Summary

Biochip mikrosıvısal teknolojisi uygulama algılamak Serum alerjen özgü immünglobulin e (sIgE)

Published: April 21, 2019
doi:

Summary

Bu kağıt bir mikrosıvısal kartuş tabanlı Kemiluminesan sistemi ve kullanışlılığı değerlendirilmesi ile serum özel immünglobulin E Anti tanılar algılamak için bir protokol sunar.

Abstract

Alerjik hastalık hem yetişkinler hem de çocuklar yaygındır. Etken alerjenler tanımlaması hastalık yönetimi ve korunma önemlidir. Ancak, bir özel immünglobulin E (IgE) ölçüm sistemi yüksek fiyat-performans oranı ile anakara Çin, özellikle birinci basamak sağlık hastanelerde bulunmuyor. Bu kağıt alerjen özgü IgE serum içinde algılamak için bir mikrosıvısal kartuş tabanlı Kemiluminesan sistemi kullanarak ilke ve işlem yordamlar açıklanır. Sonuçları o–dan ImmunoCAP (sistem 1), endüstriyel standart ile karşılaştırıldı ve tekrarlanabilirlik sisteminin yaygın alerjenler için duyarlı hastalar algılamak için değerlendirdi. Sonuçlar ImmunoCAP (sistem 1) ile karşılaştırıldığında iyi hassas ve duyarlılık içinde serum özgü IgE çeşitli spreyini ve gıda alerjenleri karşı ama önemli ölçüde düşük maliyetli hafiye BioIC sistemi (sistem 2) olduğunu gösterdi. Sistem 1 daha düşük mali uygun fiyatta olan birinci basamak sağlık hastaneler anakara Çin’de iyi bir alternatif olarak hizmet verebilir.

Introduction

Alerji yaygınlığı giderek son on yıl içinde artmıştır ve1dünya nüfusunun 20-% 30 etkiliyor. Etken alerjenler tanımlaması hastalıkların yönetiminde önemli önem taşımaktadır. Çin’de kayıtlı içinde vivo cilt prick testler ülkede mevcut değildir, serum özgü IgE tüp bebek belirlenmesi en önemli ve yaygın olarak kullanılan araç için tip ı alerji beri2tanılar. Bu uygulamalar Batı dünyasında benzer, ancak rağmen ImmunoCAP sistemi (sistem 1), Floresans enzim bağlı immunosorbent temel sistemi, tüp bebek Anti tanı3altın standart olarak algılanan, Çin’deki kullanım çok nedeniyle sınırlıdır onun yüksek ekipman ve reaktif fiyat için. Bu nedenle yüksek fiyat-performans oranı ile yeni bir alternatif Anti Tanı sistemi çok gerekli.

BioIC (sistem 2) serum özgü IgE çoğaltılmış deneyleri için Kemiluminesan prensibi temel bir mikrosıvısal kartuş tabanlı sistemdir. 7 cm x 4 cm, ile bir boyutu mikrosıvısal kartuş plastik enjeksiyon kalıp üç katmandan oluşur. Termal derleme işlemleri sırasında iyi istikrar taşıyan 3 mm kalınlıkta şeffaf polikarbonat en üst kısmıdır. Akrilonitril, bütadiyen ve stiren (ABS) kopolimer inşa 3 mm kalınlığında alt tabaka ile birlikte 0,5 mm kalınlığında Orta tabaka silikon kauçuk hortumdur sandviç. Renk siyah olmak, Orta tabaka Kemiluminesan algılama sırasında alt arka plan sunar. Silika jel üzerine nitroselüloz membran (NC membran) ince bir tabaka farklı Alerjik proteinler lekelenme sağlayan reaksiyon bölgesine karşılık gelen konumundaki püskürtülür. Bu çalışmada mikrosıvısal sistem alerjen özgü IgE Serumda çoğaltılmış belirlenmesi için klinik performansını değerlendirmek etmektir.

Protocol

Bu çalışma ve insan serum numuneleri kullanımı ilk bağlı hastane Guangzhou Tıp Üniversitesi (GYYY-2016-73) Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Tüm katılımcılar kendi yazılı izni bağımsız olarak veya aileleri (durumunda çocuk) aracılığıyla verdik. 1. temel bilgiler çalışma grubu Not: Anti bilgi deposu devlet anahtar laboratuvar, solunum yolu hastalığı (Hava-SKLRD) Guangzhou Enstitüsü solunum Hastanesi (GIRH) içinde kurulan bir büyü…

Representative Results

19 yaygın alerjenler için olumlu oranları293 sera sonuçlarına şekil 3′ te gösterilmektedir. Tüm soluk çeken alerjenler arasında D. farinae en yüksek pozitif oranı vardı (.89, 273/293), ö. tarafından takip Pteronyssinus (.84, 231/293). Gıda alerjenleri arasında yengeç en yüksek pozitif oranına sahip (.48, 60/293), .65 (40/293) karides için takip. Toplam pozitiflik oranı için sol…

