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방법 논문

왼쪽된 심 방 협 유발 쥐에서 그룹 2 폐 동맥 고혈압과 폐 정 맥 Arterialization

7.3K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/58787

⸱

2018년 11월 18일

 ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

왼쪽된 심 방 협 (라스)은 그룹 2 폐 고혈압 (PH) 및 폐 정 맥 arterialization 기본 메커니즘 연구는 소설 외과 기술입니다. 여기, 선물이 폐 정 맥 arterialization를 일으키는 원인이 되 고 쥐에서 PH를 알 맞도록 하는 티타늄 클립을 사용 하 여 좌 심 수축 하는 프로토콜.

초록

승 모 판 협 착 증 유발 폐 정 맥 arterialization 및 그룹 2 폐 고혈압 (PH)의 기계 장치는 명확 하지 않습니다. 그룹 2의 설치류 모델이 없을 PH, 승 모 판 협 착 증 (MS), 질병 메커니즘 및 잠재적인 치료 전략의 조사를 촉진 하기 때문. 우리는 폐 정 맥 혼잡 유발 폐 정 맥 arterialization 및 그룹 2의 새로운 쥐 모델 제시 왼쪽된 심 방 협 (라스)에 의해 발생 하는 PH. 라스는 반 폐쇄 티타늄 클립을 사용 하 여 왼쪽된 아 트리 움 constricting에 의해 이루어집니다. 라스 수술 후 심장 초음파에 2.0 m/s 모델 보다 큰 transmitral 유입 속도와 같거나 쥐 점차적으로 폐 정 맥 arterialization 및 개발 그룹 2는 8-10 주 동안 PH. 이 프로토콜에서 우리 라스 수술을 수행 하는 방법의 단계별 절차를 제공 합니다. 제시 라스 쥐 모델 인간에서 MS를 모방 하 고 폐 정 맥 arterialization의 기본 분자 메커니즘 연구 및 그룹 2에 대 한 치료의 전 임상 평가 대 한 유용 PH.

서론

이 문서의 목적은 쥐에 라스 수술을 수행 하는 방법의 단계별 절차를 설명 하는 것입니다. 수술로 유도 라스 밀접 하 게 싫어 하지 MS와 오호 왼쪽된 아 트리 움1기계적인 방해의 창조를 포함 하는 인 간에 있는 triatriatum. 종종 왼쪽된 심 실 (LV) 유입의 방해 폐 정 맥 순환의 정체 원인과 환자는 점차적으로 PH를 개발 합니다. 세계 보건 기구 분류 PH 왼쪽된 심장 질환으로 인해 그룹 2, PH2,,34의 가장 널리 퍼진 그룹입니다. 왼쪽된 심장 질환을 가진 환자에서 PH의 진단이 관련 된 1 년 표준화 사망률4칠 배로 증가 보다는. 현재는 그룹 2에 대 한 승인된 없이 치료 내부 치료 외에도 PH 왼쪽 심장 질환 (예를 들어, 수술 stenotic 승 모 판 대체). 그러나, 심지어 효과적인 승 모 판 대체 완전히 MS5환자의 절반 최대에 PH를 해결 되지 않습니다. 이 영구 PH 제대로 이해 불리 한 폐 혈관, 개장 예정 이다. 따라서, 동물 모델은 불리 한 폐 혈....

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프로토콜

라스 실험 프로토콜 지케이 대학 학교의 의학 동물 관리 위원회 및 대학 연구 윤리 위원회 (프로토콜 #2015-118)에 의해 승인 되었습니다.

1. 수술 준비

  1. 동물 시설에 도착 한 후 5 주 된 남성 Sprague Dawley 쥐 작업 전에 그들의 새로운 가정에 적응 1 주 150 ~ 200 g 사이 제공 합니다.
  2. 압력가 마로 소독 하 여 수술을 하기 전에 다음과 같은 장비를 준비: 1)는 작은 동물 인공 호흡기, 2)는 마 취 기계, 3)는 삽 관 법 키트 (쌍 hemostat 집게, 혀 억압 물 18 G angiocatheter의 구성된), 4) 수술 도구 ( 등 굽은 집게의 쌍, 스트레이트 집게의 쌍, 바늘 드라이버, 가슴 견인가 위, 5-0 monofilament 봉합, 클립 주걱, 중간 큰 클립, 23 G 가슴 튜브).
  3. 메 마른 질문-팁 및 거 즈 출혈 다룰 준비가 있다.
  4. 가 열 패드를 사용 하 여 수술 하는 동안 동물 몸 온도 약 37 ° C를 유지.

