تطبيق تكنولوجيا Biochip موائع جزيئية "الكشف عن مصل" الحساسية الخاصة "كريين مناعي ه" (sIgE)
Summary
وتعرض هذه الورقة على بروتوكول لاكتشاف المصل على حدة كريين مناعي ه مع نظام القائم على خرطوشة تشيميلومينيسسينسي موائع جزيئية وتقييم فائدتها في تشخيص الحساسية.
Abstract
أمراض الحساسية أمر شائع في كل من البالغين والأطفال. تحديد مسببات الحساسية المسببة مهم في علاج المرض والوقاية منه. ومع ذلك، التي تفتقر إلى نظام الغلوبولين مناعي محددة لقياس ه (IgE) مع نسبة ارتفاع أسعار-أداء في البر الرئيسي للصين، وبخاصة في مستشفيات الرعاية الصحية الأولية. وتصف هذه الورقة إجراءات المبدأ وتشغيلها باستخدام نظام تشيميلومينيسسينسي المستندة إلى خرطوشة موائع جزيئية للكشف عن حساسية خاصة فريق الخبراء الحكومي الدولي في المصل. تم مقارنة النتائج مع أولئك من إيمونوكاب (نظام 1)، المعيار الصناعي، ويتم تقييم إمكانية تكرار نتائج نظام للكشف عن المرضى توعيتهم بالمواد المسببة للحساسية شيوعاً. وأظهرت النتائج أن “نظام بيوايك” (نظام 2) بالمقارنة مع إيمونوكاب (نظام 1)، قد حسن دقة وحساسية في الكشف عن فريق الخبراء الحكومي الدولي الخاصة بمصل ضد حساسية المستنشق والأغذية المختلفة ولكن بتكلفة أقل بكثير. أنه يمكن أن تكون بمثابة بديل جيد للنظام 1 في الرعاية الصحية الأولية في المستشفيات في البر الرئيسي للصين الذين لديهم القدرة على تحمل التكاليف المالية أقل.
Introduction
انتشار الحساسية زيادة مطردة في العقود الماضية وهي تؤثر على 20% إلى 30% من سكان العالم1. تحديد مسببات الحساسية المسببة له مغزى هام في إدارة الأمراض. وفي الصين، حيث لا تتوفر اختبارات وخز الجلد المجراة في المسجلين في البلاد والعزم في المختبر لفريق الخبراء الحكومي الدولي الخاصة بمصل الدم هو أهم أداة شائعة الاستخدام للنوع الأول من الحساسية تشخيص2. هذا مماثل للممارسات في العالم الغربي، ولكن على الرغم من أن نظام إيمونوكاب (نظام 1)، نظام قاعدة المرتبط بالانزيم الممتز الأسفار، يعتبر بمثابة المعيار الذهبي ل تشخيص الحساسية في المختبر3، استعماله في الصين محدودة للغاية الواجب إلى ارتفاع سعره المعدات وكاشف. ومن ثم هو حاجة ماسة إلى نظام جديد لتشخيص الحساسية بديلة مع نسبة ارتفاع أسعار-أداء.
النظام بيويك (نظام 2) نظام قائم على خرطوشة موائع جزيئية استناداً إلى مبدأ تشيميلومينيسسينسي لفحوصات متعدد لفريق الخبراء الحكومي الدولي الخاصة بالمصل. مع حجم 7 سم × 4 سم، يتألف من ثلاث طبقات من البلاستيك حقن مصبوب خرطوشة موائع جزيئية. الجزء العلوي هو 3 مم سميكة شفافة البولي الذي يحمل الاستقرار جيدة أثناء العمليات الحرارية في الجمعية العامة. جنبا إلى جنب مع الطبقة 3 مم سميكة القاع شيدت من كوبوليمر بوتادين أكريلونيتريل والستيرين (ABS)، فإنه السندويشات 0.5 mm سميكة طبقة وسطى مصنوعة من المطاط سيليكون. يجري سوداء اللون، طبقة وسطى يقدم الخلفية السفلي أثناء الكشف عن تشيميلومينيسسينسي. على رأس هلام السليكا، يتم رش طبقة رقيقة من النيتروسليلوز الغشاء (غشاء NC) في الموضع المقابل لمنطقة رد الفعل، مما يسمح اكتشاف البروتينات المسببة للحساسية المختلفة. والغرض من هذه الدراسة تقييم أداء نظام موائع جزيئية لتحديد متعدد لفريق الخبراء الحكومي الدولي الخاصة بالحساسية في مصل الدم السريرية.