Discussion

Benzer sonuçlar için birçok diğer çalışmalar15,16,17, sera o evi gösterdi 293 Alerjik hastaların temel mikrosıvısal sistem sonuçlarından toz akarları ( D. pteronyssinus, dahil olmak üzere Ö farinaeve B. tropicalis) olan Çin’in güneyinde, alerjik hastalık ise gıda, süt, fıstık, karides ve yengeç olan Alerjik belirtiler neden yaygın alerjenler önde gelen ana soluk çeken alerje…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar Profesör Mei Jiang istatistiksel analiz onun yardım ve Bay Hammer Tsui yazının hazırlanmasında teşekkür ederiz. Bu çalışmada Guangzhou bilim ve teknoloji Vakfı (201804020043) ve Ulusal Doğa Bilimleri Foundation of China (NSFC 81572063 ve NSFC 81802076) tarafından desteklenmiştir. Finansman grupları çalışma tasarımı, veri analizi, el yazması hazırlama ve yayınlama kararı ile kabul etti. Hiçbir diğer finansman bu çalışma için alındı.

Materials

Agnitio BioIC Analyzer Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) BA-G2000
BioIC Allergen specific-IgE Detection Kit Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) DR17A12
BioIC Cartrideg Placement plate Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) T20SET
BioIC Reagent Dispenser Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) DS-1
Image two-dimensional barcode machine Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) NLS-HR200
Software Package, LabIT Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) Version 2.4.12
VORTEX-5 Vortex Mixer Haimen Kylinbell Lab Lastruments Co., Ltd. VORTEX-5

References

  1. Kamble, S., Bharmal, M. Incremental Direct Expenditure of Treating Asthma in the United States. Journal of Asthma Research. 46 (1), 73-80 (2009).
  2. Paganelli, R., et al. Specific IgE antibodies in the diagnosis of atopic disease. Clinical evaluation of a new in vitro test system, UniCAP, in six European allergy clinics. Allergy. 53 (8), 763-768 (1998).
  3. Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (ige) tests performed by different assay systems. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 121 (5), 1219-1224 (2008).
  4. Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, Southern China. PLoS ONE. 9 (5), e94776 (2014).
  5. Zeng, G., et al. Component-Resolved Diagnostic Study of Dermatophagoides Pteronyssinus Major Allergen Molecules in a Southern Chinese Cohort. Journal of Investigational Allergology & Clinical Immunology. 25 (5), 343-351 (2015).
  6. Luo, W., et al. grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Molecular Immunology. 78 (2016), 105-112 (2016).
  7. Zeng, G., et al. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Molecular Immunology. 74 (2016), 1-9 (2016).
  8. Lee, J. H., et al. Specific IgE measurement using AdvanSure(R) system: comparison of detection performance with ImmunoCAP(R) system in Korean allergy patients. Clinica Chimica Acta. (9-10), 914-919 (2012).
  9. Eckels, J., et al. Quality control, analysis and secure sharing of Luminex(R) immunoassay data using the open source LabKey Server platform. Bmc Bioinformatics. 14 (1), 145 (2013).
  10. Bland, J. M., Altman, D. G. Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement. Lancet. 327 (8476), 307-310 (1986).
  11. Carletta, J. Assessing Agreement on Classification Tasks: The Kappa Statistic. Computational Linguistics. 22 (2), 249-254 (1996).
  12. Shyur, S. D., et al. Determination of multiple allergen-specific IgE by microfluidic immunoassay cartridge in clinical settings. Pediatric Allergy and Immunology. 21, 623-633 (2010).
  13. Cesana, B. M., Antonelli, P., Gallazzi, E., Marino, A. Comparison of measurement methods: an endless application of wrong statistical methods. Intensive Care Medicine. 37 (6), 1038-1040 (2011).
  14. Park, K. H., Lee, J., Sim, D. W., Lee, S. C. Comparison of Singleplex Specific IgE Detection Immunoassays: ImmunoCAP Phadia 250 and Immulite 2000 3gAllergy. Annals of Laboratory Medicine. 38 (1), 23-31 (2018).
  15. Teppo, H., Revonta, M., Haahtela, T. Allergic rhinitis and asthma have generally good outcome and little effect on quality of life – a 20-year follow-up. Allergy. 66 (8), 1123-1125 (2011).
  16. Fischer, J., et al. Prevalence of type I sensitization to alpha-gal in forest service employees and hunters. Allergy. 72 (10), 1540-1547 (2017).
  17. Li, J., et al. A multicentre study assessing the prevalence of sensitizations in patients with asthma and/or rhinitis in China. Allergy. 64 (7), 1083-1092 (2009).
  18. Ahlstedt, S. Understanding the usefulness of specific IgE blood tests in allergy. Clinical & Experimental Allergy. 32 (1), 11-16 (2002).
  19. Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Annals of Allergy Asthma & Immunology. 100 (2), 288-289 (2008).
  20. Aberer, W., Kränke, B., Hager, A., Wick, G. In vitro allergy testing needs better standardization–test results from different laboratories lack comparability mostly due to missing effective standards. International Archives of Allergy & Immunology. 108 (1), 82-88 (1995).
check_url/kr/59100?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Huang, Z., Luo, W., Zou, X., Liu, X., Cai, C., Wu, Z., Hu, H., Sun, B. Application of Biochip Microfluidic Technology to Detect Serum Allergen-specific Immunoglobulin E (sIgE). J. Vis. Exp. (146), e59100, doi:10.3791/59100 (2019).

View Video