फल मक्खी को संभालने के लिए सरल घर का बना उपकरण ]Drosophila मेलेनोगैस्टर
Summary
यहाँ वर्णित कई घर का बना उपकरण का उपयोग करने के लिए हस्तांतरण, ठंडा, और वयस्क Drosophilaको मारने के लिए, साथ ही कांच संस्कृति शीशियों को साफ करने और अंडे इकट्ठा करने के लिए. इन उपकरणों को बनाने के लिए आसान कर रहे हैं और बल्कि Drosophila से निपटने में कुशल हैं.
Abstract
फल मक्खी, Drosophila मेलेनोगैस्टर,व्यापक रूप से जैविक अनुसंधान और जीव विज्ञान दोनों शिक्षा में प्रयोग किया जाता है। वयस्क मक्खियों हैंडलिंग आम है, लेकिन व्यवहार में मुश्किल है, वयस्क मक्खियों के रूप में उड़. यहाँ प्रदर्शन किया है कि कैसे Drosophilaसे निपटने में मुश्किल मुद्दों को संबोधित करने के लिए कुछ सरल और लागत प्रभावी उपकरण बनाने के लिए . फोम stoppers में छेद बना रहे हैं और pippette युक्तियाँ या कीप छेद में डाला जाता है. मक्खी तो पिपेट टिप में केवल एक ही दिशा में ले जाते हैं / मौजूदा प्रोटोकॉल कुचल बर्फ में ठंडा और उन्हें एक ठंड, हार्ड आइसपैक सतह पर स्थानांतरित करके शांत-एनेस्थेटाइज़िंग मक्खियों के लिए संशोधित किया गया है। आइसपैक चिकित्सा धुंध का एक टुकड़ा है कि एक स्टीरियोमाइक्रोस्कोप के तहत जांच की जब संघनित पानी से स्थिर मक्खियों रहता है के साथ कवर किया जाता है। मक्खियों अंत में गिनती और छँटाई या microwaving द्वारा खारिज के लिए ethanized हैं. एक बोतल के आकार का पिंजरे भी अंडे इकट्ठा करने के लिए विकसित किया गया है, साथ ही साथ एक श्रम की बचत डिवाइस और कांच संस्कृति शीशियों की सफाई के लिए प्रोटोकॉल के साथ.
Introduction
फल मक्खी, Drosophila मेलेनोगैस्टर, व्यापक रूप से जैविक अनुसंधान और जीव विज्ञान शिक्षा में इस्तेमाल किया विषयों की एक विस्तृत श्रृंखला का अध्ययन करने के लिए एक मॉडल जीवहै 1,2. Drosophila से निपटने की बुनियादी समस्याओं शीशी से शीशी और मक्खियों की अचलीकरण के लिए वयस्कों के हस्तांतरण कर रहे हैं ताकि वे संभाल करने के लिए आसान कर रहे हैं, के रूप में सभी वयस्कों (कुछ म्यूटेंट के लिए छोड़कर3,4) उड़ सकता है.
परंपरागत रूप से, एक शोधकर्ता दो शीशियों मुंह से मुंह पकड़ कर एक शीशी से दूसरे करने के लिए मक्खियों स्थानान्तरण, नीचे मक्खियों दोहन या मक्खियों एक और शीशी में उड़ान भरने के लिए अनुमति देता है, तो अलग और दोनों शीशियों replugging4. जाहिर है, यह आवश्यक है कि एक ही व्यास के साथ दो शीशियों के उद्घाटन, और यह स्थानांतरित मक्खियों की मात्रा को नियंत्रित करने के लिए मुश्किल है. इस बीच, यह काम करने के लिए जल्दी हाथ की आवश्यकता है, और आवारा मक्खियों से बचने प्रयोगशाला या कक्षा के लिए समस्याओं में परिणाम कर सकते हैं. एक पहले से ही तैयार पार करने के लिए अतिरिक्त कुंवारी मक्खियों या पुरुष मक्खियों जोड़ना Drosophila प्रयोगों में एक और नियमित कार्य है. परंपरागत रूप से, मक्खियों अतिरिक्त मक्खियों के अलावा से पहले पार शीशी में स्थिर किया जाना चाहिए।
वयस्क Drosophila नियमित रूप से ईथर , सीओ2, या द्रुतशीतन5द्वारा anaesthetized कर रहे हैं . ईथर और सीओ2 जोखिम की तुलना में, द्रुतशीतन वयस्क Drosophila और दोनों मक्खियों और शोधकर्ताओं (विशेषरूप से युवा छात्रों) 6,7के लिए कम से कम हानिकारक स्थिर करने के लिए सबसे अधिक लागत कुशल एजेंट है. हालांकि, पानी जो ठंडी सतह या चैम्बर पर लगातार गाढ़ा होता है, मक्खियों को गीला कर देता है। गीली मक्खियों के फीनोटाइप का निर्धारण करना कठिन है और हेरफेर8,9के दौरान वे आसानी से क्षतिग्रस्त हो सकते हैं। यह अधिक व्यापक रूप से स्वीकार किए जाते हैं बनने से द्रुतशीतन विधि रखा गया है.
