चूहों में Immobilization-प्रेरित घुटने फ्लेक्सियन अनुबंध के अध्ययन के लिए एक मिनी इनवेसिव आंतरिक निर्धारण तकनीक
Summary
यहाँ, हम एक चूहा मॉडल में घुटने संयुक्त स्थिरीकरण के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव तकनीक का वर्णन करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं. इस reproduible प्रोटोकॉल, मांसपेशी अंतराल जुदाई मोडस और मिनी चीरा कौशल पर आधारित, अर्जित संयुक्त अनुबंध के अंतर्निहित आणविक तंत्र का अध्ययन करने के लिए उपयुक्त है.
Abstract
संयुक्त अनुबंध, एक लंबे समय तक संयुक्त स्थिरीकरण के परिणामस्वरूप, आर्थोपेडिक्स में एक आम जटिलता है। वर्तमान में, घुटने संयुक्त गतिशीलता को प्रतिबंधित करने के लिए एक आंतरिक निर्धारण का उपयोग प्रयोगात्मक अनुबंध उत्पन्न करने के लिए एक व्यापक रूप से स्वीकार किए जाते हैं मॉडल है। हालांकि, आवेदन प्रत्यारोपण अनिवार्य रूप से जानवरों के लिए शल्य आघात का कारण होगा. एक कम इनवेसिव दृष्टिकोण विकसित करने के उद्देश्य से, हम शल्य प्रक्रिया के दौरान एक पहले से सूचित मिनी चीरा कौशल के साथ एक मांसपेशी अंतराल जुदाई modus संयुक्त: दो मिनी त्वचा चीरों पार्श्व जांघ और पैर पर किए गए थे, मांसपेशियों अंतराल प्रदर्शन के बाद हड्डी की सतह को बेनकाब करने के लिए जुदाई। चूहे घुटने संयुक्त धीरे-धीरे आवश्यक नसों या रक्त वाहिकाओं में हस्तक्षेप के बिना लगभग 135 डिग्री घुटने flexion पर एक पूर्व निर्मित आंतरिक निर्धारण द्वारा स्थिर किया गया था। जैसा कि उम्मीद थी, इस सरल तकनीक पशुओं में तेजी से पश्चात पुनर्वास की अनुमति देता है. आंतरिक निर्धारण की सही स्थिति एक एक्स-रे या माइक्रो-सीटी स्कैनिंग विश्लेषण द्वारा पुष्टि की गई थी। गति की सीमा काफी स्थिर घुटने के संयुक्त में प्रतिबंधित किया गया था कि contralateral घुटने संयुक्त में मनाया इस मॉडल की प्रभावशीलता का प्रदर्शन. इसके अलावा, हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण समय के साथ पीछे-बेहतर घुटने संयुक्त कैप्सूल में रेशेदार जमाव और आसंजन के विकास से पता चला। इस प्रकार, इस मिनी इनवेसिव मॉडल स्थिर घुटने संयुक्त अनुबंध के विकास की नकल के लिए उपयुक्त हो सकता है.
Introduction
संयुक्त अनुबंधों को एक द्वि-हृदयीय संयुक्त1,2की गति (रोम) की निष्क्रिय श्रेणी में प्रतिबंध के रूप में परिभाषित किया जाता है। संयुक्त अनुबंध को रोकने और उसका उपचार करने के उद्देश्य से वर्तमान उपचारों ने कुछ सफलता3,4प्राप्त की है . तथापि, अधिग्रहीत संयुक्त अनुबंध केअंतर्निहित आणविक तंत्र काफी हद तक अज्ञात रहता है 5. विभिन्न सामाजिक समुदायों में संयुक्त अनुबंधों की ईटियोलॉजी अत्यधिक विविध है और इसमें आनुवंशिक कारक, पोस्टट्रैमेटिक राज्य, पुरानी बीमारियां और लंबे समय तक गतिहीनता6शामिल हैं। यह व्यापक रूप से स्वीकार किया जाता है कि अर्जित संयुक्त संविदा7के विकास में गतिहीनता एक महत्वपूर्ण मुद्दा है . जो लोग प्रमुख संयुक्त अनुबंध से पीड़ित हैं , वे अंततः शारीरिक विकलांगता8का परिणाम हो सकते हैं . इस प्रकार, एक स्थिर और reproduible पशु मॉडल प्राप्त संयुक्त अनुबंध के संभावित pathophysiological तंत्र की जांच के लिए आवश्यक है.
वर्तमान में बनाया immobilization प्रेरित घुटने संयुक्त अनुबंध मॉडल ज्यादातर गैर इनवेसिव प्लास्टर डाले का उपयोग करके हासिल कर रहे हैं, बाहरी निर्धारण, और आंतरिक निर्धारण. वाटानाबे एट अल ने चूहे के घुटने के जोड़ों पर प्लास्टर कास्ट के उपयोग की संभावना की सूचनादी 9. एक विशेष जैकेट पहनने से, चूहे के निचले अंग संयुक्त के एक तरफ एक कलाकारों द्वारा स्थिर है। चूहे के घुटने का जोड़ बिना सर्जिकल आघातकेपूरी तरह से लचीला बना रह सकता है . हालांकि, दोनों कूल्हे और टखने के संयुक्त आंदोलनों को भी स्थिरीकरण के इस रूप से प्रभावित होते हैं, जो क्वाड्रिसेप्स फेमोरिस या गैस्ट्रोकेमियस12में मांसपेशियों शोष की डिग्री बढ़ा सकते हैं। इसके अलावा, निर्धारित समय बिंदुओं पर कलाकारों को बदलकर पिछले अंगों की एडीमा और भीड़ से बचा जाना चाहिए, जो गतिहीनता की निरंतरता को प्रभावित कर सकता है। एक घुटने संयुक्त अनुबंध मॉडल की स्थापना के लिए एक और स्वीकार किए जाते हैं विधि बाहरी शल्य निर्धारण का उपयोग कर रहा है. Nagai एट अल. एक बाहरी फिक्सर में Kirschner तार और इस्पात के तार संयुक्त है, जो लगभग 140 फ्लेक्सियन13के लिए घुटने के संयुक्त स्थिर. इस विधि में, एक राल त्वचा खरोंच को रोकने के लिए सतह को कवर करने के लिए प्रयोग किया जाता है। यद्यपि बाह्य स्थिरीकरण स्थिरीकरण मजबूत और विश्वसनीय14,15, पर्कटेनेसकिर्शनर तार पिन पटरियों से संक्रमण का खतरा बढ सकता है . हमारे अपने अनुभव में, बाहरी निर्धारण तकनीक का उपयोग कर वातानुकूलित चाटना व्यवहार में वृद्धि के कारण चूहों की दैनिक गतिविधि को कम कर सकते हैं.
