया जा सकता है । यहां हम के लिए प्रणाली के उपयोग का वर्णन vivo प्राकृतिक खूनी (NK) सेल से भ्रूण का विश्लेषण में/(एम सी)-मां की कमी है कि विकास-प्रतिबंधित पिल्ले को जंम दे । प्रोटोकॉल प्रणाली की तैयारी भी शामिल है, पहले और माप के दौरान चूहों की हैंडलिंग, और बी-मोड, रंग डॉपलर मोड, और पल्स लहर डॉपलर मोड का उपयोग. भ्रूण का आकार, अपरा आकार, और भ्रूण के लिए रक्त की आपूर्ति का विश्लेषण किया गया । हम मध्य हमल के बाद से कम आरोपण आकार और NK/MC-कमी चूहों में छोटे अपरा पाया । इसके अलावा, एम सी/NK-कमी अनुपस्थित और भ्रूण Arteria umbilicalis(उमा) और एक ऊंचा प्रतिरोध सूचकांक में रिवर्स अंत डायस्टोलिक प्रवाह के साथ जुड़ा हुआ था । प्रोटोकॉल में वर्णित विधियों का उपयोग संबंधित और गैर-संबंधित शोध विषयों के लिए आसानी से किया जा सकता है ।
Introduction
अल्ट्रासाउंड मानव कान की श्रव्य सीमा से ऊपर आवृत्तियों के साथ ध्वनि तरंगों है, के बारे में 20 kHz1से अधिक. चमगादड़, वेल्स, डॉल्फिन2,3, चूहों4, चूहों5, और माउस lemurs6 सभी उपयोग अल्ट्रासाउंड अभिविंयास या संचार के लिए की तरह जानवरों । मानव कई तकनीकी और चिकित्सा अनुप्रयोगों के लिए अल्ट्रासाउंड का लाभ ले लो । एक अल्ट्रासाउंड डिवाइस ध्वनि लहर बनाने के लिए और वितरित और संकेत का प्रतिनिधित्व करने में सक्षम है । अल्ट्रासाउंड एक बाधा मुठभेड़ों, ध्वनि प्रतिबिंबित होता है, अवशोषित या इसे माध्यम से जा सकते हैं । एक इमेजिंग विधि के रूप में अल्ट्रासाउंड के आवेदन, सोनोग्राफी कहा जाता है, हृदय की तरह मानव या पशु चिकित्सा में जैविक ऊतकों के विश्लेषण के लिए प्रयोग किया जाता है (इकोकार्डियोग्राफी)7,8, फेफड़े9, थायराइड ग्रंथि10 , गुर्दे11, और मूत्र और प्रजनन पथ12,13; पित्ताशय की पथरी का पता लगाने14 और ट्यूमर15; और रक्त वाहिकाओं या अंगों के छिड़काव का मूल्यांकन16,17. अल्ट्रासाउंड गर्भावस्था के दौरान जंम के पूर्व देखभाल में एक मानक विधि है, और भ्रूण विकास विकलांग या विकलांगता जल्दी पहचाना जा सकता है । विशेष रूप से, एक भ्रूण के विकास बारीकी से नियमित अंतराल पर नजर रखने के लिए एक संभव IUGR पहचान है । अंत में, भ्रूण रक्त प्रवाह पर नजर रखी जा सकता है, के रूप में यह विकास प्रतिबंधों18,19,20,21बिंदु कर सकते हैं ।
रेडियोग्राफी जैसे अंय तरीकों की तुलना में अल्ट्रासाउंड इमेजिंग का एक प्रमुख लाभ है ध्वनि harmlessness ऊतकों का विश्लेषण किया जा करने के लिए । यह आसान और तेजी से विधि गैर इनवेसिव, दर्द रहित है, और कई बार इस्तेमाल किया जा सकता है । एक अल्ट्रासाउंड डिवाइस के प्रारंभिक परिव्यय महंगा है; हालांकि, उपभोज्य आवश्यक सामग्री सस्ते हैं । इस पांडुलिपि में इस्तेमाल किया अल्ट्रासाउंड प्रणाली पशु मॉडल (यानी, चूहों और मछली) की एक सीमा के लिए उपयुक्त है, जबकि मनुष्यों के लिए एक अल्ट्रासाउंड डिवाइस की एक आवृत्ति की आवश्यकता है 3-15 मेगाहर्ट्ज, एक आवृत्ति की 15-70 मेगाहर्ट्ज चूहों के लिए आवश्यक है.
वर्तमान पांडुलिपि बी मोड, रंग डॉपलर मोड, और पल्स-वेव डॉपलर मोड के उपयोग के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन है । विवरण के साथ ही प्रदर्शन, डेटा प्राप्ति और भंडारण चूहों की तैयारी भी शामिल है. यह विधि सभी गर्भावधि दिनों में विभिन्न माउस उपभेदों के लिए सफलतापूर्वक लागू किया गया है और भ्रूण और अपरा विकास के साथ ही मातृ और भ्रूण रक्त मापदंडों की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । यहां, सभी आवेदनों हमारे अध्ययन के आधार पर समझाया जाता है गर्भवती एम सी/NK-कमी और नियंत्रण चूहों को रोजगार ।
Protocol
Representative Results
Discussion
हमारे अल्ट्रासाउंड प्रणाली का उपयोग करना, हम पर gd10 से एम सी/NK की कमी माताओं में भ्रूण विकास प्रतिबंध का प्रदर्शन किया । इसके अलावा, gd10 और 12 पर, हम कम अपरा आयामों को मनाया, और gd14 में अनुपस्थिति या ऊमस के कुछ भ्र…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इमेजिंग साधन कंपनी के लिए बहुत धंयवाद (विशेष रूप से Magdalena Steiner, Katrin Suppelt, और सैंड्रा मेयेर) उनके सुखद और तेजी से समर्थन के लिए और इमेजिंग प्रणाली और इसके उपयोग के विषय में हमारे सभी सवालों का जवाब देने के लिए तुरंत और पूरी तरह से । हम प्रोफेसर हंस-Reimer Rodewald और डॉ Thorsten Feyerabend (DKFZ हीडलबर्ग, जर्मनी) Cpa3 कॉलोनी प्रदान करने के लिए आभारी हैं । इसके अतिरिक्त, हम Stefanie Langwisch, जो माउस कालोनियों के प्रभारी और जो चित्र 1 में तस्वीरें उत्पंन धंयवाद ।
काम और इमेजिंग प्रणाली को ड्यूश Forschungsgemeinschaft (DFG) से अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया गया A.C.Z. (ZE526/6-1 और AZ526/6-2) कि DFG प्राथमिकता कार्यक्रम में एंबेडेड परियोजनाओं थे १३९४ “स्वास्थ्य और रोग में मस्तूल कोशिकाओं.”
Materials
| LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb) | BioLegend | 123204 | Klon TM-β1; 500 µg |
| Vevo 2100 System | FujiFilm VisualSonics Inc. | Transducer MS550D-0421 | |
| Vevo LAB Software | FujiFilm VisualSonics Inc. | ||
| Isoflurane | Baxter | PZN: 6497131 | |
| Electrode gel | Parker | 12_8 | |
| Surgical tape | 3M Transpore | 1527-1 | |
| Eye cream | Bayer | PZN: 1578675 | |
| Cotton tipped applicators | Raucotupf | 11969 | 100 pieces |
| Depilatory cream | Reckitt Benckiser | 2077626 | |
| Compresses | Nobamed Paul Danz AG | 856110 | 10 x 10 cm |
| Ultrasound gel | Gello GmbH | 246000 |
References
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