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방법 논문

비보에 태아 및 태 반 개발의 분석에 대 한 높은 주파수 초음파

10.2K 조회수

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DOI:

10.3791/58616

⸱

2018년 11월 8일

 ,  , 

이 논문에서

요약

여기는 vivo에서 쥐에 있는 태아의 분석에 대 한 높은 주파수 초음파의 기법에 설명합니다. 이 메서드는 태아의 속 행 및 placental 매개 변수 뿐만 아니라 임신에 걸쳐 임산부 및 태아 혈액 흐름의 분석을 수 있습니다.

초록

초음파 이미징 인간과 동물 조직에서 기관 예외 및 종양을 검출 하는 데 사용 하는 광범위 한 방법입니다. 방법은 비-침략 적, 무해 한, 그리고 고통, 그리고 응용 프로그램은 쉽게, 빠르고, 모바일 디바이스와도 어디서 나 할 수 있습니다. 임신 중 초음파 이미징 standardly 면밀히 모니터 하는 태아의 개발에 사용 됩니다. 이 기술은 자궁내 성장 금지 (IUGR), 단기 및 장기 건강 결과와 어머니와 태아 둘 다에 대 한 임신 합병증을 평가 하기 위해 중요 하다. IUGR의 과정을 이해 하는 것은 효과적인 치료 전략 개발을 위한 불가결입니다.

이 원고에 사용 되는 초음파 시스템 작은 동물의 분석에 대 한 생산 하는 초음파 장치 이며 임신 연구를 포함 한 다양 한 연구 분야에서 사용할 수 있습니다. 우리가 자연 킬러 (NK) 세포/돛대 세포 (MC)에서 태아의 비보에 분석을 위한 시스템의 사용을 설명 하는 여기-성장 제한 새끼를 낳을 결핍 어머니. 시스템의 준비를 포함 하는 프로토콜, 전에, 측정, 그리고 B 모드의 사용 중 쥐의 처리, 컬러 도플러 모드 및 펄스 파 도플러 모드. 태아 크기, placental 크기 및 태아에 게 혈액 공급이 분석 되었다. 우리는 감소 이식 크기와 작은 반응과 중간 임신 이후에서 NK/MC-불충분 한 쥐에서 발견. 또한, MC/NK-결핍 결 석 연관 되었다 고 태아 지 umbilicalis(우) 및 높은 저항 인덱스에서 끝 확장기 흐름 반전. 프로토콜에서 설명 하는 방법 관련 및 비-관련 연구 주제에 대 한 쉽게 사용할 수 있습니다.

서론

초음파는 이상 인간의 귀, 약 20 kHz1보다 더 높은 가청 범위 주파수를 가진 음파 이다. 동물 처럼 박쥐, 웨일즈, 돌고래2,3, 쥐4,5, 쥐 그리고 쥐 여우 원숭이6 모든 방향이 나 통신에 대 한 초음파를 사용 하 여. 인간은 여러 가지 기술 및 의료 응용 프로그램에 대 한 초음파의 활용. 초음파 장치는 사운드 웨이브를 만들고 배포 하 고 신호를 나타내는 수 있습니다. 초음파 발생 하면 장애물, 소리 반사, 흡수 또는 그것을 통해 갈 수 있다. 초음파, 불리 한 이미징 방법으로 초음파의 응용 프로그램은 인간의 유기 조직 또는 마음 (심장 초음파)7,8, 폐9, 상선10 같은 수의학의 분석에 사용 되 ,11신장 및 비뇨 기 및 생식 책자12....

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프로토콜

여기서 설명 하는 모든 방법에 의해 승인 된 "Landesverwaltungsamt 뉴 스타트 인섹 센 안할트: 42502-2-1296UniMD."

1. 실험 절차

  1. 6 8 주 오래 된 여성 MC 불충분 한 C57BL/6J-Cpa3-친구Cre /+ (Cpa3Cre /+) 생쥐와 엠씨 충분 한 C57BL/6J-Cpa3+/+ (식민지 컨트롤; Cpa3+/+) BALB/c 남성.
  2. 임신 일 (gd) 0 질 플러그의 확인 후 정의 하 고 여성 플러그 확인 후 즉시 치료.
    참고: 플러그는 여자의 질 구멍에 남자의 정자 이다.
    1. PBS 제어 Cpa3에서 intraperitoneally+/+ 의 250 µ L를 주사 여성.
    2. Intraperitoneally 엠씨 불충분 한 Cpa3에서 안티-CD122 (0.25 mg)의 250 µ L를 주사Cre /+ 여성.
      참고: 안티-CD122의 0.25 ....

