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방법 논문

합계 주파수 생성 진동 분광법을 통해 밝혀진 중합체 및 생체 거력의 계면 분자 수준 구조

8.8K 조회수

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DOI:

10.3791/59380

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2019년 8월 13일

 ,  , 

이 논문에서

요약

종합적으로 활용되는 합계 주파수 생성(SFG) 진동 분광법은 중합체 및 생체 거시적 계면에서 일어나는 사슬 형태 순서 및 이차 구조 변화를 밝히는 데 도움이 될 수 있습니다.

초록

2차 비선형 광학 분광법으로서, 합계 주파수 생성(SFG) 진동 분광법은 다양한 표면과 인터페이스를 조사하는 데 널리 사용되어 왔습니다. 이 비침습적 광학 기술은 단층 또는 하위 단일층 감도로 국소 분자 수준 정보를 제공할 수 있습니다. 우리는 여기에서 거대 분자와 생체 거대 분자 둘 다를 위한 매장된 계면을 선택적으로 검출하는 방법에 대한 실험적인 방법론을 제공하고 있습니다. 이를 염두에 두고, 실크 섬유인의 계면 보조 구조와 모델 짧은 사슬 올리고뉴클레오티드 이중 을 둘러싼 물 구조가 논의된다. 전자는 체인 체인 중복 또는 공간 감금 효과를 나타내며, 후자는 물의 키랄 척추 상부 구조로 인한Ca2+ 이온에 대한 보호 기능을 보여줍니다.

서론

화 주파수 생성 (SFG) 진동 분광법의 개발은 30 년 전1,2. 계면 선택성 및 하위 단층 감도의 고유성은 SFG 진동 분광법을 물리학, 화학, 생물학 및 재료 과학 등의 분야에서 많은수의 연구자들이 평가하게 합니다 3,4 ,5. 현재 표면 및 인터페이스와 관련된 광범위한 과학적 문제가 SFG를 사용하여 조사되고 있으며, 특히 중합체 및 생체 거시 분자와 관련된 복잡한 인터페이스(예: 체인 구조 및 구조적 이완)에 대해 매장 된 폴리머 인터페이스, 단백질 이차 구조및 계면 물 구조 9,10,11,12,13,14, 1....

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프로토콜

1. SFG 실험

  1. Nd:YAG 레이저를 기반으로 펄스폭 ~20ps 및 주파수 50Hz의 기본 1064 nm 빔을 제공하는 상업용 피코초 SFG 시스템(재료 표)을 사용합니다.
  2. 기본 1064 nm 빔을 두 번째 및 세 번째 고조파 모듈을 사용하여 532 nm 빔과 355 nm 빔으로 변환합니다. 직접 입력 광 빔으로 532 nm 빔을 안내하고 광학 파라 메트릭 생성 (OPG)/ 광학 파라 메트릭 증폭 (OPA)를 통해 1000 ~ 4000cm-1의 주파수 범위를 포함하는 다른 입력 중간 적외선 (IR) 빔을 생성합니다. 차이 주파수 생성 (DFG) 프로세스.
  3. 두 입력 빔의 입사 각도를 표면 법선대비 각각 53°(IR) 및 64°(가시)로 설정합니다.
  4. 폴리머 계면 구조(필름/기판 인터페이스 또는 필름/기타 중간 인터페이스)를 감지하려면 ssp(s-편광 화주파수 빔, s편광 가시 광선 및 p 편광 적외선 빔) 및 ppp 편광 조합을 사용합니다.
  5. DNA를 둘러싼 계면 단백질 이차 구조 및 물 구조를 검출하기 위해, ssp 및 ppp 외에, 키랄 Spp 및 psp 편광 조합을 사용하였다.
  6. 시료가 손상되지 않도록 적외....

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결과

프로토콜 섹션의 프레넬 계수 부분에서는 이론적으로 한 번에 하나의 인터페이스만 선택적으로 감지하는 것이 가능하다는 것을 보여 주어 도모했습니다. 여기서, 실험적으로, 우리는 이 방법론이 그림 5 및 그림 6에 도시된 바와 같이 기본적으로 정확하다는 것을 확인하였다.

도 5는 ~150 nm PHEMA 하이드로겔 필름을 가진 물 침입 후 묻혀진 안면 PHEMA 구조를 나타내고 도 6은 ~430 nm PHEMA 하이드로겔 필름을 가진 물 속에서의 표면 구조를 나타낸다. 패널 A와 B는 두 수치에 대해 각각 CH 및 CO 범위에 해당합니다. 매장 된 인터페이스에서 관찰 된 모든 진동 피크는 날카롭고 선명합니다. 그 이유는 CaF2 기판이 매끄럽고 PHEMA.......