Protocol
Representative Results
Discussion
مماثلة للنتائج من العديد من الدراسات الأخرى15،16،17، النتائج من نظام موائع جزيئية استناداً إلى الأمصال من مرضى حساسية 293 أظهرت أن منزل الغبار العث (بما في ذلك بتيرونيسينوس د، فاريناي د، و تروبيكاليس باء) هي حساسية مواد التنشق…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
يشكر المؤلفون أستاذ مي جيانغ لمساعدتها في التحليل الإحصائي والسيد المطرقة تسوى في إعداد المخطوطة. هذه الدراسة أيده قوانغتشو العلم والتكنولوجيا مؤسسة (201804020043) والوطنية العلوم الطبيعية مؤسسة في الصين (81572063 تشرف وتشرف 81802076). مجموعات التمويل المتفق عليها مع تصميم الدراسة، وتحليل البيانات وإعداد مخطوطة، وقرار نشر. لم ترد أي تمويل آخر لهذه الدراسة.
Materials
| Agnitio BioIC Analyzer | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | BA-G2000 | |
| BioIC Allergen specific-IgE Detection Kit | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | DR17A12 | |
| BioIC Cartrideg Placement plate | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | T20SET | |
| BioIC Reagent Dispenser | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | DS-1 | |
| Image two-dimensional barcode machine | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | NLS-HR200 | |
| Software Package, LabIT | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | Version 2.4.12 | |
| VORTEX-5 Vortex Mixer | Haimen Kylinbell Lab Lastruments Co., Ltd. | VORTEX-5 |
References
- Kamble, S., Bharmal, M. Incremental Direct Expenditure of Treating Asthma in the United States. Journal of Asthma Research. 46 (1), 73-80 (2009).
- Paganelli, R., et al. Specific IgE antibodies in the diagnosis of atopic disease. Clinical evaluation of a new in vitro test system, UniCAP, in six European allergy clinics. Allergy. 53 (8), 763-768 (1998).
- Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (ige) tests performed by different assay systems. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 121 (5), 1219-1224 (2008).
- Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, Southern China. PLoS ONE. 9 (5), e94776 (2014).
- Zeng, G., et al. Component-Resolved Diagnostic Study of Dermatophagoides Pteronyssinus Major Allergen Molecules in a Southern Chinese Cohort. Journal of Investigational Allergology & Clinical Immunology. 25 (5), 343-351 (2015).
- Luo, W., et al. grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Molecular Immunology. 78 (2016), 105-112 (2016).
- Zeng, G., et al. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Molecular Immunology. 74 (2016), 1-9 (2016).
- Lee, J. H., et al. Specific IgE measurement using AdvanSure(R) system: comparison of detection performance with ImmunoCAP(R) system in Korean allergy patients. Clinica Chimica Acta. (9-10), 914-919 (2012).
- Eckels, J., et al. Quality control, analysis and secure sharing of Luminex(R) immunoassay data using the open source LabKey Server platform. Bmc Bioinformatics. 14 (1), 145 (2013).
- Bland, J. M., Altman, D. G. Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement. Lancet. 327 (8476), 307-310 (1986).
- Carletta, J. Assessing Agreement on Classification Tasks: The Kappa Statistic. Computational Linguistics. 22 (2), 249-254 (1996).
- Shyur, S. D., et al. Determination of multiple allergen-specific IgE by microfluidic immunoassay cartridge in clinical settings. Pediatric Allergy and Immunology. 21, 623-633 (2010).
- Cesana, B. M., Antonelli, P., Gallazzi, E., Marino, A. Comparison of measurement methods: an endless application of wrong statistical methods. Intensive Care Medicine. 37 (6), 1038-1040 (2011).
- Park, K. H., Lee, J., Sim, D. W., Lee, S. C. Comparison of Singleplex Specific IgE Detection Immunoassays: ImmunoCAP Phadia 250 and Immulite 2000 3gAllergy. Annals of Laboratory Medicine. 38 (1), 23-31 (2018).
- Teppo, H., Revonta, M., Haahtela, T. Allergic rhinitis and asthma have generally good outcome and little effect on quality of life – a 20-year follow-up. Allergy. 66 (8), 1123-1125 (2011).
- Fischer, J., et al. Prevalence of type I sensitization to alpha-gal in forest service employees and hunters. Allergy. 72 (10), 1540-1547 (2017).
- Li, J., et al. A multicentre study assessing the prevalence of sensitizations in patients with asthma and/or rhinitis in China. Allergy. 64 (7), 1083-1092 (2009).
- Ahlstedt, S. Understanding the usefulness of specific IgE blood tests in allergy. Clinical & Experimental Allergy. 32 (1), 11-16 (2002).
- Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Annals of Allergy Asthma & Immunology. 100 (2), 288-289 (2008).
- Aberer, W., Kränke, B., Hager, A., Wick, G. In vitro allergy testing needs better standardization–test results from different laboratories lack comparability mostly due to missing effective standards. International Archives of Allergy & Immunology. 108 (1), 82-88 (1995).