वैकल्पिक रूप से, Trudel एट अल एक शल्य आंतरिक निर्धारण17 के आधार पर चूहे घुटने संयुक्त में संयुक्त अनुबंध के एक अच्छी तरह से स्वीकार मॉडल वर्णित (इस विधि इवांस और सहयोगियों द्वारा इस्तेमाल किया एक से संशोधित किया गया था18). विशेष रूप से, इस विधि शल्य घावों को कम करने के लिए एक मिनी चीरा तकनीक का उपयोग करने के महत्व पर प्रकाश डाला गया. इस मॉडल 19 में संयुक्त अनुबंधका कुशल विकास सिद्ध हुआ है . हालांकि, कैसे हड्डी की सतह को बेनकाब करने के लिए एक न्यूनतम विच्छेदन प्रदर्शन करने के लिए पर प्रोटोकॉल अभी भी स्पष्ट नहीं है20. इसके अलावा, सटीक स्थिति जहां पेंच ड्रिलिंग है पूरी तरह से समझ में नहीं आ रहा है. एक subcutaneous या submuscular रास्ते के माध्यम से आंतरिक निर्धारण के प्रत्यारोपण अभी भी विवादास्पद21है . इन समस्याओं को हल करने के लिए, हम एक उपयुक्त मांसपेशी अंतराल जुदाई modus, जो हड्डी की सतह के एक मिनी इनवेसिव जोखिम और एक submuscular चैनल के माध्यम से प्रत्यारोपण की नियुक्ति की अनुमति देता है सहित इस विधि को संशोधित किया है. इस प्रोटोकॉल सर्जरी के बाद चूहों में तेजी से पश्चात पुनर्वास के लिए नेतृत्व किया. पशुओं ने संयुक्त गति के बाद गति की एक सीमित संयुक्त श्रेणी विकसित की, जो हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण से प्राप्त कैप्सुलर आसंजन के रूपात्मक परिवर्तनों के अनुरूप थी। हम भी एक्स-रे विश्लेषण या माइक्रो-सीटी विश्लेषण द्वारा की पुष्टि के रूप में drilled शिकंजा का एक सटीक संभव स्थान का वर्णन। इस प्रकार, इस अध्ययन के लिए विस्तार से एक घुटने संयुक्त अनुबंध मॉडल है कि एक मांसपेशी अंतराल जुदाई एक मिनी चीरा विधि के साथ संयुक्त तरीके से स्थापित किया गया था में एक न्यूनतम इनवेसिव तकनीक का वर्णन करने के उद्देश्य से. हमें विश्वास है कि न्यूनतम इनवेसिव तकनीक दोनों पशु आघात को कम करने और प्रभावी ढंग से संयुक्त flexion अनुबंध के रोग प्रक्रिया की नकल कर सकते हैं.
Protocol
Representative Results
Discussion
इस अध्ययन के लिए एक कदम दर कदम घुटने संयुक्त स्थिरीकरण विधि एक मिनी इनवेसिव तकनीक है कि सर्जरी के बाद जानवरों में तेजी से पश्चात पुनर्वास की अनुमति का उपयोग कर स्पष्ट करने के उद्देश्य से. परंपरागत रूप स…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (सं. 81772368), गुआंग्डोंग प्रांत के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (नहीं 2017A030313496), और गुआंग्डोंग प्रांतीय विज्ञान और प्रौद्योगिकी योजना परियोजना (नहीं 2016A020215225) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था; नहीं, 2017B090912007). लेखकों संशोधन के दौरान अपनी तकनीकी सहायता के लिए सूर्य यात-सेन विश्वविद्यालय के आठवें संबद्ध अस्पताल, विकलांग सर्जरी विभाग से डॉ फी झांग, एमडी धन्यवाद।
Materials
| Anerdian | Shanghai Likang Ltd. | 310173 | antibacterial |
| Buprenorphine | Shanghai Shyndec Pharmaceutical Ltd. | / | analgesia |
| Carprofen | MCE | HY-B1227 | analgesia |
| Cross screwdriver | STANLEY | PH0*125mm | tighten the screws |
| Electric drill | WEGO | 185 | drill hole(with stainless steel drill 0.9mm;1.0mm) |
| Microsurgical instruments | RWD | / | Orthopaedic surgical instruments for animals |
| Neomycin | Sigma | N6386 | antibacterial |
| Sodium pentobarbital | Sigma | P3761 | anaesthetize |
| Stainless Steel screws | WEGO | m1.4*8; m1.2*6 | screw(part of internal fixation) |
| Syringe | WEGO | 3151474 | use for plastic plate(part of internal fixation) |
| μ-CT | ALOKA | Latheta LCT-200 | in vivo CT scan |
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