Summary

バイオチップ マイクロ流体技術を応用した検出の血清中のアレルゲン特異免疫グロブリン E (sIgE)

Published: April 21, 2019
doi:

Summary

アレルギーの診断に血清特異免疫グロブリン E マイクロ カートリッジ ベースの化学発光システムとその有用性の評価を検出のためのプロトコルを提案する.

Abstract

アレルギー性疾患は、大人と子供の両方で共通です。原因となるアレルゲンの同定は疾患管理と予防に重要です。しかし、高い価格性能比を持つ特定免疫グロブリン E (IgE) 測定システムはプライマリ ・ ケアの病院を中心に、中国本土で欠けています。本稿では、血清中のアレルゲン特異的 IgE を検出するマイクロ カートリッジ ベースの化学発光システムを使用しての原理と操作手順について説明します。イムノ (システム 1)、工業規格からのそれらと比較した、共通のアレルゲンに感作患者を検出するシステムの再現性を評価します。イムノ (システム 1) と比較して BioIC システム (システム 2) が良好な精度と血清特異的 IgE 様々 な吸入、食物アレルゲンに対して、大幅に低いコストでの検出に感度を持って、その結果。それは低い金融手頃な価格を持っている中国本土のプライマリ ・ ケア病院でシステム 1 に良い代替として使用できます。

Introduction

アレルギーの有病率は過去数十年間に着実に増加しているし、1の世界の人口の 20-30% に影響を及ぼしています。原因となるアレルゲンの同定は疾患の管理に重要な意義です。中国では、国で登録されている体内の皮膚プリック テストは利用できないので、血清特異的 IgE の in vitro における決定は最も重要な一般的に使用されるツールの I 型アレルギーは、2を診断します。これは西部の世界で実践に似ていますが、イムノ システム (システム 1) 蛍光酵素免疫測定の基本システムは体外アレルギー診断3のためのゴールド スタンダードとして認識されて、中国での使用は非常に限られたため高い機器と試薬価格。それ故に高い価格性能比を持つ新しい代替アレルギー診断システムが必要ひどく。

BioIC システム (システム 2) は血清特異的 IgE の多重アッセイ用化学発光原理に基づくマイクロ カートリッジ ベース システムです。サイズは 7 cm × 4 cm、マイクロ カートリッジはプラスチックの射出成形の 3 つの層で構成されます。上の部分は 3 mm 厚の透明なポリカーボネート熱アセンブリ プロセス中に良好な安定性を運ぶです。一緒にアクリロニ トリル、ブタジエン、スチレン (ABS) の共重合体から構成されて 3 mm 厚底層、それは 0.5 mm 厚の中間層シリコーンゴム製のサンドイッチします。色の黒が、中間層では、化学発光検出時により低い背景を提供しています。ケイ酸ゲルの上に硝酸セルロースの膜 (NC 膜) の薄層は異なるアレルゲン蛋白質のスポッティングが可能反応ゾーンに対応する位置に散布されています。本研究の目的は、多重化された血清中のアレルゲン特異的 IgE によるマイクロ流体システムの臨床性能評価することです。

Protocol

この研究と人間の血清の使用は、最初提携病院の広州医科大学 (GYYY-2016-73) の倫理委員会によって承認されました。すべての参加者は、単独で、あるいは (子供) の場合親を介して彼らの書面による同意を与えています。 研究会の基本情報 注: 状態キー研究所の呼吸器疾患 (空気 SKLRD) のアレルギー情報リポジトリは広州呼吸研究所病院 (GIRH) 内に開設さ?…

Representative Results

19 一般的なアレルゲンの陽性率293 血清の結果は、図 3のとおりです。コナヒョウヒダニすべての吸入性アレルゲンの中で最も高い陽性率を持っていた (80.89%, 273/293) D.続いてヤケヒョウヒダニ(78.84%, 231/293)。食物アレルゲンの中でカニは最高の陽性率 (20.48%、60/293) 13.65% (40/293) エビが続きます。食物アレルゲンよ…

Discussion

結果と同様に他の多くの研究から15,16,17、その家を示した 293 アレルギー患者の血清に基づくマイクロ流体システムから結果ダニ (含むヤケヒョウヒダニD. コナヒョウヒダニB. 性) が主な吸入性アレルゲンの食品、牛乳、ピーナッツ、エビ、カニはアレルギー症状を引き起こす最も一般的なアレルゲ…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者は、原稿の準備で統計解析に梅江教授と氏ハンマー ツイをありがとうございます。本研究は、広州科学技術振興財団 (201804020043) と、国家自然科学基金、中国の (NSFC 81572063 および NSFC 81802076) によって支えられました。資金調達グループは、研究デザイン、データの解析、原稿を準備、発行するという決定に同意しました。他の資金受信されませんでしたこの研究のため。

Materials

Agnitio BioIC Analyzer Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) BA-G2000
BioIC Allergen specific-IgE Detection Kit Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) DR17A12
BioIC Cartrideg Placement plate Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) T20SET
BioIC Reagent Dispenser Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) DS-1
Image two-dimensional barcode machine Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) NLS-HR200
Software Package, LabIT Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) Version 2.4.12
VORTEX-5 Vortex Mixer Haimen Kylinbell Lab Lastruments Co., Ltd. VORTEX-5

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Cite This Article
Huang, Z., Luo, W., Zou, X., Liu, X., Cai, C., Wu, Z., Hu, H., Sun, B. Application of Biochip Microfluidic Technology to Detect Serum Allergen-specific Immunoglobulin E (sIgE). J. Vis. Exp. (146), e59100, doi:10.3791/59100 (2019).

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