2. 마 취와 Endotracheal 삽 관 법

  1. 2 L/min 방 공기 혼합 5 %isoflurane 유도 실에서 쥐를 anesthe....

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결과

고 라스의 효과 사용 하 여 심장 초음파, 수술 후 2 주 동안 확인 된다. 2.0 m/s, 4 상공 회의소 보기 측정 보다 큰 LV 유입 속도와 쥐 상당한 협 (그림 1)를 개발 하 고 안정적으로 적당 한 PH 및 폐 정 맥 arterialization 8-10 주 후 라스 수술 개발 간주 됩니다.

10 주 후 라스 수술, 라스 그룹에 쥐 표시 왼쪽된 심 방 확대 (그림 2B), 폐 혼잡 (그림 2E), 오른쪽 심 실 (RV) 압력 과부하 (그림 2F), 그리고는 폐 정 맥 흐름 증가 ( 그림 2 층

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토론

라스 쥐가 이미 필드12,13연구에서 상당한 관심을 받은 소설 그룹 2 PH 모델 이다. 두 개의 기존 그룹 2 모델, 즉 폐 정 맥 협 착 증 (PVS) 모델14, piglets, 그리고 supracoronary 대동맥 구간 (SAB) 쥐 모델8,를 사용 하 여 비교9,10, 라스 쥐 모델은 몇 가지 장점입니다. PVS 돼지 모델에 비해, 라스 쥐 모델 비용을 적게 생성 하 고 쥐에 수술은 돼지에는 보다 덜 복잡 한. 가장 일반적으로 사용 되 그룹 2 PH 동물 모델, 그룹 2의 이상 SAB 쥐 모델에 비해 PH 라스 모델에는 덜 SAB 모델에서 보다 복잡 왼쪽된 심 실 실패 개발 하기 전에 폐 발생 먼저 대동맥 밴.......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

저자는 과학 진흥 (JSP) 여름 프로그램에 대 한 Mitacs-일본 사회를 인정합니다. 핑 유 Xiong 지케이 대학 학부를 방문 하 여 Mitacs-JSP 여름 프로그램에서 자금을 지원 했다. 박사 Minamisawa는 교육, 문화, 스포츠, 과학 및 기술 일본의 (S.M.), 전략 연구 재단에 개인 대학 (S.M.), 자동차 경주 기념 MEXT-Supported 프로그램에 의해 부분적으로 지원 재단 (S.M.), 그리고는 지케이 대학 대학원 연구 기금 (S.M.)이이 프로젝트에 대 한 재정 지원. 아처 박사는 미국 국립 보건원 (NIH) 보조금 NIH 1R01HL113003-01A1 (S.L.A.) 및 NIH 2R01HL071115-08 (S.L.A.), 캐나다 혁신 재단, 미토 콘 드 리아 역학에 들어가게 계층 1 캐나다 연구의 자에 의해 부분적으로 지원 의학 (S.L.A.), 윌리엄 제이 헨 더 슨 재단, 캐나다 관 네트워크 그리고 여왕의 심장과 단위 (QCPU).

저자 씨 정전 Kokubo, 수석의 사진 서비스는 지케이 대학의과 대학에, 비디오 촬영에 대 한 학술 정보 센터의 인정 합니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
5-0 프롤렌 봉합존슨 & Johnson - Ethicon8725HHEMO-SEAL 기술 마취 기계를 사용한 폴리프로필렌 봉합
Wakenyaku Co., Ltd.BRTK-100A에어 펌프 및 마취 기계
Angiocatheter 가이드와이어자체 제작10cm 가이드와이어를 1cc 주사기에 접착;
흉부 견인기Natsume Seisakusho Co., Ltd.F-2
흉관 23G작10cc 주사기에 23G 바늘 플러스 플라스틱 튜브
곡선 집게나츠메 제작소 주식회사A-14
발열 패드VivariaMP-916-NV체온을 섭씨 37도로 유지
Horizon 결찰 클립TeleflexREF 003200크기 중
대형 Horizon 수동 부하 결찰 클립 애플리어 중대형 HorizonTeleflexREF 337085결찰 클립 각진 턱, (20cm)
바늘 홀더Natsume Seisakusho Co., Ltd.MC-40
설치류 호흡기CWE IncSAR-830/P소형 동물 인공호흡기
가위Natsume Seisakusho Co., Ltd.B-12스트레이트 가위가 이상적으로 라운드 팁
스트레이트 집게Natsume Seisakusho Co., Ltd.A-7
혀 압착기Uchida Yoko Co., Ltd.8-615-2417와이드 엔드 사용
사 사 자

참고문헌

  1. McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease. Circulation. 31, 263-272 (1965).
  2. Strange, G., et al. Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort. Heart. ....

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