Опухоли мочевого пузыря мышиных индуцированных с канцерогенных нитрозаминов N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) (BBN). Поколение опухоли мочевого пузыря является неоднородной; Поэтому точной оценки бремени опухоли требуется до рандомизации для экспериментального лечения. Здесь мы представляем быстрый, надежный протокол МРТ для оценки размера опухоли и стадии.
Мышиных пузыря опухоли модели имеют решающее значение для оценки новых терапевтических возможностей. Опухоли мочевого пузыря, индуцированной с канцерогенных нитрозаминов (BBN) N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) выгодны над клеток линии на основе модели, потому что они тесно репликация геномной профили человека опухоли, и, в отличие от клеток модели и ксенотрасплантатов, они обеспечивают хорошая возможность для изучения immunotherapies. Однако поколение опухоли мочевого пузыря является неоднородной; Поэтому точной оценки бремени опухоли требуется до рандомизации для экспериментального лечения. Описанные здесь является BBN мыши модель и протокол для оценки мочевого пузыря рак опухоли бремя в естественных условиях с помощью последовательности быстрый и надежный магнитный резонанс (МР) (правда FISP). Этот метод является простым и надежным, потому, что, в отличие от УЗИ, Мистер зависит от оператора и позволяет для обработки простой после приобретения изображений и обзор. С помощью осевой изображений мочевого пузыря, анализ регионов интерес вдоль стенки мочевого пузыря и опухоли позволяют для расчета площади стены и опухоли мочевого пузыря. Это измерение коррелирует с ex vivo вес мочевого пузыря (rs= 0,37, p = 0,009) и стадии опухоли (p = 0.0003). В заключение BBN генерирует гетерогенных опухоли, которые идеально подходят для оценки immunotherapies, и МРТ может быстро и надежно оценить опухоли бремя до рандомизации для экспериментального лечения оружия.
Рак мочевого пузыря является пятым наиболее распространенной формой рака в целом, отвечает за примерно 80 000 новых случаев заболевания и 16 000 смертей в Соединенных Штатах в 2017 году1. Примерно через 30 лет без значительных успехов для системного лечения рака мочевого пузыря2недавние испытания ингибитора анти PD-1 и анти PD-L1 КПП продемонстрировали захватывающие и иногда прочный ответы больных с передовой Urothelial карцинома3,4,5. Однако только около 20% больных показывают объективный ответ на эти процедуры, и необходимы дальнейшие исследования для расширения эффективного использования иммунотерапия больных с раком мочевого пузыря.
Мышиных мочевого пузыря рак модели являются важнейшими инструментами в доклинической оценке Роман лечения6,7. Для того чтобы контролировать размер опухоли при случайной мышей для различных методов лечения, опухоль бремя должны оценивать и контролируемых между группами лечения. Предыдущие исследования использовали УЗИ или биолюминесценции для оценки ортотопическая клеток на основе линии мочевого пузыря рак модели8,9,10,11. Однако оба методы представляют несколько недостатков. Ультразвуковых измерений могут зависеть от навыков оператора и отсутствие трехмерные характеристики и высокое пространственное разрешение. Биолюминесценции методы обеспечивают только полу количественной оценки опухолевых клеток и не позволяют для визуализации мочевого пузыря анатомии и морфологии. Кроме того биолюминесценцию может использоваться только с моделями на основе линии клеток, которые выражают биолюминесцентных генов в лысых мышей или мышей с белым пальто.
Магнитно-резонансная томография (МРТ), с другой стороны, предлагает уникальную гибкость в приобретении анатомических изображений с высоким разрешением, выставляют широкий спектр тканей контраст, который позволяет точную визуализацию и количественной оценки бремени опухоли без необходимости выразить биолюминесцентных свойства. Г-н изображения более легко воспроизводимые с соответствующий анализ трубопроводов и процедуру визуализации мочевого пузыря. Крупнейший ограничения МРТ, продолжительность времени, необходимого для обследования и связанные высокие затраты, которые ограничивают анализов высокой пропускной способности. Однако несколько исследований показали, что г-н последовательностей может предоставить диагностические изображения высокого качества, которые могут использоваться для эффективного выявления и мониторинга клетки опухоли мочевого пузыря, на основе линии; Таким образом они могут использоваться для высокой пропускной способности анализа9,12.
Здесь мы описываем неинвазивный метод, основанный на MR, надежно и эффективно охарактеризовать канцероген индуцированной пузыря опухолей у мышей. Для этого мы используем быстро изображений с установившемся прецессии MR техника (правда FISP), который гарантирует короткие сканирования сессий, обеспечивая высокое качество и высокое пространственное разрешение (~ 100 мкм) для обнаружения и измерения мочевого пузыря опухоли13. Кроме того чтобы подтвердить точность этой неинвазивной пробирного МРТ, мы описываем корреляции между МРТ производные параметры и ex vivo вес мочевого пузыря, а также стадии патологически подтвердил опухоли.
Точная визуализация моделей опухоли необходим для соответствующей предварительной эвтаназии промежуточной и животных рандомизации до начала экспериментального лечения. С помощью процедуры, представленные здесь, мы демонстрируем методологии (1) генерировать опухоли мочевого пузыря …
The authors have nothing to disclose.
J. J. M. финансируется ветеранов здравоохранения администрации заслуги Грант BX0033692-01. J. J. м. также поддерживается Фондом Джона P. Hanson для исследований рака университета Роберт H. Лурье всеобъемлющем Рак центр из северо. Мы благодарим центр для трансляционного Imaging за приобретение МРТ и обработки. Источники финансирования имел никакой роли в письменной форме рукописи или решение представить для публикации.
C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 664 | Mice |
N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine carcinogen (BBN) | TCI American | B0938 | Carcinogen |
0.9% normal saline | Hospira, Inc | NDC 0409-488-02 | |
Isoflurane | Piramal HealthCare | 60307-120-25 | Anesthetic |
7Tesla ClinScan MRI | Bruker | NA | Dedicated Small Animal Imaging MRI |
Syngo | Siemens | NA | MR Integrated Imaging Software |
Model 1030 Monitoring & Gating System | Small Animal Instruments, Inc. (SAII) | NA | Small animal physiologic monitoring |
Formalin, Neutral Buffered, 10% | Sigma | HT501128 | Fixative |
Eosin Y | Fisher Scientific | NC1093844 | Histologic staining agent |
Hematoxylin | Fisher Scientific | 23-245651 | Histologic staining agent |
Jim7 | Xinapse Systems | NA | Medical image analysis software |
GraphPad Prism v7.04 | Graphpad | NA | Graphing software |
R v3.4.2 | The R Project for Statistical Computing | NA | Statistical software |
R package pROC v1.10.0. | The R Project for Statistical Computing | NA | ROC analysis |