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결과

이 원고에 사용 되는 초음파 시스템의 개별 구성 요소는 그림 1에 나와 있습니다. 그림 2 는 대표 초음파 이미지 획득 B 모드에서 gd5, 8, 10, 그리고 12 (B) 및 해당 이식 영역 측정 결과 (A)의 중요 한 감소 주입 영역을 보여주는 안티 CD122 처리 Cpa3Cre / + gd10 이후에서 쥐.

그림 3 쇼 (decidua basalis, 태 반, 태아)는 이식의 단일 부품 B 모드 (그림 3A)에 인수, placental 측정 (지역, 두께, 직경) co.......

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토론

우리의 초음파 시스템을 사용 하 여, 우리 시연 했다 태아 성장 제한 MC/NK 불충분 한 어머니에서 gd10에서에. 또한, gd10 및 12, 우리가 관찰 감소 placental 차원, 그리고 gd14에서 부재 또는 uMC/uNK 불충분 한 쥐의 일부 태아의 UmAs 끝 확장기 흐름의 복귀. 이 기호의 가난한 vascularization IUGR를 나타내는 동맥의 중요 한 저항 인덱스와 연관 되었다. 결과 임신과 태아 복지에 고 IUGR의 과정 이해에서 uMCs와 uNKs의 중요 한 역할을 확인 합니다.

프로토콜은 해당 임신 매일에서 gd5에서 이후 (후 이식). 고려 되어야 하는 프로토콜의 몇 가지 중요 한 단계가 있다. 첫째, 머리 제거는 신중 하 게 수행 되어야 합니다. 예를 들어 과도 한 접촉 탈모 크림을 피부 자극을 발생할 수 있습니다. 그러나, 불완전 한 머리 제거 신호 간섭 표시 화면에 그림자로 이끌어 낸다. (그림자 또는 낟 알 사진) 부족 한 신호에 대 한 또 .......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

많은 악기 이미징 회사 (특히 하 막달레나 스타 이너, 카트린 Suppelt, 산드라 메이어) 쾌적 하 고 빠른 지원에 대 한 신속 하 고 완전히 이미징 시스템 및 그것의 사용에 관한 우리의 모든 질문에 응답 하기 위한 감사 합니다. 우리는 Cpa3 식민지를 제공 하기 위한 교수 한스 Reimer Rodewald와 박사 Thorsten 파이어아벤트 (DKFZ 하이델베르크, 독일) 감사. 또한, 우리 감사 스테파니 Langwisch, 누가 마우스 식민지 담당 이었고 누가 그림 1에서 그림을 생성 합니다.

작업 및 이미징 시스템 교부 금에 의해 도이치 가운데 (DFG)에서 A.C.Z. (ZE526/6-1과 AZ526/6-2)에 DFG 우선 프로그램 1394 "돛대 세포 건강과 질병."에 포함 된 프로젝트를 했다 투자 했다

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb)BioLegend123204Klon TM-β 1; 500 &마이크로; g
Vevo 2100 시스템  후지필름 비주얼소닉스 Inc.트랜스듀서  MS550D-0421
Vevo LAB 소프트웨어  후지필름 비주얼소닉스 Inc.
이소플루란박스터PZN: 6497131
전극 젤파커12_8
서지컬 테이프3M 트랜스포어1527-1
아이 크림바이엘PZN: 1578675
코튼 팁 애플리케이터Raucotupf11969100개
제모 크림Reckitt Benckiser
압축Nobamed Paul Danz AG85611010 x 10 cm
초음파 젤Gello GmbH246000
2077626

참고문헌

  1. Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der Fötus die Ultraschallwelle hören und die Hitze spüren? Ultraschall in der Medizin. 33 (3), Stuttgart, Germany. 215-217 (1980).
  2. Jones, G. Echolocation. Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).
  3. Simmons, J. A.

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