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토론

분자 수준에서 구조 정보를 조사하기 위해 SFG는 고유의 장점 (즉, 단층 또는 하위 단면 감도 및 계면 선택성)을 가지고 있으며, 이는 솔리드 / 솔리드, 솔리드 / 액체, 고체/가스, 액체/가스, 액체/액체 인터페이스. 장비 유지 보수 및 광학 정렬은 여전히 시간이 많이 걸리지만 표면 및 인터페이스에서 상세한 분자 수준 정보를 얻을 수 있다는 점에서 보수가 중요합니다.

프로빙 폴리(2-hydroxyethyl 메타크릴레이트) 솔루션의 표면 및 매장 인터페이스: 위에서 설명한 바와 같이 광야 계수를 조정할 수 있습니다. 이를 실험적으로 확인할 수 있습니다. CaF2 기판 표면이 매끄럽고 PHEMA 분자에 의해 침투 될 수 없기 때문에 기판과의 매설 된 인터페이스에서,이 인터페이스는 날카로운 것입니다. 그러나, 물과 표면에서, 물 분자 PHEMA 분자와 상호 작용 하 고 대량으로 확산 수 있습니다. 따라서이 인터페이스는 흐릿하고 매장 된 인터페이.......

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공개 사항

우리는 공개 할 것이 없습니다.

감사의 글

이 연구는 중국 의 기본 연구를위한 국가 핵심 개발 프로그램 (2017YFA0700500)과 중국의 국립 자연 과학 재단 (21574020)에 의해 지원되었다. 중앙대학의 기초연구기금, 강소고등교육기관(PAPD)의 우선학술프로그램 개발사업과 국립실험생물의학공학시범센터 교육 (동남 대학) 또한 크게 평가했다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스포콜린(DPPC) 아반티 폴라 지질(Avanti Polar Lipids, Inc.)850355P-1g
무수 에탄올Sinopharm 화학 시약 Co., Ltd100092680≥ 99.7%
CaF2 프리즘Chengdu YaSi Optoelectronics Co., Ltd.
염화칼슘 무수Sinopharm 화학 시약 Co., Ltd10005817≥ 96.0%
중수소화 DPPC(d-DPPC)Avanti Polar Lipids, Inc.860345P-100mg
전자기 오븐Zhejiang Supor Co., LtdC21-SDHCB37
Langmuir-Blodgett (LB) 트로프KSV NIMA Co., Ltd.KN 2003
리튬 브로마이드 무수Sinopharm 화학 시약 Co., Ltd20056926
Milli-Q 합성 시스템Millipore초순수
플라즈마 클리너Chengdu Mingheng Science& (주)테크놀로지PDC-MG산소 플라즈마 세정
폴리(2-하이드록시에틸 메타크릴레이트) (PHEMA)Sigma-Aldrich Co., LLC.192066 MSDSMw = 300 000
폴리스티렌시그마-알드리치 Co., LLC.330345 MSDSMw = 48 kDa 및 Mn = 47 kDa
실크 고치Bombyx mori의
올리고뉴클레오타이드의 단일 상보적 가닥Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.H035965'-CGAAGGCTTCCAGCT-3'
올리고뉴클레오티드 단일 가닥난징 Genscript 생명공학 Co., Ltd.H04936  콜레스테롤-트리에틸렌 글리콜(Chol-TEG)에 의해 변형된 3¢-end (5¢-GCTTCCGAAGGTCGA-3¢)
탄산나트륨 무수Sinopharm 화학 시약 Co., Ltd10019260≥ 99.8%
스핀 코터중국과학원 마이크로일렉트로닉스 연구소KW-4Aploymer 필름의 prepartion을 위해 
스텝 프로파일러VeecoDEKTAK 150필름 두께 측정용
SFG(Sum Frequency Generation) 진동 분광법 시스템EKSPLA상업용 피코초 SFG 시스템

참고문헌

  1. Shen, Y. R. Optical Second Harmonic Generation at Interfaces. Annual Review of Physical Chemistry. 40, 327-350 (1989).
  2. Shen, Y. R. Surface properties probed by second-harmonic and sum-frequency generation. Nature. 337, 519-525 (1989).
  3. Lu, X....

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