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Cromatina Immunoprecipitazioni Analisi Utilizzando Nucleasi Micrococal nelle cellule di Mammaliana
JoVE 신문
유전학
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JoVE 신문 유전학
Chromatin Immunoprecipitation Assay Using Micrococcal Nucleases in Mammalian Cells
DOI:

11:42 min

May 10, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:38Determination of MNase Digestion Conditions
  • 04:06Reverse Crosslinking, Purification of DNA, and Analysis of Digested Chromatin
  • 06:33Chromatin Immunoprecipitation
  • 09:24Results: Representative Microphotographs, Agarose Gel Analysis, and Occupancy in the AR Genome
  • 10:42Conclusion

Summary

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L'immunoprecipitazioni della chromatina (ChIP) è un potente strumento per comprendere i meccanismi molecolari della regolazione genica. Tuttavia, il metodo comporta difficoltà nell'ottenere la frammentazione della cromatina riproducibile mediante tosatura meccanica. Qui, forniamo un protocollo migliorato per un saggio ChIP utilizzando la digestione ezimatica.

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