फ्लाई ट्रांसफरल के उपकरण और फ्लाई कूलिंग के लिए एक विधि पहले10वर्णित किया गया है। यहाँ, एक संशोधित द्रुतशीतन संज्ञाहरण तकनीक है कि सुरक्षित है, विश्वसनीय, और Drosophila प्रयोगों के लिए संभव है बताया गया है. इसके अलावा इस पत्र में वर्णित 1) गिनती के लिए वयस्कों की हत्या के लिए तरीके हैं, छँटाई, या discarding, 2) श्रम की बचत उपकरणों और कांच संस्कृति शीशियों की सफाई के लिए प्रोटोकॉल, और 3) अंडे इकट्ठा करने के लिए एक साधारण पिंजरे. आसानी से डिजाइन और लागत प्रभावी उपकरण यहाँ वर्णित मक्खी से निपटने के कठिन मुद्दों को संबोधित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, और इन तरीकों का परीक्षण किया गया है और मजबूत, विश्वसनीय, और अनुभवी और नौसिखिया शोधकर्ताओं के लिए आसान करने के लिए संभाल साबित हो रहे हैं.
Protocol
Representative Results
Discussion
Drosophila पालन और प्रयोग में शामिल बुनियादी गतिविधियों से निपटने के लिए कुछ घर का बना उपकरण इस कागज में वर्णित हैं. इन उपकरणों को सरल लेकिन बल्कि प्रभावी रहे हैं. वस्तुतः, किसी भी प्रयोगशाला आसानी से इन उप?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
कोई नहीं
Materials
| a pair of pliers | |||
| cordless drill driver | max speed: 500 rpm | ||
| electric soldering iron | |||
| file | |||
| funnel | diameter of disk<60mm | ||
| ice box | |||
| insect pins | |||
| infrared thermometer | HCIYET HT-830 | ||
| long cuff rubber gloves | |||
| mechanical pencils | |||
| medical gauze | |||
| microcentrifuge tube | 100 ul | ||
| microwave oven | |||
| Parafilm | |||
| peri dish | internal diameter 60 mm | ||
| pipette tips | 1 ml | ||
| plastic film | |||
| plastic peri dish | Φ36 mm used to cover the empty vial | ||
| point tweezers | |||
| protective work gloves | |||
| re-freezable hard icepacks | 26.5×14.5×2.5 cm or larger | ||
| rubber air blower | |||
| snap cutter | |||
| soft drink bottle | 500 ml, internal diameter c.a. 65 mm | ||
| sponge stopper | |||
| stainless steel sponges | |||
| tube brush | |||
| vial | Φ34 mm × 90 mm |
References
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. . Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , (2018).
- Ashburner, M., Roote, J., Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, R. S. Laboratory Culture of Drosophila. Drosophila Protocols. , (2000).
- Greenspan, R. J. Fly pushing: The theory and practice of Drosophila genetics. Cold Spring Harbor Laboratory Press. , (2004).
- Ashburner, M., Thompson, J., Ashburner, M., Wright, T. R. F. The laboratory culture of Drosophila. The genetics and biology of Drosophila. 2a, 1-109 (1978).
- Ratterman, D. M., O'Donnell, M. A. Eliminating ether by using ice for Drosophila labs. Tested Studies For Laboratory Teaching. , 259-265 (2003).
- . Culturing techniques for Drosophila Available from: https://www.ptbeach.com/cms/lib/NJ01000839/Centricity/Domain/113/ap%20biology%20Labs/Culturing%20techniques%20for%20Drosophila.pdf (2019)
- Markow, T. A., O'Grady, P. M. . Drosophila: A Guide to Species Identification and Use. , (2006).
- Artiss, T., Hughes, B. Taking the Headaches Out of Anesthetizing Drosophila: A Cheap & Easy Method of Constructing Carbon Dioxide Staging. The American Biology Teacher. 69 (8), e77-e80 (2007).
- Qu, W. -. H., Zhu, T. -. B., Yang, D. -. X. A Modified Cooling Method and its Application in Drosophila Experiments. Journal Of Biological Education. 49 (3), 302-308 (2015).
- . Egg-laying cages for drosophila Available from: https://www.kisker-biotech.com/frontoffice/product?produitId=0H-19-17 (2018)
- Roberts, D. B. . Drosophila: a practical approach. , (1998).
- Tang, M., Peng, Q. -. F., Yang, D. Two devices for Drosophila experiments (in Chinese). Bulletin of Biology. 45 (11), 49-50 (2010).
- Zhou, T. -. y., Gan, J., Yang, D. Preparation of sponge plug and sponge plug based fly transferring device for Drosophila experiments (in Chinese). Bulletin of Biology. 46 (6), 49-50 (2011).
- Yang, D. . Genetics laboratory investigation. , (2016).
- Yang, D. Carnivory in the larvae of Drosophila melanogaster and other Drosophila species. Scientific Reports. 8, (2018).
- Stocker, H., Gallant, P., Dahmann, C. Getting Started: An Overview on Raising and Handling Drosophila. Drosophila: Methods and Protocols. , (2008).
