マウス肺内の選択的剤沈着を改善するための直接気管支内投与
Summary
マウスにおける実験剤の気管内(IT)投与は、しばしば遠位肺への非対称的な送達をもたらす。 本報告では、生きているマウスの各肺を非手術的にカニューレする直接気管支内(IB)アプローチについて述べた。 このアプローチは、1つの肺に薬剤を選択的に投与するために使用することができ、または両方の肺への対称剤送達を改善するために適合されてもよい。
Abstract
実験剤の気管内(IT)投与は、ブレオマイシン誘発肺線維症などの拡散性肺疾患のマウスモデルにおいて不可欠な技術である。 しかし、遠位マウス肺への気管内投与剤の分布はしばしば非対称であり、マウスの左肺の小さい(しかし同様にアクセス可能な)肺の無分別濃度が増加した。 この報告に記載されているのは、生きているマウスの左および/または右の肺を非手術的にカニューレする新しい気管支内(IB)アプローチである。 また、このアプローチを使用して、1つの肺に薬剤を選択的に投与するか、または(用量調整されたIB送達を介して)実験剤の肺送達の左右対称性を改善し、それによって拡散のモデルを改善するためにどのように使用できるかも実証されている。ブレオマイシン誘発肺線維症などの肺疾患。
Introduction
マウスにおける実験剤の直接肺投与は、肺免疫応答、急性肺損傷、および肺線維症の研究を可能にする。直接肺投与は、典型的には、前述の1、2、3に記載されているように、気管内(IT)インスティレーションを介して行われる。しかし、このアプローチは非選択的であり、非標的およびしばしば非対称的な方法で両方の肺に影響を与える。 肺損傷の実験的モデリングは、1つの特定の肺を選択的に標的化する能力から利益を得ることができ、対照として反対索肺を使用することを可能にする。逆に、ヒト拡散性肺疾患の正確なモデリングは、両側肺無益に対称的な実験剤の分布から利益を得る。
このレポートの全体的な目標は、マウスの左右の肺に実験剤を選択的に送達する方法を記述することです(図1)。この気管支内(IB)投与アプローチは、マウス肺の一方的な治療を可能にし、両側の主体気管支への薬剤の均等な送達を確実にするために容易に適合させることができる。IB投与を使用して、より大きな右肺に大きな用量の実験剤を、より小さな左肺(すなわち、用量調整IB投与)に少量を提供することにより、この報告書で実証された肺の均質性の改善である。実験剤の送達は、マウスにおける拡散性肺損傷のモデルを最適化する。したがって、この報告書は、マウスに実験剤を一方的に投与するか、両肺における薬物沈着の対称性を改善しようとする研究者にとって価値を保持する可能性がある。
Protocol
Representative Results
Discussion
肺損傷は、BLM6などの有害な薬剤のIT投与を用いてげっ歯類で古典的にモデル化されている。しかし、このようなIT投与は、このアプローチ7を用いて肺送達の非標的性を反映した斑状の傷害を引き起こしうる。肺損傷のモデリングのこれらの制限は、薬物、siRNA、細胞療法などの有害でない実験薬のIT提供を試みる際に直面する有益な課題です。
<p class="jov…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、NHLBI助成金HL125371からE.P.S.に、DOD(CDMRP)助成金W81XWH-17-1-0051によってY.Y.Y.に資金提供されました。
Materials
| 22 G shielded IV Catheter | BD | 381423 | |
| Bleomycin | Enzo life sciences | BML-AP302-0010 | |
| Compact Mini rodent anesthesia machine | DRE Veterinary | 9280 | |
| Evans blue dye | Sigma-Aldrich | E2129 | |
| FITC-dextran | Sigma-Aldrich | FD150 | |
| Isoflurane | Piramal Critical Care | NDC | |
| LED-30W Fiber Optic Dual Gooseneck Lights Microscope Illuminator | AmScope | LED-30W | |
| Low temperature cautery with fine tip | Bovie | AA02 | |
| Precisionglide needle, 18G x 1" | BD | 305195 | Beveled tip, 12 mm in length |
| Xylazine | AKORN | NDC 59399-110-20 | |
| Zatamine | VetOne | NDC 13985-702-10 | Ketamine |
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